生物缀合物及其用途制造技术

本文提供了包含聚糖和与其结合的1至约50个肽的生物缀合物，其中所述肽包含胶原结合单元、透明质酸结合单元、ICAM结合单元、VCAM结合单元和/或选择素结合单元。本文还提供了包含该生物缀合物的组合物及其用途。

Bioconjugates and their uses

In this paper, bioconjugates containing 1 to 50 peptides and their conjugates are provided, which contain collagen binding units, hyaluronic acid binding units, ICAM binding units, VCAM binding units and / or selectin binding units. The composition and use of the conjugates are also provided in this article.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】生物缀合物及其用途相关申请的交叉引用本申请根据35U.S.C.119(e)要求2015年4月17日提交的美国临时申请序列号62/149,428、2015年10月13日提交的美国临时申请序列号62/241,057、以及2015年10月21日提交的美国临时申请序列号62/244,665的利益，其每个的全部内容都通过引用合并入本文中。
本文提供的是包含聚糖和结合至该聚糖的1至约50个肽的生物缀合物（bioconjugate），其中所述肽包含胶原结合单元、透明质酸结合单元、ICAM结合单元、VCAM结合单元、和/或选择素结合单元，本文还提供了包含上述生物缀合物的组合物、及其用途。
技术介绍
在组织中，细胞被包含各种大分子的细胞外基质（ECM）包围，所述大分子例如是生物缀合物、胶原、透明质酸、层粘连蛋白、纤连蛋白等。在哺乳动物中，生物缀合物是细胞外基质的主要成分，在此它们与其他生物缀合物、透明质酸、以及纤维基质蛋白质（例如胶原）形成大的复合物。随着哺乳动物年龄增长和在某些疾病状态中，身体的某些部位（例如滑膜关节、玻璃体液、脊椎盘、皮肤等）中的细胞外基质会降解，引起不良的症状，例如各种形式的关节本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种生物缀合物，其包含聚糖和至少一个肽，其中所述肽包含胶原结合单元、透明质酸结合单元、ICAM结合单元、VCAM结合单元和/或选择素结合单元，并通过酰肼‑羰基键与聚糖结合。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.04.17 US 62/149,428;2015.10.13 US 62/241,057;1.一种生物缀合物，其包含聚糖和至少一个肽，其中所述肽包含胶原结合单元、透明质酸结合单元、ICAM结合单元、VCAM结合单元和/或选择素结合单元，并通过酰肼-羰基键与聚糖结合。2.根据权利要求1所述的生物缀合物，其中所述聚糖选自藻酸盐、软骨素、硫酸软骨素、皮肤素、硫酸皮肤素、乙酰肝素、硫酸乙酰肝素、肝素、葡聚糖、硫酸葡聚糖和透明质酸或它们的衍生物。3.根据权利要求1所述的生物缀合物，其中所述肽包含胶原结合单元。4.根据权利要求3所述的生物缀合物，其中所述肽的胶原结合单元以低于约1mM的解离常数(Kd)结合至胶原。5.根据权利要求1所述的生物缀合物，其中所述肽包含透明质酸结合单元。6.根据权利要求5所述的生物缀合物，其中所述肽的透明质酸结合单元以低于约1mM的解离常数(Kd)结合至透明质酸。7.根据权利要求1所述的生物缀合物，其中所述生物缀合物包含具有至少一个胶原结合单元的肽和具有至少一个透明质酸结合单元的肽，和/或至少一个具有胶原结合单元和透明质酸结合单元的肽。8.根据权利要求1所述的生物缀合物，其中所述生物缀合物包含至少一个具有ICAM结合单元的肽和至少一个具有选择素结合单元的肽。9.