凝结芽孢杆菌制剂及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种微生态制剂及其应用，具体涉及主要活性成分包含凝结芽孢杆菌的微生态制剂，及该制剂在预防或治疗相关疾病中的应用。

Bacillus COAGULAN preparation and its application

The invention relates to a microecological preparation and its application, in particular to a microecological preparation containing main active ingredients, including Bacillus coagulis, and the application of the preparation in preventing or treating related diseases.

【技术实现步骤摘要】
凝结芽孢杆菌制剂及其应用
本专利技术涉及一种微生态制剂及其应用，具体涉及主要活性成分包含凝结芽孢杆菌的微生态制剂，及该制剂在预防或治疗相关疾病中的应用。
技术介绍
凝结芽孢杆菌具有耐高温、耐酸和耐胆盐等特点，能够改善肠道菌群结构，调节肠道功能紊乱和维持肠道内菌群平衡，有效促进营养物质代谢和利用，在预防和治疗疾病方面发挥越来越重要的作用。目前，凝结芽孢杆菌已通过卫计委审查成为新的可用于食品的益生菌种，凝结芽孢杆菌制剂研究成为新的热点。筛选出具有高活性、显著益生作用的凝结芽孢杆菌菌株是益生菌制剂研发的重点和难点。本专利技术人经过研究发现，凝结芽孢杆菌DH156具有高的生物活性，主要活性成分包含凝结芽孢杆菌DH156的微生态制剂可以有效调节机体微生态平衡，预防或治疗相关疾病，安全没有任何毒副作用，具有巨大的经济价值和社会价值，且未见相关研究报道，特申请此专利技术专利。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种微生态制剂，该制剂的主要活性成分包含凝结芽孢杆菌DH156，保藏编号CGMCCNo.13136，并提供该制剂在预防或治疗相关疾病中的应用。本专利技术的微生态制剂的制备优选是通过下述步骤实施的，但不局限于此制备工艺，公知的能实现的制备工艺均可以：采取可能含凝结芽孢杆菌的样品，然后将样品置于灭菌瓶内，研究时从中取一定量的样品加入18mL灭菌的稀释液中，充分混匀，在无菌操作台内，进行10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7梯度稀释，取10-5、10-6、10-7三个稀释梯度，分别涂布于凝结芽孢杆菌选择性单菌落分离固体培养基上，置于培养箱，37℃下培养48小时，选择长势良好的单菌落分别接种于液体扩增培养基中，置于培养箱内，37℃下扩增培养48小时。将所得培养液离心(12000rpm)分离出菌体后，将菌体冷冻真空干燥，调制出干燥菌粉，然后根据《伯杰细菌鉴定手册》、相关细菌鉴定文献或16SrRNA序列对比分析进行凝结芽孢杆菌鉴定和毒性试验，将无毒性的凝结芽孢杆菌干燥菌粉按需要比例添加辅料制成片剂、胶囊、散剂、粉剂或液体制剂等各种剂型，也可加入双歧杆菌、乳酸杆菌等活菌或低聚果糖、低聚木糖等低聚糖起到协同作用。研究表明，低聚果糖、低聚木糖等低聚糖可显著促进凝结芽孢杆菌DH156增殖，协助凝结芽孢杆菌DH156更好的发挥益生作用。凝结芽孢杆菌选择性单菌落分离固体培养基优选但不局限于：纯化水1000mL，蛋白胨10g，牛肉浸取物10g，柠檬酸二铵2g，乙酸钠5g，酵母粉5g，葡萄糖5g，磷酸二氢钾2g，吐温801.0ml，碳酸钙20g，硫酸镁0.58g，硫酸锰0.25g，琼脂15g，调pH6.2-6.5，115℃高压灭菌20min。凝结芽孢杆菌液体扩增培养基优选但不局限于：纯化水1000mL，蛋白胨10g，牛肉浸取物3g，氯化钠5g，葡萄糖5g，调pH7，115℃高压灭菌20min。为进一步具体说明本专利技术，专利技术人利用上述方法通过凝结芽孢杆菌选择性单菌落分离固体培养基分离鉴定出了无毒性的凝结芽孢杆菌，优选DH156菌株，保藏编号CGMCCNo.13136。本专利技术实施说明中优选使用的凝结芽孢杆菌的细菌学性质：1、菌落形态显微镜观察：杆状，革兰氏染色阳性。平板形态：菌落呈白色、圆形、边缘整齐、大小2-3mm。2、生理生化鉴定明胶液化：－；过氧化氢酶：+；VP试验：+；苯丙氨酸脱氨酶试验－。3、糖酵解实验鉴定葡萄糖：+；麦芽糖：+；蔗糖：+；木糖：－；果糖：+；鼠李糖：－；乳糖：+；菊粉：+；半乳糖：+；糊精：+。4、分离的菌进行16SrRNA基因测序，测得序列用BLAST与GenBank和RDP数据库中的基因序列进行相似性分析，确定分离的菌为凝结芽孢杆菌Bacilluscoagulans。本专利技术所述凝结芽孢杆菌DH156经鉴定为凝结芽孢杆菌Bacilluscoagulans，凝结芽孢杆菌具有的调节机体微生态平衡及益生作用本菌株均具备，包括但不限于抗炎、抗过敏、抗疲劳、提高免疫力、促进消化、促进营养物质吸收、调节精神、养颜美容、保肝、养胃、清肺、提高记忆力和注意力、减肥、营养保健或促进生长发育，或预防或治疗消化系统疾病、营养吸收障碍性疾病、呼吸系统疾病、精神系统疾病、变态反应性疾病、自身免疫性疾病、代谢系统疾病、心脑血管疾病、肿瘤或重金属中毒，或预防或治疗由这些疾病引发的其他疾病等。其中所述消化系统疾病包括但不限于腹泻、便秘、腹胀、消化不良、肠易激综合征、溃疡性结肠炎、克罗恩病、伪膜性肠炎、坏死性小肠结肠炎、肠癌、肿瘤放化疗辅助治疗、幽门螺杆菌感染、肝胆疾病、黄疸、口腔溃疡、鹅口疮、手足口病、喂养不耐受或促进小儿肠道发育成熟；所述呼吸系统疾病包括但不限于反复呼吸道感染、慢阻肺或支气管哮喘；所述精神系统疾病包括但不限于焦虑症、抑郁症、自闭症或帕金森；所述变态反应性疾病包括但不限于风湿性关节炎或湿疹；所述自身免疫性疾病包括但不限于类风湿性关节炎或强直性脊柱炎；所述代谢系统疾病包括但不限于糖尿病或痛风；所述心脑血管疾病包括但不限于高血脂症。进一步的，所述腹泻包括但不限于冷凉泻、喝酒泻、抗生素相关性腹泻、小儿肺炎继发性腹泻或病毒性腹泻。本专利技术的微生态制剂可有效预防或治疗相关疾病，包括但不限于抗炎、抗过敏、抗疲劳、提高免疫力、促进消化、促进营养物质吸收、调节精神、养颜美容、保肝、养胃、清肺、提高记忆力和注意力、减肥、营养保健或促进生长发育，或预防或治疗消化系统疾病、营养吸收障碍性疾病、呼吸系统疾病、精神系统疾病、变态反应性疾病、自身免疫性疾病、代谢系统疾病、心脑血管疾病、肿瘤或重金属中毒，或预防或治疗由这些疾病引发的其他疾病等。其中所述消化系统疾病包括但不限于腹泻、便秘、腹胀、消化不良、肠易激综合征、溃疡性结肠炎、克罗恩病、伪膜性肠炎、坏死性小肠结肠炎、肠癌、肿瘤放化疗辅助治疗、幽门螺杆菌感染、肝胆疾病、黄疸、口腔溃疡、鹅口疮、手足口病、喂养不耐受或促进小儿肠道发育成熟；所述呼吸系统疾病包括但不限于反复呼吸道感染、慢阻肺或支气管哮喘；所述精神系统疾病包括但不限于焦虑症、抑郁症、自闭症或帕金森；所述变态反应性疾病包括但不限于风湿性关节炎或湿疹；所述自身免疫性疾病包括但不限于类风湿性关节炎或强直性脊柱炎；所述代谢系统疾病包括但不限于糖尿病或痛风；所述心脑血管疾病包括但不限于高血脂症。进一步的，所述腹泻包括但不限于冷凉泻、喝酒泻、抗生素相关性腹泻、小儿肺炎继发性腹泻或病毒性腹泻。本专利技术的微生态制剂也可作为有效组成成分应用在相关组合物中用来预防或治疗上述疾病。本专利技术人经多次筛选和培育，分离得到一株凝结芽孢杆菌菌株DH156，该菌株较其他菌株具有更高的活性，更优异的调节机体微生态平衡能力和益生作用。如文中所用，“所述凝结芽孢杆菌”、“本专利技术所述凝结芽孢杆菌”或“本微生态制剂所述凝结芽孢杆菌”指凝结芽孢杆菌DH156菌株，保藏编号CGMCCNo.13136。应理解，这些术语还包括衍生自凝结芽孢杆菌DH156的菌株，尤其是具有高活性，或具有优异的调节机体微生态平衡能力和益生作用的衍生菌株。主要活性成分包含凝结芽孢杆菌DH156及其衍生菌株的微生态制剂均落入本专利技术的保护范围。本专利技术所述微生态制剂，主要活性成分包括但不限于凝结芽孢杆菌DH1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种微生态制剂，其特征在于该制剂主要活性成分包括凝结芽孢杆菌，所述凝结芽孢杆菌包括凝结芽孢杆菌DH156，保藏编号CGMCC No.13136。

