一种分子筛固定化大麦β－淀粉酶和普鲁兰酶两种混合酶制备方法。现有的固定化酶技术复杂，成本偏高，收率低，寿命短。本发明专利技术以大孔分子筛作为载体，采用多次吸附酶并多次戊二醛交联的方法，制备的固定化大麦β－淀粉酶和普鲁兰酶装柱后，５５℃下，供给２０％的玉米淀粉液化液，持续１８天可生成ＤＥ值５８％以上，麦芽糖含量７２．５％以上的糖化液，２５天后，ＤＥ值仍可达５２％，麦芽糖含量６０％左右。本发明专利技术所用载体成型容易，固定化酶制备工艺简单，条件温和，多次挂酶多次交联，机械性能较好，操作稳定，能反复使用，且适用于填充床反应器。此方法同样也可以固定具有催化活性的其它物质。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种分子筛固定化大麦3 -淀粉酶和普鲁兰酶两种混合酶制备 方法，尤其是涉及一种利用成型分子筛固定化大麦P -淀粉酶和普鲁兰酶两种混 合酶制备方法。
技术介绍
我国从上世纪90年代起，由于生产技术改进，规模扩大，成本下降，淀粉 糖生产飞速发展，今后随着我国人民生活水平提高，淀粉糖的需求还会逐年增 长，并且质量标准要求更高。淀粉糖主要应用于食品工业、医药及化学工业等。 国内外对固定化葡萄糖淀粉酶的研究很多。国外已有大规模生产的报道。在固 体、特别是在固体粒子上固定化酶的方法已有大量报道(I. CHIBATA，固定化 酶，第二章，p. 9-107， Wiley and Sons, 1978) .Tate和Lyle公司以骨炭作为载 体，采用丙酮沉淀，戊二醛交联的方式制备固定化酶，已应用于美国玉米加工 厂中。根据专利技术专利01139257.6报道在聚合物膜上固定化酶的方法，此方法 技术复杂，成本偏高，固定化困难。赵尊等研究了氨基化处理的沸石固定化酶， 装柱后45。C反应，计算得到半衰期为38天。但这些研究固定化酶技术复杂，成 本偏高，收率低，寿命短，不适应于连续生产，且使工业化生产受到限制。
技术实现思路
本专利技术的目的是采用成型的分子筛为载体，提供一种利用成型分子筛为载 体固定化大麦3 -淀粉酶和普鲁兰酶两种混合酶制备方法。它能使载体成型容 易，固定化酶制备工艺简单，条件温和，机械性能较好，操作稳定，且适用于填充床反应器和固定具有催化活性的其它物质。为了达到上述目的，本专利技术的技术方案是 一种分子筛为载体固定化大麦 P-淀粉酶和普鲁兰酶(诺维信)两种混合酶及其制备方法，其特征在于具体 包括以下步骤(1) 分子筛载体中加入20。/o左右的Al203粘结剂，混压成型，室温干燥， 焙烧，撵碎成所需颗粒大小；(2) 分子筛孔径范围l-25nm;(3) 大麦3-淀粉酶和普鲁兰酶两种酶比例1: 2混合；(4) 将载体装柱，柱底放入一些碎瓷，上面放一些玻璃丝，柱外带保温 层，25-55'C下通入大麦3-淀粉酶和普鲁兰酶两种混合酶溶液吸附5-IO小时， 25-30°C， pH4.5-7条件下用1%_4%的戊二醛溶液交联3-5小时，多次挂酶多次 交联即可。5)将多次使用失活的固定化酶经500-65(TC焙烧，吸附，交联可继续使用。所述的分子筛以USY，DAY和3-沸石为原料，分子筛为多孔型，分子筛孔径 范围为l-25nm，分子筛装柱前撵碎的颗粒大小均匀。所述的大麦P -淀粉酶和普鲁兰酶两种酶比例l: 2混合，且混合均匀。 附图说明附图l是本专利技术的工艺流程图 本专利技术的有益效果是固定化酶制备工艺简单，条件温和，多次挂酶多次交联，机械性能较好， 操作稳定，能反复使用，且适用于填充床反应器。具体实施例方式实施例本专利技术利用成型分子筛固定化大麦P -淀粉酶和普鲁兰酶两种混合 酶制备方法，具体包括以下步骤(1) 分子筛的制作分子筛以3-沸石为原材料，加入20%左右的厶1203粘结剂，混压成型，室 温干燥，焙烧，撵碎成颗粒状，过筛20-40目，颗粒大小均匀。(2) 糖化柱的准备在玻璃柱内放入一些碎瓷，上面放一些玻璃丝，然后将成型的分子筛装入 柱内，玻璃柱外面加一个保温层即可。