根据前述任一项权利要求所述的生物缀合物，其中所述肽包含至多约120个氨基酸、或至多约100个氨基酸、或至多约50个氨基酸、或至多约40个氨基酸。10.根据前述任一项权利要求所述的生物缀合物，其中所述肽包含至多约25个氨基酸。11.根据前述任一项权利要求所述的生物缀合物，其中所述生物缀合物包含1至约25个肽、或约5至约25个肽、或约11至约14个肽。12.根据前述任一项权利要求所述的生物缀合物，其中所述生物缀合物包含1至约10个肽、或约7-8个肽。13.根据前述任一项权利要求所述的生物缀合物，其中所述聚糖包含约1％至约75％的官能化，其中所述官能化百分比(％)由所述聚糖上被肽官能化的二糖单元的百分比确定。14.根据前述任一项权利要求所述的生物缀合物，其中所述聚糖包含约5％至约30％的官能化，或约10％至约40％的官能化。15.根据前述任一项权利要求所述的生物缀合物，其中所述聚糖包含约25％的官能化，或约30％的官能化。16.根据前述任一项权利要求所述的生物缀合物，其中所述聚糖不含氧化裂解的糖单元。17.根据前述任一项权利要求所述的生物缀合物，其中所述聚糖是衍生的聚糖。18.根据权利要求17所述的生物缀合物，其中所述衍生的聚糖是部分N-脱硫酸衍生物、部分O-脱硫酸衍生物、部分O-羧甲基化衍生物或它们的任何组合。19.根据权利要求1所述的生物缀合物，其中所述肽包含的氨基酸序列选自：YKSILY(SEQIDNO:179)、LYKSILY(SEQIDNO:180)、ELYKSILY(SEQIDNO:181)、GELYKSILY(SEQIDNO:2)、AGELYKSILY(SEQIDNO:182)、KAGELYKSILY(SEQIDNO:183)、LKAGELYKSILY(SEQIDNO:184)、ALKAGELYKSILY(SEQIDNO:185)、AALKAGELYKSILY(SEQIDNO:186)、NAALKAGELYKSILY(SEQIDNO:187)、ANAALKAGELYKSILY(SEQIDNO:188)、RANAALKAGELYKSILY(SEQIDNO:189)、RRANAALKAGELYKSILY(SEQIDNO:1)、QLYKSILY(SEQIDNO:190)、GQLYKSILY(SEQIDNO:16)、AGQLYKSILY(SEQIDNO:191)、KAGQLYKSILY(SEQIDNO:192)、LKAGQLYKSILY(SEQIDNO:193)、ALKAGQLYKSILY(SEQIDNO:194)、AALKAGQLYKSILY(SEQIDNO:195)、NAALKAGQLYKSILY(SEQIDNO:196)、ANAALKAGQLYKSILY(SEQIDNO:197)、RANAALKAGQLYKSILY(SEQIDNO:198)以及RRANAALKAGQLYKSILY(SEQIDNO:17)，或包含与上述序列具有至少约80%序列同一性并且包含至少一个YKS序列的序列。20.根据权利要求1所述的生物缀合物，其中所述肽包含的氨基酸序列选自：YKCILY(SEQIDNO:199)、LYKCILY(SEQIDNO:200)、ELYKCILY(SEQIDNO:201)、GELYKCILY(SEQIDNO:4)、AGELYKCILY(SEQIDNO:202)、KAGELYKCILY(SEQIDNO:203)、LKAGELYKCILY(SEQIDNO:204)、ALKAGELYKCILY(SEQIDNO:205)、AALKAGELYKCILY(SEQIDNO:206)、NAALKAGELYKCILY(SEQIDNO:207)、ANAALKAGELYKCILY(SEQIDNO:208)、RANAALKAGELYKCILY(SEQIDNO:209)、RRANAALKAGELYKCILY(SEQIDNO:3)、QLYKCILY(SEQIDNO:210)、GQLYKCILY(SEQIDNO:211)、AGQLYKCILY(SEQIDNO:212)、KAGQLYKCILY(SEQIDNO:213)、LKAGQLYKCILY(SEQIDNO:214)、ALKAGQLYKCILY(SEQIDNO:215)、AALKAGQLYKCILY(SEQIDNO:216)、NAALKAGQLYKCILY(SEQIDNO:217)、ANAALKAGQLYKCILY(SEQIDNO:218)、RANAALKAGQLYKCILY(SEQIDNO:219)以及RRANAALKAGQLYKCILY(SEQIDNO:220)，或包含与上述序列具有至少约80%序列同一性并且包含至少一个YKS序列的序列。