野猪α－干扰素的基因合成和载体构建及产物的生产方法技术

野猪α－干扰素的基因合成和载体构建及产物的生产方法，国内重组菌株或者是表达量不高，或者是产物是以融合状态表达，或者是产物带有纯化标签，或者是没有高密度发酵工艺，存在诸多问题。本发明专利技术组成包括：用大肠杆菌偏爱密码子以及密码子对合成了野猪α－干扰素基因，构建高效表达载体并转化高效表达菌株，工程菌高密度发酵、包涵体的分离纯化、目的蛋白的变性、复性和纯化以及表达产物的生物活性测定方法。本发明专利技术属于生物制药中的基因工程生产多肽药物技术领域。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种野猪α－干扰素的基因合成和载体构建及产物的生产方法，其组成包括：用大肠杆菌偏爱密码子以及密码子对合成了野猪α－干扰素基因，构建高效表达载体并转化高效表达菌株，工程菌高密度发酵、包涵体的分离纯化、目的蛋白的变性、复性和纯化以及表达产物的生物活性测定方法，其特征是：所述的人工合成的编码野猪α－干扰素的基因含有如下核苷酸序列ＡＴＧ　ＴＧＴ　ＧＡＴ　ＣＴＧ　ＣＣＧ　ＣＡＡ　ＡＣＣ　ＣＡＴ　ＡＧＣ　ＣＴＧ　ＧＣＧ　ＣＡＣ　ＡＣＣ　ＣＧＴ　ＧＣＧ　ＣＴＧ　ＣＧＴ　ＣＴＧ　ＣＴＧ　ＧＣＧ　ＣＡＧ　ＡＴＧ　ＣＧＴ　ＣＧＣ　ＡＴＣ　ＡＧＣ　ＣＣＧ　ＴＴＴ　ＡＧＣ　ＴＧＣ　ＣＴＧ　ＧＡＴ　ＣＡＣ　ＣＧＴ　ＣＧＣ　ＧＡＴ　ＴＴＴ　ＧＧＴ　ＴＴＣ　ＣＣＧ　ＣＡＧ　ＧＡＡ　ＧＣＧ　ＣＴＧ　ＧＧＣ　ＧＧＣ　ＡＡＣ　ＣＡＧ　ＧＴＧ　ＣＡＧ　ＡＡＡ　ＧＣＧ　ＣＡＡ　ＧＣＣ　ＡＴＧ　ＧＣＧ　ＣＴＧ　ＧＴＧ　ＣＡＴ　ＧＡＧ　ＡＴＧ　ＣＴＧ　ＣＡＧ　ＣＡＧ　ＡＣＣ　ＴＴＣ　ＣＡＧ　ＣＴＧ　ＴＴＣ　ＡＧＣ　ＡＣＣ　ＧＡＡ　ＧＧＣ　ＡＧＣ　ＧＣＧ　ＧＣＧ　ＧＣＣ　ＴＧＧ　ＧＡＴ　ＧＡＧ　ＡＧＣ　ＣＴＧ　ＣＴＧ　ＣＡＣ　ＣＡＧ　ＴＴＣ　ＴＡＴ　ＡＣＣ　ＧＧＴ　ＣＴＧ　ＧＡＴ　ＣＡＧ　ＣＡＧ　ＣＴＧ　ＣＧＣ　ＧＡＴ　ＣＴＧ　ＧＡＡ　ＧＣＧ　ＴＧＣ　ＧＴＧ　ＡＴＧ　ＣＡＧ　ＧＡＧ　ＧＣＧ　ＧＧＣ　ＣＴＧ　ＧＡＡ　ＧＧＣ　ＡＣＣ　ＣＣＧ　ＣＴＧ　ＣＴＧ　ＧＡＧ　ＧＡＧ　ＧＡＴ　ＡＧＣ　ＡＴＴ　ＣＴＧ　ＧＣＧ　ＧＴＧ　ＣＧＴ　ＡＡＡ　ＴＡＴ　ＴＴＣ　ＣＡＴ　ＣＧＴ　ＣＴＧ　ＡＣＧ　ＣＴＧ　ＴＡＴ　ＣＴＧ　ＣＡＡ　ＧＡＡ　ＡＡＡ　ＡＧＣ　ＴＡＣ　ＡＧＣ　ＣＣＧ　ＴＧＴ　ＧＣＧ　ＴＧＧ　ＧＡＡ　ＡＴＴ　ＧＴＧ　ＣＧＴ　ＧＣＧ　ＧＡＡ　ＧＴＧ　ＡＴＧ　ＣＧＣ　ＧＣＧ　ＴＴＣ　ＡＧＣ　ＡＧＣ　ＡＧＣ　ＡＣＣ　ＡＡＣ　ＣＴＧ　ＣＡＡ　ＧＡＴ　ＣＧＴ　ＣＴＧ　ＣＧＴ　ＡＡＡ　ＡＡＡ　ＧＡＡ　ＴＡＡ，将含有所述的核苷酸序列的野猪α－干扰素的基因插入到带有ｐＬ、ｐＲ启动子、Ｃｉｔｓ温控阻遏蛋白基因的表达载体ｐＷＬ中，构建成野猪α－干扰素的基因的表达质粒ｐＷＬ－ｐｏＩＦＮ－α，转化大肠杆菌ＤＨ－５α后，野猪α－干扰素获得高效表达。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘娣，王君伟，李文辉，
申请(专利权)人：黑龙江省农业科学院畜牧研究中心，东北农业大学，
类型：发明
国别省市：93[]