The invention discloses a production process of Aureobasidium pullulans producing pullulan polysaccharide, which comprises the following steps: seed cultivation; preparation of seed medium were prepared potato dextrose agar, a seed medium, two seed medium, three seed culture medium; activation of seed culture. The Aureobasidium pullulans bevel connected to a single colony level seed flask flask will be activated after activation; seed culture fluid volume percentage concentration of 20% of the amount of 1% connected to a new two level seed flask culture expansion; culture will expand the seed culture solution by volume percentage concentration of 1% the amount of 20% is connected to the three stage seed flask culture, the fermentation medium for fermentation of seeds; seed culture inoculated fermentation tank with liquid fermentation medium and fermentation culture You can keep it. The raw material of the invention has wide sources, reduced the production cost, and achieved the effect of economic, high efficiency and energy saving.
【技术实现步骤摘要】
一种出芽短梗霉发酵生产普鲁兰多糖的生产工艺
本专利技术涉及普鲁兰多糖生产
，具体是一种出芽短梗霉发酵生产普鲁兰多糖的生产工艺。
技术介绍
微生物发酵法生产普鲁兰多糖最初是在1959年由德国科学家Bender发现的。1992年日本长濑公司(过去为日本林原公司)将出芽短梗霉发酵生产普鲁兰多糖进行产业化。普鲁兰多糖(Pullulan)是由出芽短梗霉(Aurebasidiumpullulans)利用糖质化合物为基质进行好气发酵生产的一种粘性胞外多糖，该糖以麦芽三糖为基准单元、通过α-1.6-糖苷键重复连接而成的线状高分子多糖。分子量一般在4.8×104-2.2×106Daltons之间，平均分子量2×105Daltons)，聚合度100-5000，在10g/L的浓度下其旋光度为192°。普鲁兰多糖是一种非离子性、非还原性的稳定多糖，能与水无限混溶，可作粘性、中性、非离子性的不胶化水溶液。且无毒、无害、无色、无味，耐热、耐盐、耐酸碱、黏度低、可塑性强、造膜性强、成膜性好和非常优良的增稠作用等特点已广泛应用于医药、食品、轻工、化工和石油等领域。普鲁兰多糖膜具有玻璃纸样光...
【技术保护点】
一种出芽短梗霉发酵生产普鲁兰多糖的生产工艺，其特征在于，包括以下步骤：1)种子培养；1.1)制备种子培养基；1.1.1)制备马铃薯葡萄糖琼脂培养基，称取去皮马铃薯200g，切成小块，加1000mL水煮沸30min，用六层纱布滤成清液，向清液中加水至1000mL，然后加入20g葡萄糖完全溶解，再加入琼脂20g，搅拌混合均匀后，即可获得马铃薯葡萄糖琼脂培养基；1.1.2)制备一级种子培养基，所述一级种子培养基包含以下组分：葡萄糖50.0g/L‑100g/L、酵母浸粉0.5g/L‑2.0g/L、(NH4)2SO4 0.1g/L‑2.5g/L、NaNO3 0.36g/L‑1.75g...
【技术特征摘要】
1.一种出芽短梗霉发酵生产普鲁兰多糖的生产工艺，其特征在于，包括以下步骤：1)种子培养；1.1)制备种子培养基；1.1.1)制备马铃薯葡萄糖琼脂培养基，称取去皮马铃薯200g，切成小块，加1000mL水煮沸30min，用六层纱布滤成清液，向清液中加水至1000mL，然后加入20g葡萄糖完全溶解，再加入琼脂20g，搅拌混合均匀后，即可获得马铃薯葡萄糖琼脂培养基；1.1.2)制备一级种子培养基，所述一级种子培养基包含以下组分：葡萄糖50.0g/L-100g/L、酵母浸粉0.5g/L-2.0g/L、(NH4)2SO40.1g/L-2.5g/L、NaNO30.36g/L-1.75g/L、K2HPO41.0g/L-8.0g/L、NaCl0.15g/L-1.5g/L、MgSO4·7H2O0.1g/L-0.8g/L，取各组分搅拌混合均匀后，控制pH为5.5-7.0，并在121℃下灭菌20min，即可获得一级种子培养基；1.1.3)制备二级种子培养基，所述二级种子培养基包含以下组分：葡萄糖50.0g/L-100g/L、酵母浸粉0.5g/L-2.0g/L、(NH4)2SO40.1g/L-2.5g/L、NaNO30.36g/L-1.75g/L、K2HPO41.0g/L-8.0g/L、NaCl0.15g/L-1.5g/L、MgSO4·7H2O0.1g/L-0.8g/L，取各组分搅拌混合均匀后，控制pH为5.5-7.0，并在121℃下灭菌20min，即可获得二级种子培养基；1.1.4)制备三级种子培养基，所述三级种子培养基包含以下组分：碳源10.0g/L-50.0g/L、复合氮源10.0g/L-50.0g/L、无机氮源0.1g/L-2.5g/L、盐类1.0g/L-8.0g/L、NaCl0.15g/L-1.5g/L、金属离子源0.1g/L-0.8g/L，取各组分搅拌混合均匀后，控制pH为5.5-7.0，并在121℃下灭菌20min，即可获得三级种子培养基；1.2)种子活化培养，将出芽短梗霉菌种斜面单菌落接于一级种子摇瓶中进行摇瓶活化；将活化后的种子培养液以体积百分比浓度1％-20％的量接于新的二级种子摇瓶中进行扩大培养；将扩大培养后所得的种子培养液以体积百分比浓度1％-20％的量接于三级种子摇瓶中进行培养，获得待发酵种子培养液；2)将待发酵种子培养液接种至装有发酵培养基的发酵罐中，进行发酵培养，即可。2.根据权利要求1所述的出芽短梗霉发酵生产普鲁兰多糖的生产工艺，其特征在于，步骤1.1.4)中，所述碳源为葡萄糖、蔗糖、淀粉酸解液、糖蜜、果糖、麦芽糖、乳糖中的一种或多种组合；所述复合氮源为尿素、味精、鱼蛋白胨、大豆蛋白胨、酵母浸粉、酵母膏、牛肉膏、玉米浆、胰蛋白胨中的一种或多种组合；所述无机氮源为碳酸铵、氨水、硫酸铵、氯化铵、硝酸钠、硝酸钾、钼酸铵中的一种或多种组合；所述盐类为磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、硫酸钾、磷酸钾、碳酸钾、氯化钾中的一种或多种组合；所述金属离子源为硫酸亚铁、硫酸铁、硫酸锰、硫酸锌、硫酸镁...
【专利技术属性】
技术研发人员：晋玉宽，王亚飞，
申请(专利权)人：北京艾普希隆生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11
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