一种薄荷精油的指纹图谱检测方法技术

本发明专利技术公开了一种薄荷精油指纹图谱检测技术。薄荷精油以正己烷作为稀释溶剂，以合相色谱仪检测，结合PDA检测器测定，建立特征峰PDA谱图库，并建立薄荷精油标准对照指纹图谱。提取待检测薄荷精油的合相色谱指纹图谱中色谱峰PDA光谱图与特征峰光谱谱图库检索比对，识别共有特征峰；再以夹角余弦法进行与薄荷精油标准对照指纹图谱相似度评价，当相似度≥0.90时，确定待检测的薄荷精油为纯品薄荷精油；当相似度＜0.90时，确定待检测的薄荷精油为非纯品薄荷精油；实现薄荷精油的快速、有效鉴别，对于薄荷精油质量控制及其掺假识别具有一定意义。

A fingerprint detection method for peppermint essential oil

The invention discloses a fingerprint detection technique for mint essential oil. The essential oil of peppermint was extracted by n-hexane as a diluent solvent. The PDA Library of characteristic peak was established by the combination chromatography and PDA detector. The standard fingerprint of peppermint essential oil was established. To detect the extraction of peppermint oil chromatographic peaks of PDA spectra and characteristic peak spectral database retrieval on fingerprint recognition, the common characteristic peaks; then by cosine method for fingerprint similarity evaluation and control standard of peppermint oil, when the similarity is not less than 0.90, to determine the detection of peppermint pure mint essential oil; when the similarity is less than 0.90, to determine the detection of peppermint oil non pure peppermint oil; to achieve rapid and effective identification of peppermint oil, has a certain significance for quality control and identification of adulteration of peppermint oil.