【技术特征摘要】
1.一种微生态制剂，其特征在于该制剂主要活性成分包括凝结芽孢杆菌，所述凝结芽孢杆菌包括凝结芽孢杆菌DH156，保藏编号CGMCCNo.13136。2.按权利要求1所述的微生态制剂，其特征在于凝结芽孢杆菌指活的生物个体。3.按权利要求1所述的微生态制剂，其特征在于所述制剂包括药品组合物、保健品、食品、兽药或饲料添加剂。4.权利要求1所述的微生态制剂在制备抗炎、抗过敏、抗疲劳、提高免疫力、促进消化、促进营养物质吸收、调节精神、养颜美容、保肝、养胃、清肺、提高记忆力和注意力、减肥、营养保健或促进生长发育组合物中的应用。5.权利要求1所述的微生态制剂在预防或治疗消化系统疾病、营养吸收障碍性疾病、呼吸系统疾病、精神系统疾病、变态反应性疾病、自身免疫性疾病、代谢系统疾病、心脑血管疾病、肿瘤或重金属中毒中的应用。6.按权利要求1所述的微生态制剂，其特征在于凝结芽孢杆菌具有高的生物活性。7.按权利要求5所述应用，其特征在于所述消化系统疾病包括腹泻、便秘、腹胀、消化不良、肠易激综合征、溃疡性结肠炎、克罗恩病、伪膜性肠炎、坏死性小肠结肠炎、肠癌、肿瘤放化疗...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔云龙，赵婀姿，李洪福，
申请(专利权)人：青岛东海药业有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37