一种对CYP2C9位点进行基因型检测的检测方法及其试剂盒技术

技术编号:17419006 阅读:54 留言:0更新日期:2018-03-07 15:36
一种对CYP2C9位点进行基因型检测的检测方法及其试剂盒,本发明专利技术涉及分子生物学和医学领域,为了通过对CYP2C9位点基因型检测对痛风或高尿酸血症患者服用后发生肝毒性副作用风险进行预测,通过设计特异性引物和探针,与带有特定报告基因的MagPlex‑TAG磁珠进行杂交反应,通过显色反应在luminex 200仪器上进行检测,本发明专利技术提供的检测试剂盒灵敏、快速低检测。

A detection method for genotypic detection of CYP2C9 loci and its kit

A kind of CYP2C9 locus genotype detection method and kit, the invention relates to the field of molecular biology and medicine, in order to pass on CYP2C9 gene type detection of gout or hyperuricemia patients after taking liver toxicity side effect risk prediction, through the design of primers and probes, and with specific reporter gene MagPlex TAG magnetic beads hybridization reaction, by color reaction were detected in Luminex 200 instruments, detection kit provided by the invention is sensitive, fast and low detection.

【技术实现步骤摘要】
一种对CYP2C9位点进行基因型检测的检测方法及其试剂盒
本专利技术涉及分子生物学和医学领域,更具体的,本专利技术涉及检测CYP2C9基因型SNP位点的方法及其试剂盒,通过检测该基因SNP基因型来评估痛风、高尿酸血症患者在服用苯溴马隆降尿酸治疗中不良反应风险。
技术介绍
高尿酸血症是体内嘌呤代谢异常(血尿酸生成过多或排出不足)导致的一类慢性代谢性疾病;血尿酸沉积于关节腔引发炎症即引起痛风性关节炎;同时,国内外研究表明,高尿酸血症是一个引起高血压、代谢综合征、脂肪肝、糖尿病及肾损害的持续而独立的危险因素。国内数据显示,2010年中国高尿酸血症的患病率达8.4%,部分地区可达20%,中国约有1亿人患有高尿酸血症。控制血尿酸是治疗高尿酸血症及其引发的一系列关节损害和心血管损害的关键。苯溴马隆(Benzbromarone)是促尿酸排泄药物,是苯骈呋喃衍生物,其作用机制主要是通过抑制肾小管对尿酸的重吸收,从而降低血液中尿酸的浓度。苯溴马隆的主要代谢产物为6-羟基苯溴马隆,可以通过抑制近端肾小管尿酸转运体(URAT1)来减少尿酸重吸收,苯溴马隆代谢为6-羟基苯溴马隆主要与细胞色素酶P2C9(CY本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种对CYP2C9位点进行基因型检测的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒包括如下序列的引物:

【技术特征摘要】
1.一种对CYP2C9位点进行基因型检测的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒包括如下序列的引物:2.如权利要求1所述的一种对CYP2C9位点进行基因型检测的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒包括如下序列的特异探针:3.如权利要求1所述的一种对CYP2C9位点进行基因型检测的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒还包括如下序列的报告探针:TTGACCTTCTCCCCACC。4.一种对CYP2C9位点进行基因型检测的方法,其特征在于,所述的方法包括如下步骤:首先进行PCR反应,实现扩增;再进行多重OLA反应,标记和连接;然后进行杂交反应,最后进行基因型的分析。5.如权利要求4所述的一种对CYP2C9位点进行基因型检测的方法,其特征在于,PCR反应体系如下:2xqiagenHotstarMM5ul,primermix1ul,DNA样本2ul,灭菌水2ul;反应条件为95℃、15min,进行30个循环的94℃,30秒,60℃,30秒,72℃,30秒;72℃、7分钟,4℃维持。6.如权利要求4所述的一种对CYP2C9位点进行基因型检测的方法,其特征在于,多重OLA反应如下:配制2xOLAmastermix,将OLAmastermix与PCR反应产物混合,混匀后进行连接反应。7.如权利要求6所述的一种对CYP2C9位点进行基因型检测的方法,其特征在于,配制2xOLAmastermix包括有:10xTaqLigasebuffer2ul,40,000U/ml的TaqDNALigase0.25ul,野生型探针mix1ul,突变型探针mix2ul,去离...

【专利技术属性】
技术研发人员:杜予和
申请(专利权)人:广州和康医疗技术有限公司
类型:发明
国别省市:广东,44

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