促甲状腺素释放激素的制备方法及应用技术

本发明专利技术提供了一种促甲状腺素释放激素的制备方法及应用，涉及多肽药物制备技术领域，本发明专利技术提供的促甲状腺素释放激素的制备方法，在制备Z

【技术实现步骤摘要】
促甲状腺素释放激素的制备方法及应用


[0001]本专利技术涉及多肽药物制备
，尤其是涉及一种促甲状腺素释放激素的制备方法及应用。

技术介绍

[0002]促甲状腺素释放激素(thyrotropin releasing hormone)，一种肽类激素，其化学结构式为pGLU-His-Pro-NH2。由下丘脑室旁核内的一些神经细胞合成、分泌。经垂体门脉系统输送至腺垂体。由焦谷氨酸、组氨酸和脯氨酰胺组成。促甲状腺素释放激素能够促使腺垂体分泌促甲状腺激素(TSH)，并通过TSH影响甲状腺的分泌。此外，促甲状腺素释放激素还具有促进生乳素、催产素和辊压素的分泌，以及影响大脑的机能，如抗抑郁、改变睡眠觉醒和行为的生理功能。因此，作为药物，促甲状腺素释放激素的需求量日益增加。
[0003]张家瑾等(张家瑾，张绍东，盛树力.促甲状腺素释放激素合成法的改进[J].首都医学院学报，1990(04):276-278.)提供的促甲状腺素释放激素合成法的改进包括依次制备Z-pGlu-ONB、Z-pGlu-His-OH、H-Pro-OCH3→
H-Pro-NH2、Z-pGlu-His-Pro-NH2和氢解制备pGlu-His-Pro-NH2。其在制备Z-pGlu-His-Pro-NH2的工序中，需要两次乙醚沉淀，重结晶，需72小时以上，耗时较长。且乙醚使用量大(得产物3.22克需1.5L乙醚)，乙醚闪点为-40℃，对操作环境温度、通风设施、厂房防爆要求高。产业化安全隐患极大。
[0004]一种促甲状腺素释放激素及其可药用盐的制备方法(申请号CN201010137327.5)包括制备Z-pGlu-His-Pro-NH2和氢解制备pGlu-His-Pro-NH2，在制备Z-pGlu-His-Pro-NH2的工序中涉及两次乙醚沉淀，重结晶，耗时较长。乙醚使用量大(得产物12.6克需约4L乙醚)，且对沉淀物溶解时，采用加热进行助溶，溶解液闪点低(优选的乙醇闪点13℃、异丙醇闪点为12℃)乙醚闪点为-40℃，异丙醚为-28℃。对操作环境温度、通风设施、厂房防爆要求极高。产业化采用加热方式进行溶解，再倒入低闪点的乙醚等溶剂中沉淀。安全隐患极大，不可行。
[0005]由此可知，现有的促甲状腺素释放激素制备工艺，均采用两次乙醚沉淀，重结晶，耗时较长。且使用大量的低闪点的乙醚。安全隐患极大，难以实现工业化生产。因此，如何能够安全、高效地实现促甲状腺素释放激素的合成制备，成为亟待解决的问题。
[0006]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0007]本专利技术的主要目的在于提供一种促甲状腺素释放激素的制备方法，以至少缓解现有技术中存在的技术问题之一。
[0008]本专利技术提供了一种促甲状腺素释放激素的制备方法，所述制备方法依次包括制备Z-pGlu-ONB、制备Z-pGlu-His-OH、制备Z-pGlu-His-Pro-NH2和氢解Z-pGlu-His-Pro-NH2，得到所述促甲状腺素释放激素；
[0009]其中，制备Z-pGlu-His-Pro-NH2的步骤包括：
[0010]向Z-pGlu-His-OH和Pro-NH的混合溶液中加入活化剂反应后浓缩至干，浓缩产物加乙腈溶解后结晶析出，得到所述Z-pGlu-His-Pro-NH2。
[0011]进一步的，将Pro-NH的DMF溶液加入Z-pGlu-His-OH的DMF溶液中，得到所述Z-pGlu-His-OH和Pro-NH的混合溶液；
[0012]优选地，所述活化剂包括HONB和DCCI，优选在所述Z-pGlu-His-OH和Pro-NH的混合溶液中先加入HONB，然后在搅拌下滴加DCCI；
[0013]优选地，加入活化剂反应的温度为10～30℃，反应的时间为8～24小时；
[0014]优选地，在加入活化剂前还包括冷却的步骤，所述冷却的温度为-2～2℃，优选为0℃；
[0015]优选地，在浓缩前还包括过滤的步骤。
[0016]进一步的，所述浓缩包括减压浓缩，优选压力为-0.09～-0.1MPa；
[0017]优选地，加乙腈溶解后置于2～10℃至结晶析出；
[0018]优选地，结晶析出后还包括过滤的步骤；
[0019]优选地，将分离出的结晶进行干燥处理，得到Z-pGlu-His-Pro-NH2；
[0020]优选地，干燥前还包括将析出的结晶使用乙腈进行清洗的步骤。
[0021]进一步的，所述制备Z-pGlu-ONB的步骤包括：
[0022]取Z-pGlu和HONB，加入二氧六环和四氢呋喃，进行活化酯反应，将反应产物以乙酸乙酯溶解后，再依次使用KHCO3溶液和NaCl溶液清洗，有机相使用无水Na2SO4干燥，过滤后滤液减压蒸干后加入石油醚重结晶，得到所述Z-pGlu-ONB；
