齐墩果酸型皂苷类化合物及其组合物制造技术

本发明专利技术公开了齐墩果酸型皂苷类化合物其结构如下述式(I)：

Oleanolic acid saponins and their compositions

The invention discloses the structure of oleanolic acid saponins, such as the following formula (I):

【技术实现步骤摘要】
齐墩果酸型皂苷类化合物及其组合物
本专利技术具体涉及一种齐墩果酸型皂苷类化合物及其组合物。
技术介绍
从传统中药和天然产物中寻找抗肿瘤、抗炎等药物是一种行之有效的方法。齐墩果酸及其苷类属于五环三萜类天然产物，广泛分布于女贞子、败酱、白头翁等植物药中，具有消炎、抗肿瘤、抗高血脂等多方面的药理作用，齐墩果酸已用于治疗急性化学性肝损伤、慢性肝硬化和肝纤维化。近年来，大量文献报道从常春藤、黄花败酱、白头翁等植物药中分离得到齐墩果酸型皂苷，该类成分具有较好的抗炎作用，并发现C-28位羧基游离的β-常春藤皂苷等化合物显示出较好的体内外抗肿瘤活性。后续深入研究发现，该类成分口服时具有强烈的胃肠道刺激性副作用，口服生物利用度低于5％，成为开发应用的瓶颈问题。种类繁多的肠道菌群在人体肠道内构成一个微生态系统，参与食物中营养和功能成分的代谢。肠道菌群与宿主一同进化，直接参与和影响机体的营养吸收、生长发育、免疫调节等诸多健康与疾病进程，成为近年国际研究热点。本专利技术受此启发，根据前药设计策略和仿生原理，以β-常春藤皂苷和相关天然产物为先导化合物，设计对其C-3糖链结构、C-28位羧基分别进行糖基结构修饰，研究齐墩果酸型皂苷的抗肿瘤构效关系。对合成的化合物进行体外细胞毒性和溶血性测试，发现该类成分均不同程度保留了一定抗肿瘤活性，C-28位糖酯取代基同时可显著降低溶血性毒副作用。采用体外模拟消化道代谢过程分析，结果表明该类成分在人工胃液、肠液中不易代谢；特别地，研究中意外发现，C-28位糖基的种类对肠道菌群代谢产物有显著影响，只有葡萄糖基取代时才可代谢为相应C-28位羧基型皂苷。经进一步深入研究，从而完成了本专利技术。
技术实现思路
本专利技术目的是提供齐墩果酸型皂苷类化合物其组合物，根据前药设计策略和仿生原理，以β-常春藤皂苷和相关天然产物为先导化合物，设计对其C-3糖链结构、C-28位羧基分别进行糖基结构修饰，解决其胃肠道刺激性副作用大、口服生物利用率低的问题。本专利技术的一种技术方案是：一种齐墩果酸型皂苷类化合物，其结构如下述式(I)：其中，R1：-H或者-OH；R2：α-OR3或者β-OR3；R3：-H或者单糖基中的1-2个。进一步的，所述单糖基为葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、木糖、鼠李糖、呋糖或芹糖基。进一步的，所述R1为-H，R2为β-OR3。进一步的，所述R1为-H，R2为α-OR3。进一步的，所述R1为-OH，R2为β-OR3。本专利技术的另一种技术方案是：一种口服药用组合物，其中含有治疗有效量的权利要求1-5中任意一项所述的齐墩果酸型皂苷类化合物和药学上可接受的载体。进一步的，所述口服药用组合物在制备治疗炎症或者肿瘤的药物中的应用。进一步的，所述炎症为结肠炎。进一步的，所述药用组合物在肠道中代谢为28-羧基的相应化合物。本专利技术优点是：28-葡萄糖取代的齐墩果酸型双糖链皂苷一方面自身具有抗炎作用、无明显溶血性和胃肠道刺激性，另一方面还同时可以被肠道菌群代谢为28-齐墩果酸型皂苷，可以作为其前药使用，避免28-齐墩果酸型皂苷作为药物使用时的胃肠道副作用、相对口服生物利用度更高。具体实施方式该类成分可采用天然成分齐墩果酸(R1选自-H)或常春藤皂苷元(R1选自-OH)为起始原料，与相应的糖基供体经化学方法合成，详见实施例1。同时也可从植物中分离纯化获得，例如常春藤、白头翁、黄花败酱、黑种草子、银莲花等。所述化合物的制备方法可从已公开文献中获得。本专利技术同时对所述齐墩果酸衍生物及其组合物进行了抗炎、抗肿瘤、溶血性等活性筛选、肠道菌群代谢分析。研究结果：(1)二甲苯致小鼠急性耳肿胀试验结果表明，化合物灌药给药(100mg/kg)具有较强的抗炎作用；(2)体外抗肿瘤和溶血试验结果表明，化合物对人肝癌HepG-2等细胞株具有一定的抗肿瘤作用，但28-齐墩果酸型化合物同时也具有溶血作用，相应的28-糖酯溶血作用消失；(3)肠道菌群代谢分析实验结果表明，齐墩果酸皂苷的相应28-糖酯型化合物，具有不同的代谢途径，其中只有葡萄糖酯型的衍生物可以显著转化为相应齐墩果酸皂苷，从而可以在结肠部位经肠道菌群代谢为活性更好的原形齐墩果酸皂苷，发挥其抗肿瘤作用。