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lncRNA组合物及制备诊断预示Luminal B型乳腺癌骨转移基因诊断试剂盒的用途制造技术

技术编号:17297316 阅读:28 留言:0更新日期:2018-02-18 09:55
本发明专利技术公开了lncRNA组合物及制备诊断预示Luminal B型乳腺癌骨转移试剂盒的用途。本发明专利技术发现,血清lncRNAXLOC_004122、SUMO1P3和NBAT‑1可联合用于诊断预示Luminal A型乳腺癌骨转移,血清lncRNAXLOC_004122、Linc00467和lncRNAAl049452可联合用于诊断预示Luminal B型乳腺癌骨转移,血清lncRNAAK043773和EXOC7可联合用于诊断预示Her‑2过表达型乳腺癌骨转移,lncRNA Lnc01089和HOTAIR可联合用于诊断预示三阴性型乳腺癌骨转移,准确度高(90%以上),检测成本低、非介入性、方便快捷。

【技术实现步骤摘要】
lncRNA组合物及制备诊断预示LuminalB型乳腺癌骨转移试剂盒的用途
本专利技术属于生物化学领域,涉及诊断组合物及诊断试剂盒,具体涉及一种lncRNA诊断组合物及在制备诊断预示不同分子亚型乳腺癌骨转移的诊断试剂盒方面的应用。
技术介绍
乳腺癌是威胁女性生命健康的恶性肿瘤之一,每年约有40-45万人死于乳腺癌(参考文献:不同分子亚型乳腺癌骨转移患者的临床特征和预后分析,西安交通大学学报·医学版,2017年9月第38卷第5期)。乳腺癌非常容易发生远处转移,骨是乳腺癌最常见的远处转移部位,大于50%的患者首发转移部位是骨组织(参考文献:Genesassociatedwithbreastcancermetastatictobone,JClinOncol,2006;ImplicationsofBone-OnlyMetastasesinBreastCancer:FavorablePreferencewithExcellentOutcomesofHormoneReceptorPositiveBreastCancer,CancerResTreat,2011)。根据雌激素受体(estrogenreceptor,ER)、孕激素受体(progesteronereceptor,PR)、人表皮生长因子受体-2(humanepidermalgrowthfactorreceptor-2,HER-2)的表达情况,可将乳腺癌分为4个亚型,分别为:LuminalA型、LuminalB型、Her-2过表达型和三阴性乳腺癌(参考文献:Geneexpressionpatternsofbreastcarcinomasdistinguishtumorsubclasseswithclinicalimplications,PNAS,2001)。研究表明,乳腺癌骨转移的预后与其分子分型、临床分期、淋巴结状态等密切相关(参考文献:PrevalenceandriskfactorsofbonemetastasisandskeletalrelatedeventsinpatientswithprimarybreastcancerinJapan,IntJClinOnco,2014)。不同分子亚型乳腺癌特定的分子生物学和临床病理特征,决定了其治疗方式及预后的差异。不同分子亚型乳腺癌骨转移的基因表达水平也存在差异。早期诊断乳腺癌骨转移是挽救患者生命的关键。目前,放射性核素骨扫描(ECT)、电子计算机断层扫描(CT)、核磁共振(MRI)、正电子发射计算机断层扫描(PET-CT)和骨组织活检是发现和确诊乳腺癌骨转移的金标准。但是,这些方法均存在不同的不足,比如检查费用高,介入诊断增加了患者的负担。这增加了乳腺癌患者骨转移常规检测的压力。长链非编码RNA(longnon-codingRNA,lncRNA)是指长度超过200个核苷酸、具有调控基因表达作用的非编码RNA。近年来研究表明,长链非编码RNA在肿瘤的发生、发展过程中发挥着促癌或抑癌作用,它们参与了细胞凋亡调控、肿瘤浸润与转移等过程;另外,它们还通过表观遗传调控的方式影响肿瘤细胞的生长,有希望成为新型肿瘤标志物和肿瘤治疗的靶点,在肿瘤诊断和治疗方面显示出良好的临床应用前景(参考文献:长链非编码RNA与肿瘤的关系及其临床价值,中国细胞生物学学报,2012年第34卷第7期)。研究表明,乳腺癌原发肿瘤的多种基因表达是发生骨转移所必需的,因而认为特定器官的转移是多因子共同作用的结果,该结论提示,骨的特异性转移是骨对原发肿瘤内不同表型肿瘤细胞的选择和骨源性因子诱导的结果,不同分子亚型乳腺癌骨转移的差异表达基因有望成为成为乳腺癌骨转移的诊断标志物(参考文献:KangY,SiegelPM,ShuW,etal.Amultigenicprogrammediatingbreastcancermetastasistobone.CancerCell,2003)。