象草体细胞培养植株再生方法技术

本发明专利技术为象草体细胞培养高频率植株再生技术，属于生物技术领域。为象草工厂化试管苗生产和生物技术育种提供实用技术，颗粒状胚性愈伤组织适用于开展体细胞突变体筛选和农杆菌介导法基因转化工作。以改良的ＭＳ为基本培养基，诱导培养基添加４．０ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ、０．０５ｍｇ／Ｌ　　ＫＴ和４．０ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ、０．１ｍｇ／ＬＫＴ，继代培养基添加３．０ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ、０．２ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ，分化培养基添加２．０ｍｇ／ＬＣＰＰＵ、０．０１ｍｇ／Ｌ　　ＮＡＡ或０．５ｍｇ／Ｌ　　ＫＴ和０．５ｍｇ／ＬＩＡＡ，总成苗率达５０．２％和４３．９９％，试管苗的移栽成活率达９５％以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及象草体细胞培养获得高频率植株再生的技术方法，属于生物
，专用于象草体细胞培养、试管苗微繁殖和体细胞突变体筛选，并适用于农杆菌介导法基因转化。二、技术背景象草(Pennisetum Purpureum Schumach)为禾本科狼尾草属多年生草本植物，原产热带非洲，是适宜于热带和亚热带地区种植的高产牧草，可用于草食畜禽养殖、公路护坡、中高档纸浆和人造木板生产，近年来的研究表明象草还是一种理想的生物质能源作物，国内外种植面积有迅速扩大的趋势。但由于象草为对光照敏感的短日照作物，只能在北纬28°以南地区正常开花完成生育过程及自然越冬，在长江中下游及其相同纬度地区主要作一年生利用，不能自然开花结实。自然开花或人工诱导象草开花，均由于种子成熟期不一、易于落粒和发芽率极低，在生产上只能采用种茎无性繁殖的方法提供种苗，且缺乏抗寒、耐盐性强的象草品种，影响其大面积推广种植。宣朴等以狼尾草属杂交种皇竹草的腋芽和顶芽为外植体材料，通过愈伤组织诱导和绿苗分化途径建立快繁体系，但皇竹草腋芽和顶芽诱导愈伤组织的频率仅为10％，绿苗分化率为5％。迄今为止尚未见国内外有关象草组织培养高频本文档来自技高网...

【技术保护点】
象草体细胞培养高频率植株再生技术，其特征在于，１）材料选用象草的幼穗为外植体材料；２）培养基基本培养基：ＭＳ大量元素、微量元素、Ｂ↓［５］维生素，蔗糖质量比３％，琼脂条质量比０．８％；愈伤组织诱导培养 基：附加２，４－二氯苯氧乙酸４．０ｍｇ／Ｌ和激动素０．０５ｍｇ／Ｌ或０．１ｍｇ／Ｌ；愈伤组织继代培养基：附加２，４－二氯苯氧乙酸３．０ｍｇ／Ｌ和６－苄基腺嘌呤０．２ｍｇ／Ｌ；愈伤组织分化培养基：附加苯基脲类细胞分裂素２．０ｍ ｇ／Ｌ和萘乙酸０．０１ｍｇ／Ｌ；或附加激动素０．５ｍｇ／Ｌ和吲哚...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：钟小仙，佘建明，顾洪如，梁流芳，张建丽，丁成龙，张保龙，倪万潮，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，杭州白云草业研究所有限公司，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]