一种利用草莓花药培养进行脱毒快繁的方法技术

本发明专利技术涉及“一种利用草莓花药培养进行脱毒快繁的方法”，属于生物工程技术领域。将取自田间健壮草莓花蕾，发育时期为单核靠边期（大小约为４－６ｍｍ），在４℃冰箱冷处理７２ｈ（小时）。然后将花蕾分别用７０％酒精、０．１％升汞（加吐温）消毒之后用无菌吸水纸吸干花蕾表面的水，将消毒处理好的花蕾剥取花药，接种到愈伤组织诱导培养基中，然后转到再生培养基中，再将诱导出的草莓健壮苗转接到继代培养基上，最后转到生根培养基进行生根处理。本方法将草莓花药培养分化率提高到３７．５％，比现有技术提高了２８．０３个百分点，突破了传统分化率很低的困境。苗木生根后移栽成活率９０％，从而促进草莓脱毒技术在生产上进一步应用和推广。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种利用草莓花药培养进行脱毒快繁的方法，其特征在于：（１）消毒处理取长度为４－６ｍｍ的草莓花蕾，在４℃冰箱冷处理７２ｈ；然后将花蕾用无菌水冲洗一次在７０％酒精浸泡５ｓ（秒）之后再用无菌水冲洗一次置于加体积比为０．１％ 的吐温和质量体积比为０．１％的升汞溶液中浸泡８ｍｉｎ（分钟）；最后用无菌水冲洗８－１０次，用无菌吸水纸吸干花蕾表面的水；（２）愈伤组织诱导分化将消毒处理好的花蕾剥取花药，接种到ＭＳ（ＱＵＳｈｅｎ－Ｃｈｕｎ，ＨＵＡ ＮＧＸｉａｏ－Ｄｅ，ＺＨＡＮＧＺｈｅｎ，ＹＡＯＱｕａｎ－ＨＯＮＧ，ＴＡＯＪｉａｎ－Ｍｉｎ，ＱＩＡＯＹｕ－Ｓｈａｎ，ＺＨＡＮＧＪｕｎ－Ｙｉ．Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ－ｍｅｄｉａｔｅｄｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ　 　ｏｆＭａｌｕｓｒｏｂｕｓｔａｗｉｔｈｔｏｍａｔｏｉｒｏｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｇｅｎｅ［Ｊ］，ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，２０ ０５，３１（３）：２３５－２４０）＋ＢＡ（６－苄氨基嘌呤）０．５ｍｇ.Ｌ↑［－１］＋ＮＡＡ（萘乙酸）２．０ｍｇ.Ｌ↑［－１］＋ＫＴ（细胞激动素）０．１ｍｇ.Ｌ↑［－１］＋蔗糖３０ｇ.Ｌ↑［－１］＋琼脂６．５ｇ.Ｌ↑［－１］的愈伤组织诱导培养基中３０～６０ｄ（天）；将愈伤组织转到ＭＳ＋ＢＡ１．５ｍｇ.Ｌ↑［－１］＋ＮＡＡ０．５ｍｇ.Ｌ↑［－１］＋ＺＴ（玉米素）２．０ｍｇ.Ｌ↑［－１］＋琼脂６．５ｇ.Ｌ↑［－１］的分化培养基中７０～９０ｄ；然后将分化培养基中获得的 草莓苗转接到ＭＳ＋ＢＡ０．５ｍｇ.Ｌ↑［－１］＋ＮＡＡ０．１ｍｇ.Ｌ↑［－１］＋蔗糖３０ｇ.Ｌ↑［－１］＋琼脂６．５ｇ.Ｌ↑［－１］的继代培养基上，进行继代增殖培养２０～３０ｄ；（３）生根移栽草莓苗转到１／２ＭＳ＋ＮＡＡ０． ２ｇ.Ｌ↑［－１］＋琼脂６．５ｇ.Ｌ↑［－１］的生根培养基进行生根处理２０～３０ｄ；苗木生根后，将生根植株经过室外自然条件下锻炼７－１０ｄ，移栽时开盖加水锻炼１－２ｄ，以蛭石和珍珠岩混合体系作为移栽基质，移栽时的温度控制在２０－２５ ℃范围。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：乔玉山，渠慎春，蔡斌华，王三红，高志红，徐长宝，杨晓春，侯喜林，吴震，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]