申请人旨在研究比较发生骨转移与未发生骨转移的乳腺癌患者血清中lncRNA表达的差异,发现、验证可以用作诊断、预示不同分子亚型乳腺癌骨转移的lncRNA标志物,以提供一种通过血液即可快速诊断、预示不同分子亚型乳腺癌骨转移的试剂盒和方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足,提供一种lncRNA诊断组合物,制备成一种检测成本低、非介入性、方便快捷诊断预示不同分子亚型乳腺癌骨转移的诊断试剂盒。本专利技术的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的:一、LuminalA型乳腺癌骨转移一种lncRNA诊断组合物,由lncRNAXLOC_004122、lncRNASUMO1P3和lncRNANBAT-1组成。上述诊断组合物在制备诊断预示LuminalA型乳腺癌骨转移的诊断试剂盒方面的应用。用于诊断预示LuminalA型乳腺癌骨转移的诊断试剂盒,包括lncRNAXLOC_004122、lncRNASUMO1P3和lncRNANBAT-1的qPCR引物。优选地,所述的诊断试剂盒中,lncRNAXLOC_004122的qPCR上游引物如SequenceNO.1所示,qPCR下游引物如SequenceNO.2所示。优选地,所述的诊断试剂盒中,lncRNASUMO1P3的qPCR上游引物如SequenceNO.3所示,qPCR下游引物如SequenceNO.4所示。优选地,所述的诊断试剂盒中,lncRNANBAT-1的qPCR上游引物如SequenceNO.5所示,qPCR下游引物如SequenceNO.6所示。优选地,所述的诊断试剂盒中还包括内参GAPDH的qPCR引物。优选地,所述的诊断试剂盒中,所述内参GAPDH的qPCR上游引物如SequenceNO.19所示,qPCR下游引物如SequenceNO.20所示。上述任一所述的诊断试剂盒中还包括qRT-PCR所需的酶。一种诊断预示LuminalA型乳腺癌骨转移的方法,包括如下步骤:步骤S1,采集LuminalA型乳腺癌患者空腹静脉血,自然凝固后离心分离出血清;步骤S2,提取血清总RNA,用qRT-PCR法测定总RNA中lncRNAXLOC_004122、lncRNASUMO1P3和lncRNANBAT-1相对于内参GAPDH的相对表达水平,依次用X3、X1、X2表示;步骤S3,将X3、X1、X2值代入二元逻辑回归方程Y=-2.577+2.045X1+1.956X2+1.676X3得到Y值,Y值大于0.598预示该乳腺癌患者发生骨转移,小于0.598预示未发生骨转移。二、LuminalB型乳腺癌骨转移一种lncRNA诊断组合物,由lncRNAXLOC_004122、lncRNALinc00467和lncRNAAl049452组成。上述诊断组合物在制备诊断预示LuminalB型乳腺癌骨转移的诊断试剂盒方面的应用。用于诊断预示LuminalB型乳腺癌骨转移的诊断试剂盒,包括lncRNAXLOC_004122、lncRNALinc00467和lncRNAAl049452的qPCR引物。优选地,所述的诊断试剂盒中,lncRNAXLOC_004122的qPCR上游引物如SequenceNO.1所示,qPCR下游引物如SequenceNO.2所示。本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种lncRNA诊断组合物,其特征在于:由lncRNAXLOC_004122、lncRNALinc00467和lncRNAAl049452组成。

【技术特征摘要】
1.一种lncRNA诊断组合物,其特征在于:由lncRNAXLOC_004122、lncRNALinc00467和lncRNAAl049452组成。2.权利要求1所述的诊断组合物在制备诊断预示LuminalB型乳腺癌骨转移的诊断试剂盒方面的应用。3.一种用于诊断预示LuminalB型乳腺癌骨转移的诊断试剂盒,其特征在于:包括lncRNAXLOC_004122、lncRNALinc00467和lncRNAAl049452的qPCR引物。4.根据权利要求3所述的诊断试剂盒,其特征在于:lncRNAXLOC_004122的qPCR上游引物如SequenceNO.1所示,qPCR下游引物如SequenceNO.2所示。5.根据权利要求3所述的诊断试剂盒,其特征在于:lncRNALinc00467的qPCR上游引物如SequenceNO.7所示,qPCR下游引物如SequenceNO.8所示。6.根据权利要求3所述的诊断试剂盒,其特征在于:lncRNAAl049452的qPCR上游引物如SequenceNO.9所示,qPCR下游引物如Sequ...

【专利技术属性】
技术研发人员:李宜健薛守海王凤祥刘敏涛胡雨祝
申请(专利权)人:李宜健
类型:发明
国别省市:江苏,32

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