一种工业化生产豌豆活性肽及制备方法技术

本发明专利技术公开一种工业化生产豌豆活性肽的方法。本发明专利技术以豌豆为原料，采用风味、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶多酶酶解，然后通过灭酶、离心、过滤、浓缩、脱色和喷雾干燥等工序，制得豌豆活性肽。其分子量小于1000Da的组分占90％以上，游离氨基酸含量低于5％，并至少含有2.0％含量的三肽酪氨酸‑谷氨酰胺‑酪氨酸(Tyr‑Gln‑Tyr，YQY)序列肽段。本发明专利技术的生产方法具有生物活性高、加工成本低、处理量大、便于工业化生产的优点，以此方法制备的豌豆活性肽可以作为新的功能性营养成分应用于普通食品、保健食品和药品的开发与生产，具有广阔的市场前景。

A kind of industrialized production of pea peptide and its preparation method

The invention discloses a method for industrialized production of pea active peptide. The pea is used as raw material, and is hydrolysate with flavor, papain and trypsin, then pease active peptide is prepared by enzyme killing, centrifugation, filtration, concentration, decolorization and spray drying. The molecular components of less than 1000Da accounted for more than 90%, the free amino acid content of less than 5%, and contains at least 2% content of three peptide tyrosine tyrosine glutamine (Tyr Gln Tyr, YQY) peptide sequence. The production method of the invention has high biological activity, low processing cost, large capacity, easy industrial production, development and production of pea peptide prepared in this way can be used as a functional nutrient application in ordinary food, health food and medicine, and has broad market prospects.

