The invention discloses a tuna fish gelatin antifreeze peptide and its preparation method, the tuna fish bone as raw material, by removing non collagen and decalcification, double enzyme enzymolysis liquid liquid by ultrafiltration, macroporous resin purified antifreeze peptide purification, cation exchange resin chromatography and gel column chromatography of enzyme. After detection and analysis, the average molecular weight of the antifreeze peptide is 1250.0~1315.0Da, and the mass ratio of the 4 main peptides GPAGQEGPAGLVG, GFRGPAGTIGLVG, GFIGPAGPAG and GPSGPLGFPGPSG is 1:1.78~1.93:0.85~0.91:0.73~0.84. The protective activity of Escherichia coli showed that the antifreeze peptide of tuna fish bone gelatin could protect Escherichia coli at low temperature.
【技术实现步骤摘要】
一种金枪鱼鱼骨明胶抗冻肽及其制备方法
本专利技术属于活性肽制备
,具体是一种金枪鱼鱼骨明胶抗冻肽及其制备方法。
技术介绍
金枪鱼类属鲈形目鲭科又叫鲔鱼,华人世界又称为“吞拿(鱼)”,是大洋暖水性洄游鱼类,主要分布在印度洋、太平洋中部与大西洋中部,是一种很受欢迎的海产,经济价值高。鲔鱼的肉色为红色,这是因为鲔鱼的肌肉中含有了大量的肌红蛋白所致。鲔鱼的游程很远,过去曾经在日本近海发现过从美国加州游过去的鲔鱼。鲔鱼有8个品种,其中多数品种体积巨大,最大的体长达3.5米,重达600至700公斤,而最小的品种只有3公斤重。鲔鱼的繁殖能力很强,一条50公斤重雌鱼,每年可产卵500万粒之多。抗冻肽是一类在加入到其他溶液中后,可降低溶液冰点,进而提高抗冻效果的物质。传统使用的商业抗冻剂为4%蔗糖和4%山梨糖醇的混合物,这种抗冻剂虽然具有一定的抗冻效果,但是由于其甜度与热量较高,不符合“低甜”和“低热”的消费趋势,抗冻肽是一类能够吸附在冰晶表面,抑制冰晶的生长和重结晶的活性肽。它可以降低溶液的冰点,而对熔点影响甚微,使得冰点与熔点之间产生差值,这称为热滞活性。通过热滞活性,抗冻肽可以保护生物在低温下免受冻害。相比商业抗冻剂,抗冻肽不仅更符合消费趋势,且其抗冻效果优于商业抗冻剂。但当下天然抗冻剂的生产工艺较为复杂且活性低,耗时耗资,不适合工业化生产。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对现有技术的现状提供一种在结冰或亚结冰条件下,能阻止冰晶形成,调控胞外冰晶增长,抑制冰重晶华的金枪鱼鱼骨明胶抗冻肽,其纯度高,生物活性强,可作为医学、生物、食品和化工等领域的安全添 ...
【技术保护点】
一种金枪鱼鱼骨明胶抗冻肽,其特征在于平均分子量为1250.0~1315.0 Da;所含4种主要多肽GPAGQEGPAGLVG、GFRGPAGTIGLVG、GFIGPAGPAG、GPSGPLGFPGPSG的质量比为1:1.78~1.93:0.85~0.91:0.73~0.84。
【技术特征摘要】
1.一种金枪鱼鱼骨明胶抗冻肽,其特征在于平均分子量为1250.0~1315.0Da;所含4种主要多肽GPAGQEGPAGLVG、GFRGPAGTIGLVG、GFIGPAGPAG、GPSGPLGFPGPSG的质量比为1:1.78~1.93:0.85~0.91:0.73~0.84。2.根据权利要求1所述的一种金枪鱼鱼骨明胶抗冻肽,其特征在于甘氨酸(Gly)、脯氨酸(Pro)、羟脯氨酸(Hyp)、精氨酸(Arg)、谷氨酸(Glu)和丙氨酸(Ala)的质量比25.28~27.41:13.98~14.37:10.06~11.83:7.46~8.27:8.93~9.74:6.38~7.09。3.根据权利要求1所述的一种金枪鱼鱼骨明胶抗冻肽,其特征在于用于医学、生物、食品和化工产业的用途。4.一种金枪鱼鱼骨明胶抗冻肽的制备方法,其特征在于包括以下步骤:1)金枪鱼鱼骨明胶的制备:金枪鱼鱼骨用0.1mol/LNaOH溶液脱除非胶原蛋白,用0.5mol/LEDTA溶液脱钙后,按料液比1g:10~15mL向脱钙鱼骨粉中加入1.0mol/LHCl溶液,处理15~18h后,将鱼骨粉水洗至中性,然后按照料液比1g:11~15mL将蒸馏水加入到鱼骨粉中,于60~70℃提取8~10h,过滤,滤液真空浓缩,于60~75℃真空干燥得鱼骨明胶;2)金枪鱼鱼骨明胶的酶解:将上述鱼骨明胶按固液比1g:10~15mL加入双蒸水,用HCl调溶液pH到2~4,溶液升温至35~45℃,按照明胶质量的1.0~1.5%向明胶溶液中加入酸性蛋白酶(酶活力≥6.0×104U/g),酶解2~4h后,用NaOH调溶液pH到6.5~7.5,按照明胶质量的1.2~1.5%向溶液中加入中性蛋白酶(酶活力≥5....
【专利技术属性】
技术研发人员:郁迪,王斌,陶静,赵玉勤,
申请(专利权)人:浙江海洋大学,
类型:发明
国别省市:浙江,33
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