一种抑制基因表达的RNA干扰方法技术

本发明专利技术提供一种抑制基因表达的RNA干扰方法，将目的基因的siRNA和含shRNA的质粒同时显微注射入目的基因所在的宿主细胞中。本发明专利技术进一步提供一种改良的抑制绵羊早期孤雌胚胎NLRP7基因表达的RNA干扰方法，是将NLRP7基因siRNA干扰片段和shRNA干扰质粒混合注射入成熟卵母细胞中，所述siRNA如SEQ ID NO.6‑7、8‑9和/或10‑11所示，所述shRNA如SEQ ID NO.14、16和/或18所示；孤雌激活后发现NLRP7基因敲降后的胚胎出现了发育异常，说明NLRP7是绵羊早期孤雌胚胎正常发育所需的关键基因。本发明专利技术方法为研究基因的功能提供了新的方法。

A RNA interference method for inhibiting gene expression

【技术实现步骤摘要】
一种抑制基因表达的RNA干扰方法
本专利技术属于基因工程领域，具体地说，涉及一种抑制基因表达的RNA干扰方法，具体地涉及一种特异性抑制NLRP7基因表达的RNA干扰方法。
技术介绍
NLRs(Nucleotide-bindingdomainandleucine-richrepeatcontaining)即NOD样受体家族，是生物体众多复杂的免疫识别系统之一，根据其结构域的不同又划分为好多亚家族，其中，将含有pyrin结构域的亚家族称为NLRP亚家族。NLRP基因家族首先在人身上被发现，共有十四个成员，分别命名为NLRP1-NLRP14。在灵长类动物上也有十四个成员，跟人的命名一样。相比与人的NLRP基因家族，小鼠的NLRP基因家族中没有NLRP7、NLRP8、NLRP11和NLRP13，但是NLRP1、NLRP4和NLRP9在进化的过程中发生了变化，又分别命名为NLRP1a、NLRP1b、NLRP1c、NLRP4a、NLRP4b、NLRP4c、NLRP4d、NLRP4e、NLRP4f、NLRP4g、NLRP9a、NLRP9b、NLRP9c，总共有二十个成员。在大鼠中也没有7、8、11本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抑制基因表达的RNA干扰方法，其特征在于，将目的基因的siRNA和含shRNA的质粒同时显微注射入目的基因所在的宿主细胞中。

【技术特征摘要】
1.一种抑制基因表达的RNA干扰方法，其特征在于，将目的基因的siRNA和含shRNA的质粒同时显微注射入目的基因所在的宿主细胞中。2.一种抑制NLRP7基因表达的RNA干扰方法，其特征在于，将NLRP7基因的siRNA和含shRNA的质粒同时显微注射入成熟卵母细胞。3.如权利要求2所述的RNA干扰方法，其特征在于，所述NLRP7基因的siRNA包括以下3组siRNA中的一组或多组，3组siRNA核苷酸序列分别如SEQIDNO.6-7、8-9、10-11所示。4.如权利要求2所述的RNA干扰方法，其特征在于，所述shRNA包括以下3组shRNA中的一组或多组，3组shRNA核苷酸序列分别如SEQIDNO.14、16、18所示。5.如权利要求2-4任一所述的RNA干扰方...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘国世，李广栋，崔炜，田秀芝，姬鹏云，吕东颖，吴昊，柴孟龙，连正兴，阿布力孜·吾斯曼，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京,11