一种乌司他丁和尿促性素联合提取方法技术

本发明专利技术提供了一种乌司他丁和尿促性素联合提取方法，涉及乌司他丁和尿促性素制备技术领域，包括：收集绝经女性的尿液作为尿液原料；通过壳聚糖对尿液原料进行吸附，固液分离后得到吸附壳聚糖和第一滤液；利用洗脱液对吸附壳聚糖进行洗脱得到第二滤液；将第二滤液加入硫酸铵得到沉淀溶液，固液分离后取固体不溶物得到乌司他丁；将第一滤液通过高岭土进行吸附并用氨水溶液洗脱即得到尿促性素。本发明专利技术提供的乌司他丁和尿促性素联合提取方法，实现了乌司他丁和尿促性素在联产过程中的免疫效价收率都达到了很好的效果，联合提取方法极大的提高了绝经尿液的利用率，为乌司他丁和尿促性素的获取降低了成本，为两种组分的联合提取带来了巨大的方便。巨大的方便。巨大的方便。

【技术实现步骤摘要】
一种乌司他丁和尿促性素联合提取方法


[0001]本专利技术涉及乌司他丁和尿促性素制备
，更具体地说，涉及一种乌司他丁和尿促性素联合提取方法。

技术介绍

[0002]乌司他丁(UTI)，又称尿胰蛋白酶抑制剂，为新鲜人尿中提取的一种能抑制多种蛋白水解酶活力的糖蛋白，属蛋白酶抑制剂。临床上可用于治疗急性胰腺炎，慢性复发性胰腺炎，亦可用于急性循环衰竭的抢救辅助用药。乌司他丁含有143个氨基酸，其氨基酸序列中的第10位丝氨酸(O
‑
糖基化位点)和第45位天冬酰胺(N
‑
糖基化位点)上有糖链，长肽链中含有6对二硫键。
[0003]尿促性素(human menopausal gonadotropin，HMG)是从绝经尿中提取出来的促性腺激素，是人脑下垂体前叶嗜碱性细胞分泌的糖蛋白促性腺激素，包含等比例的卵泡刺激素(follicle
‑
stimulating hormone，FSH)、促黄体激素(luteinizing hormone(LH)，主要具有促卵泡成熟素(FSH)的作用，而促黄体生成素(LH)作用甚微。临床上尿促性素主要应用于治疗女性排卵障碍导致的不孕症，是促排卵的主要药物。另外，也用于男性激素水平低下导致的精子过少或活力不足，妇女闭经，月经不调及男女性机能失调等症。
[0004]目前，尿促性素，主要是从女性绝经尿液中提取得到；而乌司他丁粗品的传统制备方法，都是从男性尿液中提取获得，并没有关于从女性绝经尿中提取的报道研究。在女性绝经尿液中，存在乌司他丁和尿促性素两种药物成分，但目前现有的提取方法，只能进行单一成分的提取，并没有对于乌司他丁和尿促性素进行联产提取得到的方法，而将现有的方法简单的拼接、组合进行提取，存在收率低、成本高的问题，为乌司他丁和尿促性素两种组分的获取带来了巨大的不便。