【技术实现步骤摘要】
一种工业化生产豌豆活性肽及制备方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种工业化生产豌豆活性肽及制备方法。
技术介绍
豌豆，是春播一年生或秋播越年生攀缘性草本植物，因其茎秆攀援性而得名。圆身的又称蜜糖豆或蜜豆。豌豆具有多种功能，如增强机体免疫功能，豌豆中富含人体所需的各种营养物质，尤其是含有优质蛋白质，可以提高机体的抗病能力和康复能力。防癌治癌：豌豆中富含胡萝卜素，食用后可防止人体致癌物质的合成，从而减少癌细胞的形成，降低人体癌症的发病率。通利大肠：豌豆中富含粗纤维，能促进大肠蠕动，保持大便能畅，起到清洁大肠的作用。食疗作用豌豆味甘、性平，归脾、胃经；具有益中气、止泻痢、调营卫、利小便、消痈肿、解乳石毒之功效；主治脚气、痈肿、乳汁不通、脾胃不适、呃逆呕吐、心腹胀痛、口渴泄痢等病症。通过对豌豆粉进行蛋白酶酶解，将蛋白酶解成小分子量的低聚肽，大大增加了产品的溶解性，豌豆活性肽的成功制备为传统食品豌豆粉农产品深加工提供了一条新型工业化道路，使豌豆粉这一丰富的普通食品蛋白资源得到充分利用，大大扩大了豌豆粉作为一种传统普通食品原料的应用领域，提高了大宗农产品的附加值，发挥了更大的经济价值，并提高了综合的社会效益。与原蛋白相比，小分子的豌豆活性肽更加容易被消化吸收。由于其一系列良好的食品加工性能，豌豆活性肽也可与其它不同来源的蛋白质混合，以提高其营养价值，也可用于生产速溶饮品、功能饮料、肉制品、乳制品、焙烤食品等多样化的食品。豌豆活性肽因其相当高的安全性和营养价值，并且具有良好的食品加工性能可以添加到许多的食品当中去，其市场前景非常看好。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种工业化生产豌豆活性肽的制备方法，以解决技术问题。一种豌豆活性肽的制备方法，包括以下步骤：A、将豌豆预处理，进行超微粉碎，过200-600目，以100∶2～10(L∶kg)的液料比用水和豌豆粉混合调浆，调节pH8-10微碱化处理，加热至60～80℃。保温搅拌30～120min；B、将反应罐中的碱性料液泵入离心机中，分离成清液和渣料，收集渣料，将渣料加水稀释，加热至60～80℃，搅拌并分离，以同样的处理方式进行3次；C、调节上清液的pH值至4-6后，机械搅拌8-12h、离心，收取沉淀，沉淀即为豌豆蛋白，重复两次；D、将沉淀加水复溶，加热至75-100℃，时间15-45min，使得蛋白质变性，然后进行高压均质；E、调节上述溶液pH至5-10，加入专用酶制剂∶风味蛋白酶∶木瓜蛋白酶∶胰蛋白酶为1～3∶2～4∶1～2，酶解温度为40-65℃，时间为1.5-8h；F、酶解结束之后，灭酶温度90-125℃，灭酶时间为1-3h，结束后得粗酶解液；G：为将粗酶解液离心、过滤、蒸发浓缩、加入活性炭脱色，然后喷雾干燥得到豌豆活性肽粉。如上述的豌豆活性肽的制备方法，其特征在于，所述的步骤A中，进行超微粉碎可以提高酶解率，充分利用物质组分。如上述的豌豆活性肽的制备方法，其特征在于，所述的步骤C中，采用热变性的方法，可以更加利于酶解，酶解更加充分。同时热变性之后进行高压均质，进一步提高酶解效率。如上述的豌豆活性肽的制备方法，其特征在于，所述的步骤D，专用酶制剂组合包括风味蛋白酶∶木瓜蛋白酶∶胰蛋白酶为1～3∶2～4∶1～2。研究发现其专用酶制剂组合的酶解效率远大约单一酶的酶解效率。如上述的豌豆活性肽的制备方法，其特征在于，喷雾干燥所用的为中低温喷雾干燥塔，进一步保留热敏活性物质，并且中低温喷雾干燥塔是首次在肽工艺中得到应用。一种豌豆活性肽的制备方法，其特征在于，按照权利要求1所述的制备方法，所述豌豆低聚肽其特征在于分子量小于1000Da的组分占90％以上，游离氨基酸含量低于5％，并至少含有2.0％含量的三肽酪氨酸-谷氨酰胺-酪氨酸(Tyr-Gln-Tyr，YQY)序列肽段。除了上面所描述的目的、特征和优点之外，本专利技术还有其它的目的、特征和优点。下面将对本专利技术作进一步详细的说明。具体实施方式以下对本专利技术的实施例进行详细说明，但是本专利技术可以根据权利要求限定和覆盖的多种不同方式实施。1、一种工业化生产豌豆活性肽的制备方法，包括以下步骤：A、将豌豆预处理，进行超微粉碎，过200-600目，以100∶7(L∶kg)的液料比用水和豌豆粉混合调浆，调节pH9微碱化处理，加热至70℃。保温搅拌80min；B、将反应罐中的碱性料液泵入离心机中，分离成清液和渣料，收集渣料，将渣料加水稀释，加热至70℃，搅拌并分离，以同样的处理方式进行3次；C、调节上清液的pH值至5后，机械搅拌10h、离心，收取沉淀，沉淀即为豌豆蛋白，重复两次；D、将沉淀加水复溶，加热至85℃，时间30min，使得蛋白质变性，然后进行高压均质；E、调节上述溶液pH至6，加入专用酶制剂∶风味蛋白酶∶木瓜蛋白酶∶胰蛋白酶为2.5∶3.5∶1.5，风味蛋白酶∶木瓜蛋白酶∶胰蛋白酶的添加量为每克蛋白质1500单位，酶解温度为50℃，时间为3h；F、酶解结束之后，灭酶温度90-125℃，灭酶时间为1-3h，结束后得粗酶解液；G：为将粗酶解液离心、过滤，采用孔径0.05～0.1μm的膜过滤设备进行过滤，条件为压力0.2～0.4MPa，温度30～80℃。