一种离心层析荧光免疫检测技术及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种荧光检测组合套装和检测方法，包含有待检物特异性结合物、微粒、固相膜、荧光物质、离心装置以及荧光检测器，其中所述的荧光物质包括有机荧光染料和稀土元素荧光染料中的至少一种；所述微粒为能够直接和/或通过化学交联方式与蛋白质和/或所述荧光物质形成非特异性结合并维持稳定的颗粒；所述固相膜为具有与蛋白质非特异性结合特性的膜质物质；所述离心装置为能够离心驱动液相在所述固相膜上层析流动的结构；所述待检物特异性结合物为具有特异性结合能力的抗原、抗体、亲和素、生物素及其类似物中的至少一种。本发明专利技术具有灵敏度高、稳定性好、检测时间短的特点，具有良好的应用前景。

A centrifuge chromatography fluorescent immunoassay technique and its application

The invention discloses a fluorescence detection suite and detection methods, including needs specific inspection conjugates, particles, solid film, fluorescent material, centrifugal device and fluorescence detector, wherein the fluorescent material comprises at least one organic fluorescent dye and rare earth fluorescent dyes in the particles can be directly; and / or by chemical crosslinking with protein and / or the fluorescent substance formation of nonspecific binding and maintain stable particles; the solid phase membrane with membranous material properties with nonspecific protein; the device is able to drive from the heart of the centrifugal liquid phase in the solid phase membrane flow chromatography the specific structure; examination of conjugates with specific binding ability of antigen, antibody, affinity of at least one element, biotin and its analogues in. The invention has the characteristics of high sensitivity, good stability and short detection time, and has good application prospect.