结果表明，所述齐墩果酸衍生物组合物均具有较好的抗炎活性，可以根据使用需要应用于不同的功能食品和药品中。为使本专利技术的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面实施例进一步说明本专利技术的技术方案。但是本专利技术不限于所列出的实施例，还应包括在本专利技术所要求的权利范围内其他任何公知的改变。首先，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本专利技术至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。另外，本
技术实现思路
是通过大量创造性实验研究完成的，以下述具体实施例进行说明。实施例1：齐墩果酸皂苷S1-S4的制备参考本专利技术文献报道方法进行制备：LimingWang,etal.Synthesisandcytotoxicityofoleanolicacidtrisaccharidesaponins.CarbohydrateResearch,2017,442:9-16.分别将L-阿拉伯糖、L-鼠李糖(L-rhamnose,L-Rha)和D-葡萄糖(D-glucose,D-Glc)溶解在吡啶中，冰浴下滴加苯甲酰氯，然后升至室温，过夜反应即可获得全苯甲酰基保护的单糖。用33％氢溴酸(乙酸溶液)在室温下与全苯甲酰基糖反应，即可获得1-溴代糖基供体化合物(10a、10b、10c)。(S1)3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖基齐墩果酸将化合物3-O-[2″,3″,4″-三苯甲酰基-α-L-鼠李糖基(1→2)-3′,4′-二乙酰基]-α-L-阿拉伯糖基齐墩果酸(18)(200mg,0.181mmol)溶于CH2Cl2-MeOH(v/v，1:1,30mL)中，加入甲醇钠，室温反应4h，加入H+型阳离子交换树脂中和至中性，过滤，滤液旋干，经硅胶柱(氯仿-甲醇，6:1)纯化，得到白色粉末，化合物1(113mg,85％)。Rf＝0.32(6:1,CHCl3-MeOH).[α]＝+3.05(c0.96,CH3OH)；ESI-MS(m/z):757.4[M+Na]+。(S2)3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖基齐墩果酸-28-O-D-吡喃葡萄糖苷将化合物18(200mg,0.181mmol)和碳酸钾(100mg)溶于丙酮中(30mL)，室温下搅拌30min，然后加入10c(140mg,0.213mmol),加热回流8h。旋干去除丙酮，加入二氯甲烷(30mL)复溶，用蒸馏水(20mL×3)萃取除盐，二氯甲烷层用无水Na2SO4干燥，抽滤，旋干二氯甲烷，加入CH2Cl2-MeOH(v/v,1:1,30mL)，加入甲醇钠(90mg)，室温下反应4h。加入H+型阳离子交换树脂中和至中性，过滤，滤液旋干，经硅胶柱(氯仿-甲醇，3:1)纯化，得到白色粉末。进一步用C18反相硅胶柱纯化，收集50％-60％(甲醇-水，v/v)洗脱部分，旋干得到化合物4(120mg，74％)。Rf＝0.33(氯仿-甲醇本文档来自技高网...

【技术保护点】
齐墩果酸型皂苷类化合物，其结构如下述式(I)：

【技术特征摘要】
1.齐墩果酸型皂苷类化合物，其结构如下述式(I)：其中，R1：-H或者-OH；R2：α-OR3或者β-OR3；R3：-H或者单糖基中的1-2个。2.根据权利要求1所述的齐墩果酸型皂苷类化合物，其特征在于：所述单糖基为葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、木糖、鼠李糖、呋糖或芹糖基。3.根据权利要求1所述的齐墩果酸型皂苷类化合物，其特征在于：所述R1为-H，R2为β-OR3。4.根据权利要求1所述的齐墩果酸型皂苷类化合物，其特征在于：所述R1为-H，R2为α-OR3。...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘江云，李雅丽，王黎明，高亮，王增尚，苏胜，郝丽莉，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32