蒸发浓缩、加入活性炭脱色，加入浓缩液总固体含量的5％活性炭质量进行脱色，然后喷雾干燥得到豌豆活性肽粉。2、豌豆活性肽的理化组成和分子量分布分析豌豆活性肽的成分分析结果见表1，从中可以看出本专利技术制备的豌豆活性肽总蛋白质含量高达97.5％，具有很高的产品质量。表1：豌豆活性肽的基础理化成分分析含量％总蛋白质(干基)97.5±0.32脂肪0.09±0.01灰分4.13±0.13将豌豆活性肽样品于GEL-HPLC中进样以后，得到其凝胶色谱图，用液相数据处理软件将豌豆活性肽的凝胶色谱数据代入校正曲线方程中进行计算，得到样品的肽的相对分子质量及其分布范围。分子量1000Da以下组分中的二肽、三肽的在人体内的吸收利用率极高，具有比游离氨基酸更高的营养价值和生理功能。本专利技术用峰面积归一化法计算了豌豆活性肽的相对分子质量分布范围，如表2所示。由分子量分布结果可以看出，分子量小于1000Da的组分总共占91.62％，如果按氨基酸的平均分子量137Da来计算，分子量1000Da以下的组分则多是八肽以下的低聚肽，也包括部分游离氨基酸。其中分子量在140Da-500Da的占59.97％，占据了1000Da以下的绝大部分，这部分主要是二肽、三肽和四肽。表2：豌豆活性肽分子量分布结果3、豌豆活性肽中结构鉴定与标志性肽段定量根据国内外最新营养研究表明，蛋白质摄入后，并不完全水解成氨基酸，而是大部分以肽的形式被机体消化吸收。肽类物质除具有易消化、易吸收的营养功能外，更重要的生物学意义主要体现在其具有氨基酸不可比拟的生理活性功能。豌豆活性肽作为一种混合性肽，含有许多具有各种生理功能的肽段。同时，其相对分子质量小于1000的组分占到90％以上，说明本产品基本上是由短肽组成。特殊的蛋白原料来源和独特的生产工艺，使本产品含有一定量的特征成分肽。我们对豌豆活性肽中的肽段进行分离及结构鉴定。通过采用高效液相色谱分离与质谱分析，对本产品中的肽段进行分离及结构鉴定，共鉴定出38个肽段的一级结构。我们已研究出定量测定豌豆活性肽中三本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种工业化生产豌豆活性肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：A、将豌豆预处理，进行超微粉碎，过200～600目，以100∶2～10(L∶kg)的液料比用水和豌豆粉混合调浆，调节pH8～10微碱化处理，加热至60～80℃。保温搅拌30～120min；B、将反应罐中的碱性料液泵入离心机中，分离成清液和渣料，收集渣料，将渣料加水稀释，加热至60～80℃，搅拌并分离，以同样的处理方式进行3次；C、调节上清液的pH值至4～6后，机械搅拌8～12h、离心，收取沉淀，沉淀即为豌豆蛋白，重复两次；D、将沉淀加水复溶，加热至75～100℃，时间15～45min，使得蛋白质变性，然后进行高压均质；E、调节上述溶液pH至5～10，加入专用酶制剂：风味蛋白酶∶木瓜蛋白酶∶胰蛋白酶为1～3∶2～4∶1～2，酶解温度为40～65℃，时间为1.5～8h；F、酶解结束之后，灭酶温度90～125℃，灭酶时间为1～3h，结束后得粗酶解液；G：为将粗酶解液离心、过滤、蒸发浓缩、加入活性炭脱色，然后喷雾干燥得到豌豆活性肽粉。

【技术特征摘要】
1.一种工业化生产豌豆活性肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：A、将豌豆预处理，进行超微粉碎，过200～600目，以100∶2～10(L∶kg)的液料比用水和豌豆粉混合调浆，调节pH8～10微碱化处理，加热至60～80℃。保温搅拌30～120min；B、将反应罐中的碱性料液泵入离心机中，分离成清液和渣料，收集渣料，将渣料加水稀释，加热至60～80℃，搅拌并分离，以同样的处理方式进行3次；C、调节上清液的pH值至4～6后，机械搅拌8～12h、离心，收取沉淀，沉淀即为豌豆蛋白，重复两次；D、将沉淀加水复溶，加热至75～100℃，时间15～45min，使得蛋白质变性，然后进行高压均质；E、调节上述溶液pH至5～10，加入专用酶制剂：风味蛋白酶∶木瓜蛋白酶∶胰蛋白酶为1～3∶2～4∶1～2，酶解温度为40～65℃，时间为1.5～8h；F、酶解结束之后，灭酶温度90～125℃，灭酶时间为1～3h，结束后得粗酶解...

【专利技术属性】
技术研发人员：林峰，
申请(专利权)人：林峰，
类型：发明
国别省市：江苏,32