一种硝基还原酶响应氨基酸及肿瘤乏氧荧光探针的制备方法技术

一种硝基还原酶响应氨基酸及肿瘤乏氧荧光探针的制备方法。基于光延反应，合成了具有硝基还原酶(NTR)响应性的2

【技术实现步骤摘要】
一种硝基还原酶响应氨基酸及肿瘤乏氧荧光探针的制备方法


[0001]本专利技术涉及非天然氨基酸调控多肽组装及多肽纳米探针
，具体涉及一种可用于多肽可控组装的硝基还原酶响应氨基酸与荧光探针的制备及性能表征方法。
技术背景
[0002]多肽纳米组装体的结构特征与多肽序列之间有着密切关系。这也激发了基于刺激响应的天然或非天然氨基酸的各种多肽可控组装系统的建立。利用生物相容性刺激调控多肽组装体的纳米结构已被证明是一种制备先进功能生物材料的有效策略，在疾病诊断和治疗方面具有巨大的潜力。在生物相容性刺激物中，硝基还原酶(NTR)是一种含有黄素的酶，通常在实体瘤的乏氧区域过度表达，能够利用辅酶NAD(P)H作为电子源将硝基还原为氨基。目前为止，许多NTR响应的水凝胶，成像探针和可激活的前药递送载体已经被设计合成，并表现出广泛的生物医学应用。尽管如此，通过NTR响应的氨基酸来调控多肽组装的有效策略仍然很少，限制了多肽材料在肿瘤乏氧区域的应用。
[0003]在NTR响应基团中，2
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硝基咪唑的疏水性硝基官能团能够在乏氧条件下被NTR本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种硝基还原酶响应氨基酸及肿瘤乏氧荧光探针的制备方法，所述探针包括：多肽序列Fmoc
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A(2NI)VE基元和含有荧光染料具有荧光成像功能的多肽组装基元IR780
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A(2NI)VE；制备方法包括如下步骤：S1：设计合成具有NTR还原性的2
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硝基咪唑修饰的丙氨酸非天然氨基酸(Fmoc
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A(2NI))；基于光延反应，在无水四氢呋喃溶剂里，偶氮二甲酸二异丙酯(DIAD)和三苯基膦(TPP)存在时，2
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硝基咪唑与三苯甲基保护的丝氨酸甲酯(Trt
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L
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Ser
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OMe)反应生成Trt
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A(2NI)
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OMe；随后用三氟乙酸(TFA)和氢氧化锂(LiOH)处理相应的中间体以去除三苯甲基并水解甲基酯基团；随后，最终对A(2NI)的氨基进行芴甲氧羰基(Fmoc)保护，生成Fmoc
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A(2NI)，用于标准Fmoc固相多肽合成(SPPS)；S2：在非天然氨基酸Fmoc
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A(2NI)的基础上进行多肽序列固相合成；多肽序列的合成是通过标准Fmoc固相多肽合成(SPPS)方法合成，以哌啶作为脱保护剂，苯并三氮唑
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N,N,N',N'
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四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)为缩合剂，合成了多肽组装基元芴甲氧羰基
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丙氨酸(2
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硝基咪唑)
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缬氨酸
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谷氨酸(Fmoc
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A(2NI)VE)多肽分子，分别考察了它的NTR响应性以及酶还原前后的组装形貌变化；S3：在合成的具有NTR还原性及形貌转变的多肽分子Fmoc
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A(2NI)VE的基础上，通过硫醇亲核取代反应将IR780近红外荧光分子共价连接到A(2NI)VE三肽上得到含有染料分子具有荧光成像功能的多肽组装基元IR780
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丙氨酸(2
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硝基咪唑)
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缬氨酸
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谷氨酸(IR780
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A(2NI)VE)；S4：以多肽序列Fmoc
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A(2NI)VE作为自组装基元，将IR780
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【专利技术属性】
技术研发人员：余志林，胡彬彬，曹亚伟，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：