【技术实现步骤摘要】
一种离心层析荧光免疫检测技术及其用途
本专利技术涉及一种离心层析荧光免疫检测技术及其用途，属于免疫检测

技术介绍
免疫学检测技术是应用免疫学原理设计的测定抗原、抗体、免疫细胞及化学成分等的实验手段，广泛用于来源于人体和动物体可进行疾病诊断和健康检测的样品以及用于环境、药物分析、食品和工业分析的样品。常用的有免疫浊度技术、固相酶免疫测定技术、化学发光检测技术、免疫荧光标记技术、流式细胞术、胶体金技术等。免疫浊度技术，也称免疫浊度法是可溶性抗原、抗体在液相中特异结合，产生一定大小的复合物，形成光的折射或吸收，测定这种折射或吸收后的透射光或散射光作为计算单位，用于定量检测，但检测灵敏度低，不适合于微量检测。固相酶免疫测定技术基于抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记，结合在固相载体表面的抗原或抗体保持其免疫学活性，抗原或抗体的酶结合物既保留其免疫学活性，又保留酶的活性，在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应，具有灵敏度高、线性响应范围宽和易于实现自动化等显著优点，但检测反应时间长限制了其使用。化学发光检测技术是一种高灵敏的微量及痕量分析技术，具有操作方便、灵敏度高、线性响应范围宽和易于实现自动化等显著优点，广泛地应用于环境、临床、药物分析、食品和工业分析中，也是基于抗原或抗体的固相分离手段及抗原或抗体的发光试剂标记技术，但检测反应时间长及对检测设备的要求高也影响其使用。免疫荧光标记技术、流式细胞术、胶体金技术也是常用的检测技术被广泛使用，但均有其相应的不足，检测反应时间长或灵敏度、准确性欠缺是普遍存在的不足。高灵敏度、快速、小型化、全定量、自动化是目前临床免疫检测技术产品的发展趋势，但现有的都无法同时实现上述功能。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种离心层析荧光免疫检测技术装置及其用途。本专利技术具有灵敏度高、检测时间短、检测稳定性好、使用便捷的特点。本专利技术提供的一种离心层析荧光免疫检测组合套装，特征在于，所述检测组合套装含有待检物特异性结合物、微粒、固相膜、荧光物质、离心装置以及荧光检测器，其中所述的荧光物质包括有机荧光染料和稀土元素荧光染料中的至少一种；所述微粒为能够直接和/或通过化学交联方式与蛋白质和/或所述荧光物质形成非特异性结合并维持稳定的颗粒；所述固相膜为具有与蛋白质非特异性结合特性的膜质物质；所述离心装置为能够离心驱动液相在所述固相膜上层析流动的结构；所述待检物特异性结合物为具有特异性结合能力的抗原、抗体、亲和素、生物素及其类似物中的至少一种。一种所述检测组合套装的检测方法，其特征在于：所述检测方法为如下（A）-（D）中任一种：（A）包括如下步骤：1）用所述待检物特异性结合物和所述荧光物质同时标记所述微粒；2）用含有待检物的样本与所述标记后的微粒反应，所述待检物通过与位于所述标记后的微粒上的所述待检物特异性结合物结合，进而形成“荧光物质-微粒-待检物特异性结合物-待检物”复合物，即复合物1；3）在所述固相膜上包被能够通过与位于复合物1上的待检物形成特异性结合的第二待检物特异性结合物；4）用含有所述复合物1的液相通过层析流经所述固相膜上包被的所述第二待检物特异性结合物，形成“荧光物质-微粒-待检物特异性结合物-待检物-第二待检物特异性结合物”复合物，即复合物2，并被捕获固定在所述固相膜上；5）采用离心层析法用清洗液清洗所述固相膜上未结合的所述复合物1及残留的所述荧光物质；6）将清洗后的所述固相膜用所述荧光检测器检测被间接固定到所述固相膜上的所述荧光物质通过激发光激发产生荧光的发光值，以检测所述待检物的含量；（B）包括如下步骤：1）用所述待检物特异性结合物标记所述微粒；2）用所述荧光物质标记所述待检物特异性结合物的特异性结合物，形成“荧光物质-待检物特异性结合物的特异性结合物”，即荧光物质标记物；3）用含有待检物的样本与所述标记后的微粒反应，所述待检物通过与位于所述标记后的微粒上的所述待检物特异性结合物结合，进而形成“微粒-待检物特异性结合物-待检物”复合物，即复合物3；4）在所述固相膜上包被所述第二待检物特异性结合物；5）用含有所述复合物3的液相通过层析流经所述固相膜上包被的所述第二待检物特异性结合物，形成“微粒-待检物特异性结合物-待检物-第二待检物特异性结合物”复合物，即复合物4，并被捕获固定在所述固相膜上；6）用含有所述荧光物质标记物的液相通过层析流经被捕获在所述固相膜上的复合物4，通过与所述待检物特异性结合物结合，形成“荧光物质标记物-复合物4”复合物，即复合物5，并被捕获固定在所述固相膜上；6）采用离心层析法用清洗液清洗所述固相膜上未结合的所述荧光物质标记物及残留的所述荧光物质；7）将清洗后的所述固相膜用所述荧光检测器检测被间接固定到所述固相膜上的所述荧光物质通过激发光激发产生荧光的发光值，以检测所述待检物的含量；（C）包括如下步骤：1）用所述待检物特异性结合物和所述荧光物质同时标记所述微粒；2）用含有待检物的样本与所述标记后的微粒反应，所述待检物通过与位于所述标记后的微粒上的所述待检物特异性结合物结合，进而形成“荧光物质-微粒-待检物特异性结合物-待检物”复合物，即所述复合物1；3）用中间物质A标记所述第二待检物特异性结合物；4）在所述固相膜上包被能够与所述中间物质A形成特异性结合的中间物质B；5）用含有所述复合物1的液相与所述中间物质A标记的第二待检物特异性结合物进行反应，形成“荧光物质-微粒-待检物特异性结合物-待检物-第二待检物特异性结合物-中间物质A”复合物，即复合物6；6）用含有所述复合物6的液相通过层析流经所述固相膜上包被的所述中间物质B，形成“荧光物质-微粒-待检物特异性结合物-待检物-第二待检物特异性结合物-中间物质A-中间物质B”复合物，即复合物7，并被捕获固定在所述固相膜上；7）采用离心层析法用清洗液清洗所述固相膜上未结合的所述复合物6及残留的所述荧光物质；8）将清洗后的所述固相膜用所述荧光检测器检测被间接固定到所述固相膜上的所述荧光物质通过激发光激发产生荧光的发光值，以检测所述待检物的含量；（D）包括如下步骤：1）用所述待检物特异性结合物标记所述微粒；2）用所述荧光物质标记所述待检物特异性结合物的特异性结合物，形成“荧光物质-待检物特异性结合物的特异性结合物”，即所述荧光物质标记物；3）用含有待检物的样本与所述标记后的微粒反应，所述待检物通过与位于所述标记后的微粒上的所述待检物特异性结合物结合，进而形成“微粒-待检物特异性结合物-待检物”复合物，即所述复合物3；4）用所述中间物质A标记所述第二待检物特异性结合物；5）在所述固相膜上包被能够与所述中间物质A形成特异性结合的所述中间物质B；6）用含有所述复合物3的液相与所述中间物质A标记的第二待检物特异性结合物反应，形成“微粒-待检物特异性结合物-待检物-第二待检物特异性结合物-中间物质A”复合物，即复合物8；7）用含有所述复合物8的液相通过层析流经所述固相膜上包被的所述中间物质B，形成“微粒-待检物特异性结合物-待检物-第二待检物特异性结合物-中间物质A-中间物质B”复合物，即复合物9，并被捕获固定在所述固相膜上；8）用含有所述荧光物质本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种离心层析荧光免疫检测组合套装，特征在于，所述检测组合套装含有待检物特异性结合物、微粒、固相膜、荧光物质、离心装置以及荧光检测器，其中所述的荧光物质包括有机荧光染料和稀土元素荧光染料中的至少一种；所述微粒为能够直接和/或通过化学交联方式与蛋白质和/或所述荧光物质形成非特异性结合并维持稳定的颗粒；所述固相膜为具有与蛋白质非特异性结合特性的膜质物质；所述离心装置为能够离心驱动液相在所述固相膜上层析流动的结构；所述待检物特异性结合物为具有特异性结合能力的抗原、抗体、亲和素、生物素及其类似物中的至少一种。

