The invention discloses a difference validation of candidate genes in hepatocellular carcinoma and its protein expression in hepatocellular carcinoma, new protein markers were screened, using real-time fluorescence quantitative PCR (Real time PCR) technology to verify their change in the expression level of mRNA in hepatocellular carcinoma tissues; then Western blot technology to verify their change in protein expression the level of liver cancer tissue, further screening of HCC showed differential expression; liver cancer is the first cancer killer in Guangxi. It is of great significance to find effective tumor markers for the study of the mechanism of carcinogenesis, the early diagnosis of the disease and the judgement of the prognosis. Objective to evaluate the value of these key peptides in diagnosis of hepatocellular carcinoma and analyze their clinical relevance, and put forward their feasibility in the clinical application of liver cancer prevention, early diagnosis and prognosis.
【技术实现步骤摘要】
一种验证候选蛋白其基因在肝癌组织的差异表达
本专利技术涉及基因转录组学和蛋白质组学领域,尤其是一种验证候选蛋白其基因在肝癌组织的差异表达。
技术介绍
20世纪原发性肝癌已上升为我国第二位癌症杀手,在城市仅次于肺癌,在农村则仅次于胃癌[1]。目前广西每年有3.5万人左右死于恶性肿瘤,其中,死于肝癌的有1.2万人左右,可见,肝癌是广西第一位癌症杀手。在广西范围内,肝癌危害情况很不均衡。肝癌死亡率较高的县、市,主要集中于桂西南地区,以南宁周边的扶绥、隆安、武鸣三县最为高发,这个局部地区的肝癌发生密度,达到50~60/10万,其中的个别行政村,肝癌发生密度竟高达140~160/10万,这样的肝癌发生率在世界上也是罕见的。肝癌不仅发病率高而且死亡率也高,可谓“癌中之王”,广西肝癌的死亡率已经上升到27.31/10万,占全部恶性肿瘤死亡率的34.12%。由于原发性肝癌早期一般无任何症状,一旦出现临床表现,病情大多已进入中、晚期,而且恶性程度高、进展快、预后差、侵袭性强,因此,寻找有效的肿瘤标志物用于癌变机理研究、药物靶标的设计、疾病的早期诊断及高危人群的筛查成为广西地区肝癌研究的当务之急。目前,肝癌的发现和诊断是通过血清AFP检测结合影像学检查。其中临床较为公认的肝癌诊断标准为:血清AFP浓度>400μg/L,持续4周,影像学发现肝脏有实质性占位且能排除肝炎活动、生殖胚胎性肿瘤等疾病。但仅依靠血清AFP浓度来诊断肝癌,灵敏度为39%~64%之间,特异度为76%~91%,阳性预测值只在9%~32%,这就使得很多肝癌患者漏检,或假阳性和假阴性,直接影响肝癌患 ...
【技术保护点】
一种验证候选蛋白其基因在肝癌组织的差异表达,其特征在于:由以下步骤组成:对筛选出的肝癌新蛋白标志物,先用实时荧光定量PCR(Real‑time PCR)技术验证它们在肝癌组织mRNA水平的表达改变;再用Western blot技术验证它们在肝癌组织蛋白质水平的表达改变,进一步筛选出肝癌显示差异表达者;①RT‑PCR验证:用实时荧光定量RT‑PCR技术检测候选其调控表达基因在肝癌组织(各10~15例)以及相应的正常对照肝组织(或癌旁组织)的mRNA表达水平,从中筛选出肝癌组织显示差异表达的基因进入下一步筛选;②Western blot验证:用Western blot技术检测候选蛋白在肝癌组织(各10~15例)以及相应的正常对照肝组织(或癌旁组织)的蛋白质表达水平,从中进一步筛选出在肝癌组织显示差异表达的基因进入下一步功能实验。
【技术特征摘要】
1.一种验证候选蛋白其基因在肝癌组织的差异表达,其特征在于:由以下步骤组成:对筛选出的肝癌新蛋白标志物,先用实时荧光定量PCR(Real-timePCR)技术验证它们在肝癌组织mRNA水平的表达改变;再用Westernblot技术验证它们在肝癌组织蛋白质水平的表达改变,进一步筛选出肝癌显示差异表达者;①RT-PCR验证:用实时荧光定量RT-PCR技术检测候选其调...
【专利技术属性】
技术研发人员:于思创,王海云,
申请(专利权)人:南宁科城汇信息科技有限公司,
类型:发明
国别省市:广西,45
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