一种外源物质导入鸡胚的方法技术

本发明专利技术公开了一种外源物质导入鸡胚的方法，属于生物技术领域，具体包括如下步骤：（1）对孵育48‑58h的13‑17 HH早期胚蛋在无菌条件下开口，找到胚胎位置，剥去胚蛋外壳膜，露出胚胎血管；（2）将需要导入的外源物质注入到玻璃注射针中，通过显微注射仪注射到鸡胚血管中；（3）注射后加入青链霉素至注射部位，然后使用医用胶带封口。本发明专利技术旨在鸡胚早期（13‑17 HH）通过血管注射导入外源物质，为鸡胚注射的广泛应用奠定基础。本方法适用于鸡胚外源基因或细胞导入，转基因鸡和嵌合体制备，操作简便快速，外源物质导入效率高。

【技术实现步骤摘要】
一种外源物质导入鸡胚的方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种新的外源物质导入鸡胚的方法。
技术介绍
鸡胚作为经典的胚胎生物学模型，一直以来被用作探究胚胎发育和胚胎细胞分化等研究，尤其是在医学模型上具有广泛的应用前景。将外源物质导入鸡胚对基因功能验证，转基因育种和嵌合体制备等生产研究具有重要的意义。因此一种高效简便的外源物质导入方法不仅能够为鸡胚发育生物学和转基因鸡制作等提供技术支持，也能为相关研究提供实验基础。目前国内外对鸡胚注射的方法已有大量报道。目前主要的注射方法有直接注射法，胚下腔注射法和血管注射法。国内外多数报道使用的是胚下腔注射法进行注射，这种方法胚胎位置难以寻找，操作复杂且孵化率太低。Kwon等通过胚盘下腔注射法获得了13只转基因鸡，外源基因转入效率为10.08％。薛松磊等人报道胚盘下腔注射后孵化率仅为22.5％。血管注射法以其外源物质转入效率高具有明显的优点，但是血管注射的方法没有被统一明确描述，且多个血管注射方法存在操作繁琐，过程复杂，难以重复等缺点，限制了鸡胚血管注射的进一步应用，需要进一步的优化和改进。
技术实现思路
本专利技术的目的克服现有技术缺点，提供了一本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种外源物质导入鸡胚的方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）对孵育48‑58h的13‑17 HH早期胚蛋在无菌条件下开口，找到胚胎位置，剥去胚蛋外壳膜，露出胚胎血管；（2）将需要导入的外源物质注入到玻璃注射针中，通过显微注射仪注射到鸡胚血管中；（3）注射后加入青链霉素至注射部位，然后使用医用胶带封口。

【技术特征摘要】
1.一种外源物质导入鸡胚的方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）对孵育48-58h的13-17HH早期胚蛋在无菌条件下开口，找到胚胎位置，剥去胚蛋外壳膜，露出胚胎血管；（2）将需要导入的外源物质注入到玻璃注射针中，通过显微注射仪注射到鸡胚血管中；（3）注射后加入青链霉素至注射部位，然后使用医用胶带封口。2.根据权利要求1所述的一种新的外源物质导入鸡胚的方法，其特征在于：所述早期胚蛋在无菌条件下开口使用镊子在钝端开口，使用眼科镊剥去外壳膜。3.根据权利要求1或2所述的一种外源物质导入鸡胚的方法，其特征在于：所述早期胚蛋开口大小为直径1-1.5cm的圆孔。4.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：李碧春，靳锴，左其生，张亚妮，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32