【技术实现步骤摘要】
一种薄荷精油的指纹图谱检测方法
本专利技术属于检测分析
，具体涉及一种薄荷精油指纹图谱检测技术。
技术介绍
薄荷为唇形科植物，是重要的天然香料植物。薄荷精油是薄荷的新鲜茎和叶经水蒸气蒸馏、冷冻、部分脱脑加工提取的挥发油，为无色或淡黄色的澄清液体，有特殊清凉香气。薄荷精油包含醇类、酮类、酯类、萜烯类等多种活性成分，有疏风，清热的功效。薄荷精油及其衍生品，具有抗菌活性及抗氧化性，广泛应用于各类化妆品、食品、药品以及烟草等领域。薄荷精油是用途最广和用量最大的天然香料之一，随着世界经济的发展，薄荷精油产品消费量不断递增。然而由于纯天然植物精油价格高，薄荷精油掺假问题也一直存在。目前检测方法主要为常规理化及气相色谱法，存在检测时间长、定性效果不好等技术问题。因此研究和开发一种能够快速、有效的鉴别薄荷精油的方法，对于其掺假识别及质量控制而言显得尤为重要。
技术实现思路
为解决现有技术中存在的检测时间长、定性效果不好等技术问题，本专利技术提供一种快速、有效的薄荷精油的指纹图谱检测方法。本专利技术以正己烷作为薄荷精油稀释溶剂，以合相色谱仪检测，PDA检测器测定，建立薄荷精油特征峰PDA光谱谱图库，并建立薄荷精油标准对照指纹图谱。结合待检样品与标准对照指纹图谱特征峰PDA谱图检索比对及色谱图相似度评价，进行薄荷精油的快速、有效鉴别。本专利技术的具体操作步骤如下：（1）建立薄荷精油标准对照指纹图谱在薄荷精油中加入正己烷，得到薄荷精油稀释液；对薄荷精油稀释液进行合相色谱仪检测，结合PDA检测器测定，得到235nm波长下的薄荷精油的合相色谱指纹图谱；根据20份薄荷精油的合相色谱指纹图谱，选取20份薄荷精油中共有率大于70%的峰作为共有特征峰，提取特征峰PDA光谱图，建立特征峰光谱谱图库；计算出20份薄荷精油中每一个共有峰的平均峰面积、平均保留时间以及对应平均强度信号值，绘制得到薄荷精油标准对照指纹图谱；（2）检测鉴别（2.1）在待检测的薄荷精油中加入正己烷，得到待测薄荷精油稀释液；对待测薄荷精油稀释液进行合相色谱仪检测，结合PDA检测器测定，得到待测薄荷精油的合相色谱指纹图谱；（2.2）提取待检测薄荷精油的合相色谱指纹图谱中色谱峰PDA光谱图与特征峰光谱谱图库检索比对，识别共有特征峰，之后以夹角余弦法进行薄荷精油标准对照指纹图谱相似度评价，当相似度≥0.90时，确定待检测的薄荷精油为纯品薄荷精油；当相似度＜0.90时，确定待检测的薄荷精油为非纯品薄荷精油；实现薄荷精油的快速、有效鉴别，以应用于薄荷精油质量控制及其掺假识别。进一步限定的技术方案如下：步骤（1）中，取100μL薄荷精油，加入正己烷至1mL，得到薄荷精油稀释液，过0.22µm有机滤膜进合相色谱仪检测。步骤（1）中，合相色谱条件：采用AcqtityUPC2BEH色谱柱（50mm×2.1mm，1.8μm），PDA检测器，系统背压为2000psi，色谱柱温度为40℃，柱流速为0.8mL/min；流动相分别为流动相A和流动相B，流动相A为超临界CO2，流动相B为乙腈-甲醇溶液（乙腈-甲醇体积比为1：1）；初始流动相为100%的流动相A，梯度洗脱，进样量为1.0μL。所述的梯度洗脱为：初始流动相保持2min；2~3min，100%流动相A~99.5%流动相A，之后保持3分钟；6~7min，99.5%流动相A~90%流动相A，然后保持2min；之后由90%流动相A升到100%流动相A，保持5min。步骤（2.1）中，取100μL待检测的薄荷精油，加入1mL正己烷，得到待测薄荷精油稀释液，过0.22µm有机滤膜进合相色谱仪检测。步骤（2.1）中，合相色谱条件：采用AcqtityUPC2BEH色谱柱（50mm×2.1mm，1.8μm），PDA检测器，系统背压为2000psi，色谱柱温度为40℃，柱流速为0.8mL/min；流动相分别为流动相A和流动相B，流动相A为超临界CO2，流动相B为乙腈-甲醇溶液（乙腈-甲醇体积比为1：1）；初始流动相为100%的流动相A，梯度洗脱，进样量为1.0μL。所述的梯度洗脱为：初始流动相保持2min；2~3min，100%流动相A~99.5%流动相A，之后保持3分钟；6~7min，99.5%流动相A~90%流动相A，然后保持2min；之后由90%流动相A升到100%流动相A，保持5min。本专利技术与现有技术相比具有以下优势：1.本专利技术的薄荷精油指纹图谱检测方法结合光谱谱图比对及指纹图谱相似度评价双重定性，基于成分组成及含量差异、色谱保留行为的不同，能够有效应用于天然薄荷精油与合成薄荷精油、掺假薄荷精油的区分，为薄荷精油质量控制提供有效手段。2.针对薄荷油掺低廉植物油检测，与气相色谱法不同，本专利技术不需要甲酯化衍生等繁琐步骤，样品直接稀释进样既可，大大简化了前处理工作，同时避免了气相色谱可能导致样品中相关成分发生热重拍和热转化效应。3.本专利技术的薄荷精油指纹图谱检测方法不需要样品前处理，每针样品在10min内出峰完毕，大大减少了检测时间，降低了检测成本，成为一种快速、方便鉴定薄荷精油的方法。附图说明图1为实施例1中薄荷精油标准对照指纹图谱。图2为实施例2中薄荷精油的合相色谱指纹图谱。图3为实施例3中留兰香油的合相色谱指纹图谱。图4为实施例4中薄荷香精溶液的合相色谱指纹图谱。图5为实施例5中待测样品的合相色谱指纹图谱。具体实施方式下面结合附图，通过实施例对本专利技术作进一步地说明。本专利技术中涉及的实验仪器和药品、试剂如下：实验仪器：ACQUITY超高效合相色谱仪（美国Waters公司）；合相色谱柱：AcqtityUPC2BEH色谱柱（50mm×2.1mm,1.8μm，美国Waters公司）；检测器：PDA检测器。实验药品及试剂：薄荷精油为纯薄荷精油（安徽丰乐香料责任有限公司），正己烷（色谱纯，美国Tedia试剂公司）。实施例1建立薄荷精油标准对照指纹图谱：取薄荷精油100μL，加入正己烷至1mL，得到薄荷精油稀释液，过0.22µm有机滤膜进合相色谱仪检测，PDA检测器测定。合相色谱条件：采用AcqtityUPC2BEH色谱柱（50mm×2.1mm，1.8μm），PDA检测器，系统背压为2000psi，色谱柱温度为40℃，柱流速为0.8mL/min，流动相分别为流动相A和流动相B，流动相A为超临界CO2，流动相B为乙腈-甲醇溶液（乙腈-甲醇体积比为1：1）；初始流动相为100%的流动相A，梯度洗脱，PDA波长采集范围为200nm~310nm，进样量优选为1.0μL。梯度洗脱条件：初始流动相保持2min；2~3min，100%流动相A~99.5%流动相A，之后保持3分钟；6~7min，99.5%流动相A~90%流动相A，然后保持2min；之后由90%流动相A升到100%流动相A，保持5min。以235nm波长下色谱图作为薄荷精油的合相色指纹图谱。根据20份薄荷精油的合相色谱指纹图谱，选取其中共有率大于70%的峰作为共有特征峰，提取特征峰PDA光谱图，建立特征峰光谱谱图库。计算出20份薄荷精油中每一个共有峰的平均峰面积、平均保留时间以及对应平均强度信号值，绘制得到薄荷精油标准对照指纹图谱，见图1。以下实施例2-5为薄荷精油合相色谱检测的具体操作方法。实施例2样品：薄荷精本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种薄荷精油的指纹图谱检测方法，其特征在于操作步骤如下：（1）建立薄荷精油标准对照指纹图谱在薄荷精油中加入正己烷，得到薄荷精油稀释液；对薄荷精油稀释液进行合相色谱仪检测，结合PDA检测器测定，得到235nm波长下的薄荷精油的合相色谱指纹图谱；根据20份薄荷精油的合相色谱指纹图谱，选取20份薄荷精油中共有率大于70%的峰作为共有特征峰，提取特征峰PDA光谱图，建立特征峰光谱谱图库；计算出20份薄荷精油中每一个共有峰的平均峰面积、平均保留时间以及对应平均强度信号值，绘制得到薄荷精油标准对照指纹图谱；（2）检测鉴别（2.1）在待检测的薄荷精油中加入正己烷，得到待测薄荷精油稀释液；对待测薄荷精油稀释液进行合相色谱仪检测，结合PDA检测器测定，得到待测薄荷精油的合相色谱指纹图谱；（2.2）提取待检测薄荷精油的合相色谱指纹图谱中色谱峰PDA光谱图与特征峰光谱谱图库检索比对，识别共有特征峰；再以夹角余弦法进行与薄荷精油标准对照指纹图谱相似度评价，当相似度≥0.90时，确定待检测的薄荷精油为纯品薄荷精油；当相似度＜0.90时，确定待检测的薄荷精油为非纯品薄荷精油；实现薄荷精油的快速、有效鉴别，以应用于薄荷精油质量控制及其掺假识别。...

