一种维帕他韦有关物质的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种维帕他韦有关物质的检测方法，采用磷酸水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱，可实现维帕他韦与有关物质的有效分离。

A method for detecting related substances of the art He Wei

The invention relates to a detection method of related substances in the art of oseltamivir, using phosphoric acid solution and acetonitrile as mobile phase in gradient elution, can realize the effective separation of art of oseltamivir and related substances.

【技术实现步骤摘要】
一种维帕他韦有关物质的检测方法
本专利技术涉及一种维帕他韦有关物质的检测方法，属于药物分析

技术介绍
吉利德三代又称为吉三代、伊柯鲁沙，商品名为Epclusa，是索非布韦Sofosbuvir与维帕他韦Velpatasvir的复合制剂，适用于全部6种基因型丙肝患者的治疗，由美国吉利德公司研制成功，于2016年6月28日被批准在美国上市。维帕他韦（Velpatasvir），又名Methyl[(2S)-1-[(2S,5S)-2-[9-[2-[(2S,4S)-1-[(2R)-2-[(methoxycarbonyl)amino]-2-phenylacetyl]-4-(methoxymethyl)pyrrolidin-2-yl]-1H-imidazol-5-yl]-1,11-dihydroisochromeno[4',3':6,7]naphtho[1,2-d]imidazol-2-yl]-5-methylpyrrolidin-1-yl]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]carbamate，化学结构式如下式Ⅰ所示，根据目前的工艺路线，本品存在工艺杂质A，如下式Ⅱ所示。式Ⅰ。式Ⅱ。到目前为止，未见到文献报道对维帕他韦有关物质进行测定的方法。
技术实现思路
专利技术概述。本专利技术人通过反复实验，筛选不同类型的色谱柱，尝试不同的流动相条件，最终获得一种适合于检测维帕他韦原料药中有关物质的分析方法。所述方法是在高效液相色谱上进行的，检测器是液相二极管阵列检测器(DAD)或紫外(UV)检测器，以磷酸水溶液和有机溶剂乙腈作为流动相进行梯度洗脱，采用C18烷基硅烷键合硅胶色谱柱进行色谱分离检测，该方法具有优越的专属性、高灵敏度、高准确度和高效的特点。本专利技术是通过以下技术方案实现的。本专利技术提供了一种维帕他韦有关物质的检测方法，其特征在于：供试品溶液：取维帕他韦原料药粉末适量，用甲醇溶解并定量稀释成1.0mg/mL的溶液；流动相A：磷酸水溶液；流动相B：乙腈；色谱柱：250mm×4.6mm，5μm；填料：C18烷基硅烷键合硅胶；柱温：30℃；检测波长：295nm；流速：1.2mL/min；洗脱方式：梯度洗脱；梯度洗脱条件：取上述供试品溶液20μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图。所述的流动相必须由磷酸水溶液和乙腈组成。所述的磷酸水溶液中磷酸的体积浓度为0.05%~0.10%。所述的色谱柱填料是C18烷基硅烷键合硅胶。所述的色谱柱的品牌是Kromstar、Agilent。所述的洗脱方式需为梯度洗脱。所述的检测方法中，维帕他韦与有关物质能达到基线分离。所述的检测方法是用于检测维帕他韦原料药及其有关物质A。采用本专利技术的检测方法可以实现维帕他韦与有关物质A的有效分离，分离度良好，且具有很好的重现性。附图说明图1为实施例1中维帕他韦有关物质的HPLC分析图。图2为实施例2中维帕他韦有关物质的HPLC分析图。图3为实施例3中维帕他韦有关物质的HPLC分析图。具体实施方式为了使本领域的技术人员更好地理解本专利技术的技术方案，下面进一步披露一些非限制实施例对本专利技术作进一步的详细说明。实施例1。供试品溶液：取维帕他韦原料药粉末适量，用甲醇溶解并定量稀释成1.0mg/mL的溶液；流动相A：0.1%磷酸水溶液；流动相B：乙腈；色谱柱：250mm×4.6mm，5μm；填料：C18烷基硅烷键合硅胶；色谱柱品牌：Kromstar柱温：30℃；检测波长：295nm；流速：1.2mL/min；洗脱方式：梯度洗脱；梯度洗脱条件：取上述供试品溶液20μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图。结果见图1，图1中14.330min的色谱峰为维帕他韦有关物质A的色谱峰，14.774min为维帕他韦的色谱峰。二者的分离度为1.63。实施例2。供试品溶液：取维帕他韦原料药粉末适量，用甲醇溶解并定量稀释成1.0mg/mL的溶液；流动相A：0.1%磷酸水溶液；流动相B：乙腈；色谱柱：250mm×4.6mm，5μm；填料：C18烷基硅烷键合硅胶；色谱柱品牌：Agilent柱温：30℃；检测波长：295nm；流速：1.2mL/min；洗脱方式：梯度洗脱梯度洗脱条件：取上述供试品溶液20μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图。结果见图2，图2中12.450min的色谱峰为维帕他韦有关物质A的色谱峰，12.925min为维帕他韦的色谱峰。二者的分离度为1.92。实施例3对比实施例。取实施例1中的样品，并将实施例1中的流动相A更换成0.1%三氟乙酸水溶液进行检测，其他色谱参数同实施例1。结果如图3所示，并且尝试在该体系下，考察不同的梯度洗脱条件，结果均不能将维帕他韦及其有关物质A分离，表明以三氟乙酸水溶液和有机溶剂乙腈为流动相不能将主峰与杂质有效分离，不适合维帕他韦有关物质的检测。综上所述，本专利技术所述的维帕他韦有关物质的方法，可适用于维帕他韦有关物质的控制。以上所述实施方式仅为本专利技术的优选实施例，而并非本专利技术可行实施的穷举。对于本领域一般技术人员而言，在不背离本专利技术原理和精神的前提下对其所作出的任何显而易见的改动，都应当被认为包含在本专利技术的权利要求保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种维帕他韦有关物质的检测方法，其特征在于：供试品溶液：取维帕他韦原料药粉末适量，用甲醇溶解并定量稀释成 1.0 mg/mL 的溶液 ；流动相 A：磷酸水溶液；流动相 B：乙腈；色谱柱：250 mm×4.6 mm，5 μm；填料：C18 烷基硅烷键合硅胶；柱温：30 ℃；检测波长：295 nm；流速 ：1.2 mL/min；洗脱方式：梯度洗脱梯度洗脱条件：

【技术特征摘要】
1.一种维帕他韦有关物质的检测方法，其特征在于：供试品溶液：取维帕他韦原料药粉末适量，用甲醇溶解并定量稀释成1.0mg/mL的溶液；流动相A：磷酸水溶液；流动相B：乙腈；色谱柱：250mm×4.6mm，5μm；填料：C18烷基硅烷键合硅胶；柱温：30℃；检测波长：295nm；流速：1.2mL/min；洗脱方式：梯度洗脱梯度洗脱条件：时间/min流动相A/%流动相B/%08020205050251090301090取上述供试品溶液20μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的流动相必须由磷酸水溶液和乙腈组成。3...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡惠坚，顾世海，
申请(专利权)人：安徽一灵药业有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34