南美水仙组织培养的一组培养基及其标准化快繁方法技术

技术编号:1710708 阅读:252 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了南美水仙组织培养的一组培养基及其标准化快繁方法,属植物组织培养技术领域。本发明专利技术的南美水仙组织培养的一组培养基由诱导培养基、增殖培养基、继代增殖培养基、壮苗培养基、生根培养基组成。本发明专利技术公开的南美水仙组织培养的标准化快繁方法分七个步骤,构成南美水仙组织培养标准化体系。本发明专利技术完成了外植体的选取、诱导培养、增殖培养、壮苗、生根、移栽等关键技术的研究,重点通过“诱导”、“增殖”与“生根”三个关键环节的研究,使本发明专利技术优化的组织培养基及其标准化快繁方法针对性强,适用性好,操作简单易行,标准化程度高,使增殖率达4~5倍,生根率达90%以上,移栽成活率达95%以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属植物组织培养
,具体涉及南美水仙组织培养的一组培养基 配方和标准化快繁方法。
技术介绍
南美水仙(Eucharis grandiflora)别名大花油加律、亚马逊百合,属石蒜科 油加律属多年生常绿鳞茎植物。其株型姿态优雅,其叶片基生宽大,宽椭圆形,花朵硕大, 顶生伞形花序,着生5-7朵小花,洁白无瑕,清香四溢,且一年可多次开花,不开花时可作 观叶盆栽,既可点缀庭院,又可盆载布置室内,同时也是鲜切花的好材料,产业化应用前景 广阔,可作为新兴花卉产业化种类。南美水仙常规采用分球或播种2种传统方法进行繁殖,繁育速度慢,生产周期长,且整 齐度差,不能满足产业化生产的需求。因此利用组织培养快繁技术体系,不仅可在短时间内 获得大量整齐一致的优质种苗,实现种苗的标准化、工厂化与规模化生产,而且还可为脱毒 研究、新育株系快速扩繁及种质资源离体保存等工作的开展奠定良好的研究基础。目前国内 外在南美水仙优质种苗快速繁殖方面的研究比较欠缺,国内外均无南美水仙通过成熟组织培 养体系快速繁殖优质种苗的相关报道。仅瞿素萍等报道过"南美水仙组培外植体再生体系建 立中的关键技术研究"(《种子》2004年第10期16-17页),报道了通过对南美水仙不同外植 体类型对再生体系的影响研究,初步摸索出适宜的处植体类型。但该报道未公开本专利技术的内 容。
技术实现思路
本专利技术目的旨在提供一种针对性强,适用性好,操作简单易行,能实现种苗 的标准化控制、工厂化与规模化生产的南美水仙组织培养的一组培养基和标准化快繁方法。本专利技术建立起的组织培养体系还能应用于南美水仙种质资源的保存,在较小空间下实现 大量种质资源的离体保存。因此,本专利技术对于南美水仙的可持续利用及产业化、规模化和标 准化生产,以及种质资源保存等方面均具有积极作用和现实意义。本专利技术的技术方案如下1、 一组南美水仙组织培养的培养基,其特征在于,该组培养基由以下五个培养基组成(1)诱导培养基 MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 1.0 3.0 mg/L萘乙酸(NAA) 1.0 2.0 mg/L水解酷蛋白(CH) 200 300 mg/L蔗糖 25 35 g/L琼月旨 5.0~6.0 g/LpH 5.6 6.0(2)增殖培养基-MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 1.0 2.0mg/L萘乙酸(NAA) 0.2 1.0mg/L蔗糖 25 35 g/L琼脂 5.0 6.5 g/LpH 5.6 6.0 g/L(3)继代增殖培养基MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 1.0 2.0mg/L萘乙酸(NAA) 0.2 1.0 mg/L蔗糖 25 35 g/L琼月旨 5.0 6.5 g/LpH 5.6 6.0 g/L(4)壮苗培养基MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 0.5 1.0mg/L萘乙酸(NAA) 0.5 1.0mg/L蔗糖 20 25 g/L琼月旨 5.5 7.0g/LpH 5.6 6.0 g/L(5)生根培养基MS基本培养液吲哚乙酸(IAA) 0. 1 0. 5 mg/L萘乙酸(NAA) 0. 1 0. 5 mg/L蔗糖 20 25 g/L琼脂 5. 5 7. 0 g/LpH 5.6 6.0 g/L2、本专利技术提供另一组比较优选的南美水仙组织培养的培养基,其特征在于,所述的培养基由以下五个培养基组成 (1)诱导培养基 MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 2.0mg/L萘乙酸(NAA) 1.5mg/L水解酷蛋白(CH) 250mg/L蔗糖 ' 30g/L琼脂 5.5g/LpH 5.8(2) 增殖培养基MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 1.5mg/L 萘乙酸(NAA) 0.5mg/L 蔗糖 30g/L 琼脂 5.5g/L pH 5.8(3) 继代增殖培养基MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 1.5mg/L萘乙酸(NAA) 0.5mg/L蔗糖 30g/L琼脂 5.5g/LpH 5.8(4)壮苗培养基MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 0.8mg/L萘乙酸(NAA) 0.8mg/L蔗糖 20g/L琼脂 6.0g/L pH 5.8(5)生根培养基 MS基本培养液吲哚乙酸(IAA) 0.3mg/L萘乙酸(NAA) 0.3mg/L蔗糖 20g/L琼脂 6. Og/LpH 5.83、、本专利技术提供的一种南美水仙(Eucharis grandiflora)组织培养的标准化快繁方法,按以下次序的几个步骤进行(1)、外植体的选择与灭菌选择无病虫危害、生长健壮、无病毒症状表现、且种植2年 以上的南美水仙鳞茎,将其外层1 2层鳞片剥去后,用自来水冲洗干净后,按常规放入洗衣 粉水浸泡几分钟,自来水流水冲洗至无泡沫,在质量百分比为0.1 0.2。/。的升汞(Hgcl2)溶液 中处理15 25分钟,2°/。的次氯酸钠溶液中处理20 25分钟,无菌水洗3 4次后,将带鳞 片的鳞茎基盘进行切块接种;(2)、诱导培养在无菌条件下,将灭菌鳞茎切除约1/4 1/3的上部鳞片,获得带部分鳞片的鳞茎基盘,将上述获得的鳞茎基盘切块接种到下列诱导培养基中培养,在温度为22土 2°C,光照时间10 12h/d,光照强度2000~3000Lx的环境条件下,培养40~60 d,可见不定 芽或小鳞茎自切口处生成;MS基本培养液6-节基氨基嘌呤(6-BA)萘乙酸(NAA)水解酷蛋白(CH)蔗糖琼脂pH(3)、增殖培养在无菌条件下, 一丛,转入下列的增殖培养基中 MS基本培养液 6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 萘乙酸(NAA) 蔗糖 琼脂1.0 3.0 mg/L 1.0 2.0 mg/L 200 300 mg/L 25 35 g/L 5.0 6.0 g/L 5. 6 6.0将步骤(2)获得的不定丛生芽或小鳞茎切分成2 31.0 2.0 mg/L 0.2 1.0 mg/L 25 35 g/L 5.0 6.5 g/LpH 5.6 6.0 g/L在温度为25土2'C,光照时间10 12h/d,光照强度1500 2000Lx的条件下,培养30 45d,可使不定芽或鳞茎大量增殖,增殖率可达4 5倍;(4)、继代增殖将第(3)步骤增殖所获得的不定芽或小鳞茎在无菌条件下分切为单芽或 2 3个一丛,接入与第(3)步骤同样的增殖培养基中,在与第(3)步骤相同的培养环境下 进行培养,可得到大量的无根不定芽,增殖苗通常无叶或有叶1片,有叶片的叶色浓绿,生 长健壮;(5) 、壮苗培养将第(4)步骤增殖所获得的无叶不定芽或小鳞茎再进行重复继代, 获得大量繁殖材料;而将带叶片的不定芽分切为单芽或2芽一丛,转入下列的壮苗培养基中-MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA) 0.5 1.0mg/L 萘乙酸(NAA) 0.5 1.0mg/L 蔗糖 20 25 g/L琼脂 5.5 7.0g/L pH 5.6 6.0 g/L在温度为23士2。C,光照时间10 12小时/天,光照强度1500 2000Lx的条件下,培 养25 35d,可使不定芽的植株快速长高,株高达1.0 1.5cm, 1 2片叶,叶色浓绿,生长 健壮,且基部膨大成鳞茎形;(6) 、生根培养将第(5)步骤通过壮苗培养获得的苗高约为1.0 1.5c本文档来自技高网...