技术实现思路

[0005]为解决上述缺陷，本专利技术提供一种乌司他丁和尿促性素联合提取方法，包括：收集绝经女性的尿液，作为尿液原料；通过壳聚糖对所述尿液原料进行吸附，固液分离后得到吸附壳聚糖和第一滤液；利用洗脱液对所述吸附壳聚糖进行洗脱，得到第二滤液；将所述第二滤液加入硫酸铵得到沉淀溶液，对所述沉淀溶液固液分离后取固体不溶物，即得到所述乌司他丁；将所述第一滤液通过高岭土进行吸附，并用氨水溶液洗脱，即得到所述尿促性素。
[0006]优选地，所述通过壳聚糖对所述尿液原料进行吸附步骤中，加入的所述壳聚糖与所述尿液原料的比例为：(1kg
‑
4kg):1000L。
[0007]优选地，所述尿液原料在通过所述壳聚糖进行吸附时，所述尿液原料的pH为4.0
‑
7.0。
[0008]优选地，所述通过壳聚糖对所述尿液原料进行吸附，固液分离后得到吸附壳聚糖和第一滤液，包括：
[0009]对所述壳聚糖进行预处理至中性，得到预处理后的壳聚糖；
[0010]将所述尿液原料调节pH至4.0
‑
7.0；
[0011]根据(1kg
‑
4kg):1000L的比例，向调节pH后的尿液原料中加入所述预处理后的壳聚糖进行吸附，得到吸附混合料；
[0012]对所述吸附混合料固液分离，分别得到所述吸附壳聚糖和所述第一滤液。
[0013]优选地，所述对所述壳聚糖进行预处理至中性，包括：
[0014]将所述壳聚糖与碱溶液混合，再用水洗涤至中性，即得到所述预处理后的壳聚糖；
[0015]优选地，所述碱溶液为氢氧化钠的水溶液；优选地，所述碱溶液的浓度为0.1％
‑
10％；
[0016]优选地，所述壳聚糖与碱溶液混合的时间不少于5小时。
[0017]优选地，所述向调节pH后的尿液原料中加入所述预处理后的壳聚糖进行吸附，得到吸附混合料，包括：
[0018]根据所述尿液原料的量，加入符合(1kg
‑
4kg):1000L比例的所述预处理后的壳聚糖；
[0019]混合后，调节pH维持在4.0
‑
7.0范围内，混合0.5小时
‑
5小时，即得到所述吸附混合料；
[0020]优选地，混合时间为50
‑
70分钟。
[0021]优选地，所述利用洗脱液对所述吸附壳聚糖进行洗脱，得到第二滤液，包括：于所述吸附壳聚糖中加入所述洗脱液；其中，所述洗脱液的加入量为每吸附1000L的所述尿液原料的壳聚糖对应加入5L
‑
30L的所述洗脱液；加入所述洗脱液后，混合0.5小时
‑
10小时；固液分离，得到所述第二滤液；
[0022]优选地，所述洗脱液为硫酸铵水溶液；所述洗脱液的波美度为14
‑
15，所述洗脱液的pH为7.5
‑
8.5，优选为7.8
‑
7.9。
[0023]优选地，所述将所述第二滤液加入硫酸铵得到沉淀溶液，对所述沉淀溶液固液分离后取固体不溶物，即得到所述乌司他丁，包括：取所述第二滤液，加入硫酸铵至波美度达到25
‑
30，优选为27
‑
28，得到所述沉淀溶液；对所述沉淀溶液固液分离后取固体不溶物，即得到所述乌司他丁；
[0024]优选地，所述取所述第二滤液，加入硫酸铵至波美度达到27
‑
28，得到所述沉淀溶液之后，还包括：于所述沉淀溶液中加入助滤剂并混合；优选地，所述助滤剂包括硅藻土；
[0025]优选地，所述硅藻土依据每100L尿液原料加入4g
‑
5g所述硅藻土的比例进行添加；
[0026]优选地，固液分离后，还包括对所述固体不溶物干燥4小时
‑
5小时。
[0027]优选地，所述将所述第一滤液通过高岭土进行吸附，并用氨水溶液洗脱，即得到所述尿促性素，包括：对所述第一滤液用冰醋酸调节pH至4
‑
5，得到酸化尿液；在所述酸化尿液中加入0.1％
‑
1％ W/V的高岭土，混合0.5小时
‑
5小时，优选为0.5
‑
1.5小时；固液分离并将所得固体不溶物转移至氨水溶液中洗脱，固液分离后取上清液；用冰醋酸将所述上清液pH调节至4
‑
5，固液分离去除固体杂质；去除固体杂质后，在所得滤液中加入乙醇，固液分离收集固体，即得到所述尿促性素；和/或，所述固液分离并将所得固体不溶物转移至氨水溶液中洗脱之前，还包括：加入0.01％
‑
1％的硅藻土。
[0028]优选地，所述将所得固体不溶物转移至氨水溶液中洗脱之前，还包括：
[0029]用pH4
‑
5的醋酸水溶液洗涤所述固体不溶物。
[0030]优选地，所述去除固体杂质后，在所得滤液中加入乙醇，固液分离收集固体，即得到所述尿促性素，包括：
[0031]加入至少3倍量W/V的乙醇混合本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种乌司他丁和尿促性素联合提取方法，其特征在于，包括：收集绝经女性的尿液，作为尿液原料；通过壳聚糖对所述尿液原料进行吸附，固液分离后得到吸附壳聚糖和第一滤液；利用洗脱液对所述吸附壳聚糖进行洗脱，得到第二滤液；将所述第二滤液加入硫酸铵得到沉淀溶液，对所述沉淀溶液固液分离后取固体不溶物，得到所述乌司他丁；将所述第一滤液通过高岭土进行吸附，并用氨水溶液洗脱，即得到所述尿促性素。2.如权利要求1所述乌司他丁和尿促性素联合提取方法，其特征在于，所述通过壳聚糖对所述尿液原料进行吸附步骤中，加入的所述壳聚糖与所述尿液原料的比例为：(1kg
‑
4kg):1000L。3.如权利要求1所述乌司他丁和尿促性素联合提取方法，其特征在于，所述尿液原料在通过所述壳聚糖进行吸附时，所述尿液原料的pH为4.0
‑
7.0。4.如权利要求1所述乌司他丁和尿促性素联合提取方法，其特征在于，所述通过壳聚糖对所述尿液原料进行吸附，固液分离后得到吸附壳聚糖和第一滤液，包括：对所述壳聚糖进行预处理至中性，得到预处理后的壳聚糖；将所述尿液原料调节pH至4.0
‑
7.0；根据(1kg
‑
4kg):1000L的比例，向调节pH后的尿液原料中加入所述预处理后的壳聚糖进行吸附，得到吸附混合料；对所述吸附混合料固液分离，分别得到所述吸附壳聚糖和所述第一滤液。5.如权利要求4所述乌司他丁和尿促性素联合提取方法，其特征在于，所述对所述壳聚糖进行预处理至中性，包括：将所述壳聚糖与碱溶液混合，再用水洗涤至中性，即得到所述预处理后的壳聚糖；优选地，所述碱溶液为氢氧化钠的水溶液；优选地，所述碱溶液的浓度为0.1％
‑
10％；优选地，所述壳聚糖与碱溶液混合的时间不少于5小时。6.如权利要求4所述乌司他丁和尿促性素联合提取方法，其特征在于，所述向调节pH后的尿液原料中加入所述预处理后的壳聚糖进行吸附，得到吸附混合料，包括：根据所述尿液原料的量，加入符合(1kg
‑
4kg):1000L比例的所述预处理后的壳聚糖；混合后，调节pH维持在4.0
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7.0范围内，混合0.5小时
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5小时即得到所述吸附混合料；优选地，混合时间为50
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70分钟。7.如权利要求1所述乌司他丁和尿促性素联合提取方法，其特征在于，所述利用洗脱液对所述吸附壳聚糖进行洗脱，得到第二滤液，包括：于所述吸附壳聚糖中加入所述洗脱液；其中，所述洗脱液的加入量为每吸附100...

【专利技术属性】
技术研发人员：常路路，高波，董瑞琦，万龙岩，
申请(专利权)人：上海丽珠制药有限公司，
类型：发明
国别省市：