(3) 第一次挂酶取大麦e -淀粉酶和普鲁兰酶(诺维信)两种酶，按质量比1: 2混合均匀，取定量的混合酶，在25-3(TC下用计量泵进行循环5-10小时(压力和流量 根据柱床体积和柱高确定，.挂酶时间可适当延长)。用蒸馏水洗酶，将洗 水和剩余的酶合并，测定酶活力，检测挂酶效果。(4) 第一次交联取定量1%-4%的戊二醛溶液，在25-30°C ， pH4. 5-7条件下循环3-5小时， 用蒸馏水把多余的戊二醛溶液洗下。(5) 多次挂酶多次交联按着步骤(3)和(4)进行第二次挂酶第二次交联，如此重复3-5次，即 可得到较为稳定的固定化酶。权利要求1、，其特征在于具体包括以下步骤(1)分子筛载体中加入20％左右的Al2O3粘结剂，混压成型，室温干燥，焙烧，撵碎成所需颗粒大小；(2)分子筛孔径范围1-25nm；(3)大麦β-淀粉酶和普鲁兰酶两种酶比例1∶2混合；(4)将载体装柱，柱底放入一些碎瓷，上面放一些玻璃丝，柱外带保温层，25-55℃下通入大麦β-淀粉酶和普鲁兰酶两种混合酶溶液吸附5-10小时，25-30℃，pH4.5-7条件下用1％-4％的戊二醛溶液交联3-5小时，多次挂酶多次交联即可。(5)将多次使用失活的固定化酶经500-650℃焙烧，吸附，交联可继续使用。2、 根据权利要求l所述的一种分子筛固定化大麦0 -淀粉酶和普鲁兰酶两种 混合酶制备方法，其特征在于所述的分子筛以USY，DAY和3-沸石为原料，分 子筛为多孔型，分子筛孔径范围为1-25nm，分子筛装柱前撵碎的颗粒大小均匀。3、 根据权利要求1所述的一种分子筛固定化大麦e-淀粉酶和普鲁兰酶两 种混合酶制备方法，其特征在于所述的大麦e-淀粉酶和普鲁兰酶两种酶比例 1: 2混合，且混合均匀。全文摘要。现有的固定化酶技术复杂，成本偏高，收率低，寿命短。本专利技术以大孔分子筛作为载体，采用多次吸附酶并多次戊二醛交联的方法，制备的固定化大麦β-淀粉酶和普鲁兰酶装柱后，55℃下，供给20％的玉米淀粉液化液，持续18天可生成DE值58％以上，麦芽糖含量72.5％以上的糖化液，25天后，DE值仍可达52％，麦芽糖含量60％左右。本专利技术所用载体成型容易，固定化酶制备工艺简单，条件温和，多次挂酶多次交联，机械性能较好，操作稳定，能反复使用，且适用于填充床反应器。此方法同样也可以固定具有催化活性的其它物质。文档编号C12N11/00GK101407804SQ20081014156公开日2009年4月15日 申请日期2008年10月8日 优先权日2008年10月8日专利技术者军 彭, 锦 李, 杨冬月, 杨海伟, 王金恒, 田丰收, 锁 闫, 陆启明 申请人:郸城财鑫糖业有限责任公司本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种分子筛固定化大麦β－淀粉酶和普鲁兰酶两种混合酶制备方法，其特征在于：具体包括以下步骤： （１）分子筛载体中加入２０％左右的Ａｌ↓［２］Ｏ↓［３］粘结剂，混压成型，室温干燥，焙烧，撵碎成所需颗粒大小； （２）分子筛孔径范围１－ ２５ｎｍ； （３）大麦β－淀粉酶和普鲁兰酶两种酶比例１∶２混合； （４）将载体装柱，柱底放入一些碎瓷，上面放一些玻璃丝，柱外带保温层，２５－５５℃下通入大麦β－淀粉酶和普鲁兰酶两种混合酶溶液吸附５－１０小时，２５－３０℃，ｐＨ４ ．５－７条件下用１％－４％的戊二醛溶液交联３－５小时，多次挂酶多次交联即可。 （５）将多次使用失活的固定化酶经５００－６５０℃焙烧，吸附，交联可继续使用。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李锦，田丰收，陆启明，闫锁，彭军，杨海伟，王金恒，杨冬月，
申请(专利权)人：郸城财鑫糖业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：41[中国|河南]
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