[0023]优选地，使用8％～10％的KHCO3溶液和5％～10％的NaCl溶液清洗，优选使用10％的KHCO3溶液和10％的NaCl溶液；
[0024]优选地，所述清洗的次数至少为三次；
[0025]优选地，所述干燥的时间为8～24小时。
[0026]进一步的，取Z-pGlu和HONB加入二氧六环和四氢呋喃混合溶解后在0～5℃条件下加入活化剂进行活化酯反应，反应后过滤，固体用四氢呋喃清洗，将清洗液合并滤液减压浓缩至干，得到反应产物；
[0027]优选地，所述活化剂包括DCCI；
[0028]优选地，所述活化酯反应的时间为3～5小时，温度为2～10℃。
[0029]进一步的，所述制备Z-pGlu-His-OH的步骤包括：
[0030]将Z-pGlu-ONB的乙腈溶液与L-His-OK的水溶液混合后搅拌，TLC监控Z-pLGlu-ONB点消失后减压浓缩，在0～5℃条件下调节pH至5.5～6.5然后静置8～24小时后过滤，固体去除Cl-及His后干燥，得到所述Z-pGlu-His-OH。
[0031]进一步的，所述搅拌的温度为25～35℃，时间为20～25小时；
[0032]优选地，所述减压浓缩的压力为-0.09～-0.1MPa，温度为35～45℃；
[0033]优选地，使用1.5～2.5mol/L的HCl调节pH；
[0034]优选地，所述静置的温度为2～10℃；
[0035]优选地，通过冰纯化水洗涤去除Cl-及His。
[0036]进一步的，所述氢解Z-pGlu-His-Pro-NH2的步骤包括：
[0037]向Z-pGlu-His-Pro-NH2的溶液中通H2，用TLC检测至反应完全后过滤，减压浓缩至
干，得到所述促甲状腺素释放激素；
[0038]优选地，向Z-pGlu-His-Pro-NH2的溶液中加入钯炭后再通H2；
[0039]优选地，所述Z-pGlu-His-Pro-NH2的溶液温度为25～35℃；
[0040]优选地，所述H2通入的时间为20本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种促甲状腺素释放激素的制备方法，其特征在于，所述制备方法依次包括制备Z-pGlu-ONB、制备Z-pGlu-His-OH、制备Z-pGlu-His-Pro-NH2和氢解Z-pGlu-His-Pro-NH2，得到所述促甲状腺素释放激素；其中，制备Z-pGlu-His-Pro-NH2的步骤包括：向Z-pGlu-His-OH和Pro-NH的混合溶液中加入活化剂反应后浓缩至干，浓缩产物加乙腈溶解后结晶析出，得到所述Z-pGlu-His-Pro-NH2。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，将Pro-NH的DMF溶液加入Z-pGlu-His-OH的DMF溶液中，得到所述Z-pGlu-His-OH和Pro-NH的混合溶液；优选地，所述活化剂包括HONB和DCCI，优选在所述Z-pGlu-His-OH和Pro-NH的混合溶液中先加入HONB，然后在搅拌下滴加DCCI；优选地，加入活化剂反应的温度为10～30℃，反应的时间为8～24小时；优选地，在加入活化剂前还包括冷却的步骤，所述冷却的温度为-2～2℃，优选为0℃；优选地，在浓缩前还包括过滤的步骤。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述浓缩包括减压浓缩，优选压力为-0.09～-0.1MPa；优选地，加乙腈溶解后置于2～10℃至结晶析出；优选地，结晶析出后还包括过滤的步骤；优选地，将分离出的结晶进行干燥处理，得到Z-pGlu-His-Pro-NH2；优选地，干燥前还包括将析出的结晶使用乙腈进行清洗的步骤。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述制备Z-pGlu-ONB的步骤包括：取Z-pGlu和HONB，加入二氧六环和四氢呋喃，进行活化酯反应，将反应产物以乙酸乙酯溶解后，再依次使用KHCO3溶液和NaCl溶液清洗，有机相使用无水Na2SO4干燥，过滤后滤液减压蒸干后加入石油醚重结晶，得到所述Z-pGlu-ONB；优选地，使用8％～10％的KHCO3溶液和5％～10％的NaCl溶液清洗，优选使用10％的KHCO3溶液和10％的NaCl溶液；优选地，所述干燥的时间为8～24小时。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，取Z-pGlu和HONB...

【专利技术属性】
技术研发人员：王林鹏，安宁，张嫣，万龙岩，
申请(专利权)人：上海丽珠制药有限公司，
类型：发明
国别省市：