中性液体乳糖酶生产方法技术

本发明专利技术涉及的是一种中性液体乳糖酶生产方法。通过深层液体发酵，大量培养成熟的脆壁克鲁维酵母细胞，再经高速离心，将菌体细胞用无菌水洗涤，然后用无菌水配制成细胞菌悬液，再加入β－葡聚糖酶、纤维素酶和蛋白酶，保温。取出后再下快速冷冻，使其彻底冻结，再将冷冻的细胞融化，得到冻融细胞悬液。再将冻融细胞悬液置于液体剪切破碎装置高压匀浆机或超声波细胞破碎机中进行二次破壁，得到无细胞结构的活性乳糖酶溶液。然后，进行离心或过滤处理，获得无菌体细胞碎片的活性乳糖酶溶液，加入氯化钠和的蔗糖，即得到液体活性乳糖酶。用本发明专利技术的方法所得到的中性液体乳糖酶处理鲜牛乳、消毒乳或还原乳，即可生产低乳糖液体奶和低乳糖奶粉。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种中性液体乳糖酶生产方法，其特征是：（１）脆壁克鲁维酵母细胞（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｆｒａｇｉｌｉｓ）的培养：按照重量比为乳清粉０．５－２５％、酵母膏０．１－２０％、蛋白胨０．１－２０％、硫酸铵０．１－１０％、磷酸氢二钾０ ．０１－２％和余量的水的比例配置培养基，ｐＨ７．２，１０５℃灭菌处理１５分钟，按照接种量为１％－２５％的比例接种脆壁克鲁维酵母细胞，通入无菌空气搅拌培养１０－７２小时；（２）脆壁克鲁维酵母菌悬液的制备：将培养成熟的脆壁克鲁维酵母细胞 经１００００ｒ／ｍｉｎ高速离心，得到新鲜活性菌体细胞，将新鲜活性菌体细胞用无菌水洗涤１－２次，然后用无菌水配制成细胞菌悬液，细胞的重量比浓度为１．０％－４０．０％；（３）酶预破壁处理：取上述菌悬液５００ｍＬ，加入β－葡聚糖酶、纤维素 酶和蛋白酶，纤维素酶、蛋白酶用量分别为０．１－１５０．０ｕ／ｇ湿菌体，β－葡聚糖酶用量０．１－１５０．０ｕ／ｇ湿菌体，ｐＨ５．５－７．５，２０℃－６５℃保温１－６小时；（４）冻融破壁：将经酶处理后的细胞悬液取出，置于－２０℃－－５０ ℃温度下冷冻，再将冷冻的细胞置于２０℃－７５℃融化，得到冻融细胞悬液；（５）、高压匀浆、终极破壁：将冻融的细胞悬液置于液体剪切破碎装置进行二次破壁，进口处的温度维持在１８－２２℃，出口处的温度小于５０℃，压力维持在３０ＭＰａ－１２０ ＭＰａ，得到无细胞结构的活性乳糖酶溶液；（６）然后进行３５００－１５０００ｒ／ｍｉｎ离心或过滤处理，获得无菌体细胞碎片的活性乳糖酶溶液，再进行低温减压浓缩至１０－７０％浓度，加入５－３０％氯化钠和５－３０％的蔗糖，即得到中性液体乳糖 酶。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：肖雯娟，
申请(专利权)人：哈尔滨美华生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：93[中国|哈尔滨]