利用试管微扦插快速繁殖牛大力种苗的方法技术

技术编号:1738065 阅读:2141 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种利用试管微扦插快速繁殖牛大力种苗的方法,是将牛大力的种子接种到发芽培养基进行培养至长成幼苗;将获得的幼苗切成茎段后插入微扦插培养基中进行培养至长出侧芽,再将侧芽切成茎段后插入新鲜的微扦插培养基中进行培养;将获得的侧芽切成茎段后接种到生根培养基上进行培养至茎段生根即可获得牛大力种苗。本发明专利技术工艺简单易行,操作简单,增殖速度快,解决了利用牛大力种子繁殖种苗中种子数量少、发芽率低、繁殖速度慢的问题,实现了牛大力种苗的长期大规模快速增殖,可大量、快速、持续获得高质量的牛大力试管苗,实用性强。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于农业生物
,具体为一种利用试管茎段微扦插 快速繁殖牛大力种苗的方法。
技术介绍
牛大力属蝶形花科鸡血藤属,始载于《生草药性备要》,功能为 补虚润肺,强筋活络。用于腰肌劳损,风湿性关节炎,治肺热,肺虚咳嗽,肺结核,慢性支气管炎,慢性肝炎,遗精,白带等。70年代开 始作为壮腰健肾丸、强力健身胶囊等的原料而用于中成药的生产,在 两广地区得到广泛应用;上世纪末本开始,广东、香港、澳门等地民 间普遍使用牛大力熬制靓汤,用量己经远远超过制药企业,并有逐年 增长之势。牛大力以根入药, 一般在秋季挖取生长4 5年的牛大力的 圆柱状或紡缍状块根供应市场。由于牛大力均来自野生资源,不断的 滥采滥挖,使野生牛大力资源濒临灭绝。牛大力传统的繁殖方法为种子繁殖,该方法存在的问题是(1) 种子资源紧缺,批量采集困难;(2)种子寿命短,不能低温储存, 因此不能定期播种育苗;(3)种子发芽率低,仅达到45%左右;(4) 种子苗根系以主根为主,块根形成数量少,产量低。近几年来,扦插繁殖和组培繁殖成为牛大力种苗繁殖的研究重 点。扦插繁殖现存的问题是(1)扦插繁殖成活率低,甚至全部死亡;(2)插条资源紧缺,批量繁殖困难。组培繁殖目前采用愈伤组 织诱导、愈伤组织分化增殖和不定芽生根的方式获得无菌苗,这种方 式存在的问题是(1)诱导愈伤组织过程时间较长;(2)愈伤组织 分化为不定芽的频率较低,分化出的不定芽变异率提高;(3)愈伤 组织分化出的不定芽伸长速度慢,达到生根标准的时间长。这些问题 严重阻碍了牛大力种苗的规模化生产,因而无法满足市场对牛大力的 需求。为此,必须建立能大量、快速扩繁牛大力种苗的生产技术体系。牛大力属蝶形花科鸡血藤属,始载于《生草药性备要》,功能为 补虚润肺,强筋活络。用于腰肌劳损,风湿性关节炎,治肺热,肺虚 咳嗽,肺结核,慢性支气管炎,慢性肝炎,遗精,白带等。70年代开 始作为壮腰健肾丸、强力健身胶囊等的原料而用于中成药的生产,在 两广地区得到广泛应用;上世纪末本开始,广东、香港、澳门等地民 间普遍使用牛大力熬制靓汤,用量已经远远超过制药企业,并有逐年 增长之势。牛大力以根入药, 一般在秋季挖取生长4 5年的牛大力的 圆柱状或纺锤状块根供应市场。由于牛大力均来自野生资源,不断的 滥采滥挖,使野生牛大力资源濒临灭绝。牛大力传统的繁殖方法为种子繁殖,该方法存在的问题是(1) 种子资源紧缺,批量采集困难;(2)种子寿命短,不能低温储存, 因此不能定期播种育苗;(3)种子发芽率低,仅达到45%左右;(4) 种子苗根系以主根为主,块根形成数量少,产量低。近几年来,扦插繁殖和组培繁殖成为牛大力种苗繁殖的研究重 点。扦插繁殖现存的问题是(1)扦插繁殖成活率低,甚至全部死亡;(2)插条资源紧缺,批量繁殖困难。组培繁殖目前采用愈伤组 织诱导、愈伤组织分化增殖和不定芽生根的方式获得无菌苗,这种方 式存在的问题是(1)诱导愈伤组织过程时间较长;(2)愈伤组织 分化为不定芽的频率较低,分化出的不定芽变异率提高;(3)愈伤 组织分化出的不定芽伸长速度慢,达到生根标准的时间长。这些问题 严重阻碍了牛大力种苗的规模化生产,因而无法满足市场对牛大力的 需求。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种利用试管微扦插快速繁殖牛大力种苗 的方法,是一种利用试管中茎段侧芽萌发和伸长速度快的特点,实现 了牛大力种苗大规模扩繁的目的。本专利技术利用少量种子获得无菌苗,以无菌苗茎段为外植体,通过 试管微扦插促进侧芽不断萌发进行快速增殖,实现牛大力种苗大规模本专利技术所采用的技术方案 一种利用试管微扦插快速繁殖牛大力 种苗的方法,包括无菌苗的获得过程、茎段微扦插过程、茎段生根过 程。1、 无菌苗的获得过程选取牛大力的荚果经消毒后将种子剥出,将种子接种到发芽培养基进行培养至长成幼苗,所述发芽培养基是以MS培养基为基本培养 基并附加6-苄基腺嘌呤、a-萘乙酸。2、 茎段微扦插过程将步骤1所获得的幼苗切成茎段,将茎段的基部向下插入微扦插 培养基中进行培养至长出侧芽,再将侧芽切成茎段,然后将其基部向下插入新鲜的微扦插培养基中进行培养。所述微扦插培养基是以MS 培养基为基本培养基并附加6-苄基腺嘌呤、吲哚乙酸。 