【技术特征摘要】
1.一种离心层析荧光免疫检测组合套装，特征在于，所述检测组合套装含有待检物特异性结合物、微粒、固相膜、荧光物质、离心装置以及荧光检测器，其中所述的荧光物质包括有机荧光染料和稀土元素荧光染料中的至少一种；所述微粒为能够直接和/或通过化学交联方式与蛋白质和/或所述荧光物质形成非特异性结合并维持稳定的颗粒；所述固相膜为具有与蛋白质非特异性结合特性的膜质物质；所述离心装置为能够离心驱动液相在所述固相膜上层析流动的结构；所述待检物特异性结合物为具有特异性结合能力的抗原、抗体、亲和素、生物素及其类似物中的至少一种。2.一种权利要求1所述检测组合套装的检测方法，其特征在于：所述检测方法为如下（A）-（D）中任一种：（A）包括如下步骤：1）用所述待检物特异性结合物和所述荧光物质同时标记所述微粒；2）用含有待检物的样本与所述标记后的微粒反应，所述待检物通过与位于所述标记后的微粒上的所述待检物特异性结合物结合，进而形成“荧光物质-微粒-待检物特异性结合物-待检物”复合物，即复合物1；3）在所述固相膜上包被能够通过与位于复合物1上的待检物形成特异性结合的第二待检物特异性结合物；4）用含有所述复合物1的液相通过层析流经所述固相膜上包被的所述第二待检物特异性结合物，形成“荧光物质-微粒-待检物特异性结合物-待检物-第二待检物特异性结合物”复合物，即复合物2，并被捕获固定在所述固相膜上；5）采用离心层析法用清洗液清洗所述固相膜上未结合的所述复合物1及残留的所述荧光物质；6）将清洗后的所述固相膜用所述荧光检测器检测被间接固定到所述固相膜上的所述荧光物质通过激发光激发产生荧光的发光值，以检测所述待检物的含量；（B）包括如下步骤：1）用所述待检物特异性结合物标记所述微粒；2）用所述荧光物质标记所述待检物特异性结合物的特异性结合物，形成“荧光物质-待检物特异性结合物的特异性结合物”，即荧光物质标记物；3）用含有待检物的样本与所述标记后的微粒反应，所述待检物通过与位于所述标记后的微粒上的所述待检物特异性结合物结合，进而形成“微粒-待检物特异性结合物-待检物”复合物，即复合物3；4）在所述固相膜上包被所述第二待检物特异性结合物；5）用含有所述复合物3的液相通过层析流经所述固相膜上包被的所述第二待检物特异性结合物，形成“微粒-待检物特异性结合物-待检物-第二待检物特异性结合物”复合物，即复合物4，并被捕获固定在所述固相膜上；6）用含有所述荧光物质标记物的液相通过层析流经被捕获在所述固相膜上的复合物4，通过与所述待检物特异性结合物结合，形成“荧光物质标记物-复合物4”复合物，即复合物5，并被捕获固定在所述固相膜上；6）采用离心层析法用清洗液清洗所述固相膜上未结合的所述荧光物质标记物及残留的所述荧光物质；7）将清洗后的所述固相膜用所述荧光检测器检测被间接固定到所述固相膜上的所述荧光物质通过激发光激发产生荧光的发光值，以检测所述待检物的含量；（C）包括如下步骤：1）用所述待检物特异性结合物和所述荧光物质同时标记所述微粒；2）用含有待检物的样本与所述标记后的微粒反应，所述待检物通过与位于所述标记后的微粒上的所述待检物特异性结合物结合，所述待检物通过与所述待检物特异性结合物结合，进而形成“荧光物质-微粒-待检物特异性结合物-待检物”复合物，即所述复合物1；3）用中间物质A标记所述第二待检物特异性结合物；4）在所述固相膜上包被能够与所述中间物质A形成特异性结合的中间物质B；5）用含有所述复合物1的液相与所述中间物质A标记的第二待检物特异性结合物进行反应，形成“荧光物质-微粒-待检物特异性结合物-待检物-第二待检物特异性结合物-中间物质A”复合物，即复合物6；6）用含有所述复合物6的液相通过层析流经所述固相膜上包被的所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘凤鸣，
申请(专利权)人：北京康华源科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11