一种制备胰激肽原酶原料药的方法技术

本发明专利技术涉及一种制备高纯度生物原料药的方法，特别是一种高纯度胰激肽原酶原料药的方法。该方法由胰激肽原酶中间体在优化的分离条件下，经过ＱＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ　　Ｆａｓｔ　　Ｆｌｏｗ离子柱层析纯化制得的激肽原酶的原料药。该原料药的纯度高达７５％以上，效价增加５５单位／ｍｇ以上，比活达到３５０单位／ｍｇ蛋白以上。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种制备高纯度胰激肽原酶原料药的方法，其特征在于包括以下步骤：１．配制：配制０．１５－０．５ｍｏｌ／Ｌ的ＮＨ↓［４］ＡＣ缓冲液和０．１－０．５ｍｏｌ／Ｌ的ＮＨ↓［４］ＡＣ缓冲液，调整至ｐＨ６．０，并测电导值；２．层析：２．１平衡：将装有ＱＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦａｓｔＦｌｏｗ离子柱填料的层析柱，用ｐＨ６．０的０．１５－０．５ｍｏｌ／Ｌ的ＮＨ↓［４］ＡＣ缓冲液平衡，直至进出溶液ｐＨ值一致、电导值相同后平衡完毕；２．２进样：调胰激肽原酶中间体的ｐＨ值与平衡液相近（６．１～６．２），电导值略低于平衡液电导值（略低０．２～０．３×１０↑［４］μｓ／ｃｍ），根据每升填料最大交换量２０００万单位计算上样量并将上样液上柱；２．３洗涤：用ｐＨ６．０的０．１５－０．５ｍｏｌ／Ｌ的ＮＨ↓［４］ＡＣ缓冲液冲洗柱子，同时用分光光度计跟踪检测流出液在２８０ｎｍ处的吸收值，冲洗至洗出液ＯＤ值低于０．５时停止；２．４洗脱：用ｐＨ６．０的０．１－０．５ｍｏｌ／Ｌ的ＮＨ↓［４］ＡＣ缓冲液以５００～６００ｍｌ／ｍｉｎ流速洗脱柱子，同时用分光光度计进行跟踪检测其在２５３ｎｍ处的吸收值，收集峰液；３．超滤脱盐：将收集液加纯化水超滤脱盐浓缩，当超出液电导值小于０．１×１０↑［４］μｓ／ｃｍ以下时，即可停止加纯化水，继续浓缩；４．浓缩液过滤；５．加辅料冻干；６．过筛、分装。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：万龙岩，陈一平，杨志建，
申请(专利权)人：上海丽珠制药有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]