3、茎段生根过程将步骤2所获得的侧芽切成茎段,并将其接种到生根培养基上, 先暗培养再进行光照培养,至茎段生根即可获得牛大力种苗。所述生 根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基并附加蛋白胨、IAA、 IBA、生物素。本专利技术工艺简单易行,操作简单,增殖速度快,解决了利用牛大 力种子繁殖种苗中种子数量少、发芽率低、繁殖速度慢的问题,实现 了牛大力种苗的长期大规模快速增殖,可大量、快速、持续获得高质 量的牛大力试管苗,实用性强,为牛大力大规模扩繁增殖提供了高效 的方法,为牛大力种苗的规模化、工厂化生产奠定了基础,为稳定牛 大力市场供应提供了保障,也为保护野生牛大力种质开辟了一条切实 可行的途径。具体实施方式 下面对本专利技术作进一步说明。本专利技术所提供的,包 括无菌苗的获得过程、茎段微扦插过程、茎段生根过程。 1)、无菌苗的获得过程选取牛大力的荚果经消毒后将种子剥出,将种子接种到发芽培泰 基进行培养至长成幼苗,培养温度度为25 28'C,光照强度为15 20 toiol*m-2*s",光照时间为8h'cT1,培养40-60天;所述发芽培养 基是以MS培养基为基本培养基并附加6-苄基腺嘌呤0. 5 mg丄"、a -萘乙酸O. lmg丄"。2) 、茎段微扦插过程将步骤1所获得的幼苗切成带1~2节的茎段,将茎段的基部向下 插入微扦插培养基中进行培养至长出侧芽,再将侧芽切成带1~2节的 茎段,然后将其基部向下插入新鲜的微扦插培养基中进行培养,培养 温度度为27~29°C,光照强度为30 40jnmo1 m.2 s",光照时间为8 h d";所述微扦插培养基是以MS培养基为基本培养基并附加6_苄 基腺嘌呤2. 0 mg.L"、吲哚乙酸0. 1 mg丄-1。3) 、茎段生根过程将步骤2所获得的侧芽切成带1~2节的茎段,并将其接种到生根 培养基上,先暗培养8 13天再进行光照培养20 30天,至茎段生根 即可获得牛大力种苗。所述生根培养基是以1/2 MS培养基为基本培 养基并附加蛋白胨1.0 g.L"、 IM 0.8 mg.L"、 IBA 0.5 mg丄"、生 物素0.5 mg丄-1。权利要求1、一种,其特征在于包括无菌苗的获得过程、茎段微扦插过程、茎段生根过程;1)、无菌苗的获得过程选取牛大力的荚果经消毒后将种子剥出,将种子接种到发芽培养基进行培养至长成幼苗,培养温度度为25~28℃,光照强度为15~20μmol·m-2·s-1,光照时间为8h·d-1,培养40~60天;所述发芽培养基是以MS培养基为基本培养基并附加6-苄基腺嘌呤0.5mg·L-1、α-萘乙酸0.1mg·L-1;2)、茎段微扦插过程将步骤1所获得的幼苗切成带1~2节的茎段,将茎段的基部向下插入微扦插培养基中进行培养至长出侧芽,再将侧芽切成带1~2节的茎段,然后将其基部向下插入新鲜的微扦插培养基中进行培养,培养温度度为27~29℃,光照强度为30~40μmol·m-2·s-1,光照时间为8h·d-1;本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种利用试管微扦插快速繁殖牛大力种苗的方法,其特征在于:包括无菌苗的获得过程、茎段微扦插过程、茎段生根过程; 1)、无菌苗的获得过程 选取牛大力的荚果经消毒后将种子剥出,将种子接种到发芽培养基进行培养至长成幼苗,培养温度度为25~28℃,光照强度为15~20μmol.m↑[-2].s↑[-1],光照时间为8h.d↑[-1],培养40~60天;所述发芽培养基是以MS培养基为基本培养基并附加6-苄基腺嘌呤0.5mg.L↑[-1]、α-萘乙酸0.1mg.L↑[-1]; 2)、茎段微扦插过程 将步骤1所获得的幼苗切成带1~2节的茎段,将茎段的基部向下插入微扦插培养基中进行培养至长出侧芽,再将侧芽切成带1~2节的茎段,然后将其基部向下插入新鲜的微扦插培养基中进行培养,培养温度度为27~29℃,光照强度为30~40μmol.m↑[-2].s↑[-1],光照时间为8h.d↑[-1];所述微扦插培养基是以MS培养基为基本培养基并附加6-苄基腺嘌呤2.0mg.L↑[-1]、吲哚乙酸0.1mg.L↑[-1]; 3)、茎段生根过程 将步骤2所获得的侧芽切成带1~2节的茎段,并将其接种到生根培养基上,先暗培养8~13天再进行光照培养20~30天,至茎段生根即可获得牛大力种苗。所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基并附加蛋白胨1.0g.L↑[-1]、IAA0.8mg.L↑[-1]、IBA0.5mg.L↑[-1]、生物素0.5mg.L↑[-1]。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:徐立李志英黄碧兰李克烈马千全陈伟朱文丽
申请(专利权)人:中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所
类型:发明
国别省市:66[中国|海南]

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