21.根据权利要求1所述的生物缀合物，其中所述肽包含氨基酸序列GAHWQFNALTVR(SEQIDNO:58)或与该序列具有至少约80%序列同一性并且能够结合至透明质酸的序列。22.根据权利要求1所述的生物缀合物，其中所述肽包含氨基酸序列STMMSRSHKTRSHHV(SEQIDNO:59)或与该序列具有至少约80%序列同一性并且能够结合至透明质酸的序列。23.根据权利要求1所述的生物缀合物，其中所述肽包含GAHWQFNALTVR(SEQIDNO:58)或GAHWQFNALTVRGSG(SEQIDNO:357)或与前述序列具有至少约80%序列同一性并且能够结合至透明质酸的序列中的至少一个序列，以及WYRGRL(SEQIDNO:29)或WYRGRLGSG(SEQIDNO:392)或与前述序列具有至少约80%序列同一性并且能够结合至胶原的序列中的至少一个序列。24.根据权利要求1所述的生物缀合物，其中所述肽包含GAHWQFNALTVR(SEQIDNO:58)或GAHWQFNALTVRGSG(SEQIDNO:357)或与前述序列具有至少约80%序列同一性并且能够结合至透明质酸的序列中的至少一个序列，以及RRANAALKAGELYKSILY(SEQIDNO:1)或RRANAALKAGELYKSILYGSG(SEQIDNO:287)或与前述序列具有至少约80%序列同一性并且能够结合至胶原的序列中的至少一个序列。25.根据权利要求1所述的生物缀合物，其中所述肽包含的氨基酸序列选自：i)IELLQAR(SEQIDNO:117)、IELLQARGSC(SEQIDNO:118)、IDLMQAR(SEQIDNO:119)、IDLMQARGSC(SEQIDNO:120)、QITWAQLWNMMK(SEQIDNO:121)、QITWAQLWNMMKGSC(SEQIDNO:122)、NAFKILVVITFGEK(SEQIDNO:152)、NAFKILVVITFGEKGSC(SEQIDNO:153)、ITDGEA(SEQIDNO:154)、ITDGEAGSC(SEQIDNO:155)、DGEATD(SEQIDNO:156)、或DGEATDGSC(SEQIDNO:157)、或与前述序列具有至少约80%序列同一性并且能够结合至选择素、ICAM和/或VCAM的序列。26.根据前述任一项权利要求所述的生物缀合物，其中所述酰肼基团任选地经由间隔物键合至所述肽的C末端。27.根据前述任一项权利要求所述的生物缀合物，其中所述酰肼基团任选地经由间隔物键合至所述肽的N末端。28.根据前述任一项权利要求所述的生物缀合物，其中所述酰肼基团经由间隔物键合至所述C末端，上述间隔物包含一个或多个选自甘氨酸、丙氨酸、精氨酸、赖氨酸和丝氨酸的氨基酸。29.根据权利要求27所述的生物缀合物，其中所述间隔物选自甘氨酸、甘氨酸-甘氨酸、丝氨酸-甘氨酸、赖氨酸-精氨酸、精氨酸-精氨酸和甘氨酸-丝氨酸-甘氨酸。30.一种组合物，其包含前述任一项权利要求所述的生物缀合物，其中每个聚糖的平均肽数目少于约30个。31.一种组合物，其包含权利要求1-29的任一项所述的生物缀合物，其中每个聚糖的平均肽数目为约5个至约30个。32.一种组合物，其包含权利要求1-29的任一项所述的生物缀合物，其中每个聚糖的平均肽数目为约7个。33.一种组合物，其包含权利要求1-29的任一项所述的生物缀合物或权利要求30-32的任一项所述的组合物，以及包含胶原结合单元、透明质酸结合单元、ICAM结合单元、VCAM结合单元和/或选择素结合单元的额外的肽，其中所...

【专利技术属性】
技术研发人员：格伦·普雷斯特维奇，约翰·埃里克·帕代里，茱莉娅·陈，拉什·劳埃德·巴特利特二世，
申请(专利权)人：斯米克IP有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US