【技术特征摘要】
1.一种薄荷精油的指纹图谱检测方法，其特征在于操作步骤如下：（1）建立薄荷精油标准对照指纹图谱在薄荷精油中加入正己烷，得到薄荷精油稀释液；对薄荷精油稀释液进行合相色谱仪检测，结合PDA检测器测定，得到235nm波长下的薄荷精油的合相色谱指纹图谱；根据20份薄荷精油的合相色谱指纹图谱，选取20份薄荷精油中共有率大于70%的峰作为共有特征峰，提取特征峰PDA光谱图，建立特征峰光谱谱图库；计算出20份薄荷精油中每一个共有峰的平均峰面积、平均保留时间以及对应平均强度信号值，绘制得到薄荷精油标准对照指纹图谱；（2）检测鉴别（2.1）在待检测的薄荷精油中加入正己烷，得到待测薄荷精油稀释液；对待测薄荷精油稀释液进行合相色谱仪检测，结合PDA检测器测定，得到待测薄荷精油的合相色谱指纹图谱；（2.2）提取待检测薄荷精油的合相色谱指纹图谱中色谱峰PDA光谱图与特征峰光谱谱图库检索比对，识别共有特征峰；再以夹角余弦法进行与薄荷精油标准对照指纹图谱相似度评价，当相似度≥0.90时，确定待检测的薄荷精油为纯品薄荷精油；当相似度＜0.90时，确定待检测的薄荷精油为非纯品薄荷精油；实现薄荷精油的快速、有效鉴别，以应用于薄荷精油质量控制及其掺假识别。2.根据权利要求1所述的一种薄荷精油的指纹图谱检测方法，其特征在于：步骤（1）中，取100μL薄荷精油，加入正己烷至1mL，得到薄荷精油稀释液，过0.22µm有机滤膜进合相色谱仪检测。3.根据权利要求1所述的一种薄荷精油的指纹图谱检测方法，其特征在于：步骤（1）中，合相色谱条件：采用AcqtityUPC2BEH色谱柱（50mm×2.1mm，1.8μm），PDA检测器，系统背压为2000psi，色谱柱温度为4...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋伟，韩芳，吕亚宁，胡艳云，周典兵，丁磊，郑平，邓晓军，盛旋，
申请(专利权)人：安徽出入境检验检疫局检验检疫技术中心，上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：安徽,34