【技术保护点】
南美水仙组织培养的一组培养基,其特征在于:该组培养基由以下五个培养基组成。(1)诱导培养基:MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA)1.0~3.0mg/L萘乙酸(NAA)1.0~2.0mg/L水解酷蛋白(CH)200~300mg/L蔗糖25~35g/L琼脂5.0~6.0g/LpH5.6~6.0(2)增殖培养基:MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA)1.0~2.0mg/L萘乙酸(NAA)0.2~1.0mg/L蔗糖25~35g/L琼脂5.0~6.5g/LpH5.6~6.0(3)继代增殖培养基:MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA)1.0~2.0mg/L萘乙酸(NAA)0.2~1.0mg/L蔗糖25~35g/L琼脂5.0~6.5g/LpH5.6~6.0(4)壮苗培养基:MS基本培养液6-苄基氨基嘌呤(6-BA)0.5~1.0mg/L萘乙酸(NAA)0.5~1.0mg/L蔗糖20~25g/L琼脂5.5~7.0g/LpH5.6~6.0(5)生根培养基:MS基本培养液吲哚乙酸(IAA)0.1~0.5mg/L萘乙酸(NAA)0.1~0.5mg/L蔗糖20~25g/L琼脂5.5~7.0g/LpH5.6~6.0。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:瞿素萍曾黎琼苏艳段玉云杨秀梅程在全王丽花张丽芳彭绿春陆琳
申请(专利权)人:云南省农业科学院
类型:发明
国别省市:53[中国|云南]

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1