抗TIM‑3抗体制造技术

公开了抗TIM‑3抗体，以及包含这种抗体的药物组合物，以及使用这种抗体的用途和方法，例如在治疗癌症或感染性疾病或T细胞功能障碍性疾病方面。还公开了针对TIM‑3和其它靶标的双特异性抗体，在优选的实施方案中双特异性抗体针对TIM‑3和CD3。

Anti TIM 3 antibody

Discloses anti TIM 3 antibody, and pharmaceutical compositions containing such antibody, and the use of such antibodies and uses methods, such as in the treatment of cancer or infectious disease or T cell dysfunction. Also disclosed for TIM bispecific antibody and 3 other targets, bispecific antibody to TIM 3 and CD3 in the preferred embodiment.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗TIM-3抗体专利
本专利技术涉及结合至T细胞免疫球蛋白粘蛋白3(TIM-3)的抗体。
技术介绍
T细胞耗竭是许多慢性感染和癌症中出现的T细胞功能障碍的状态。它定义为T细胞效应子功能不良，抑制性受体的持续表达和与功能性效应子或记忆性T细胞的转录状态不同的转录状态。耗尽可以防止感染和肿瘤的最佳控制。(EJohnWherry，NatureImmunology12,492-499(2011))。T细胞耗竭的特征在于T细胞功能的逐步和渐进性丧失。在慢性淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒感染期间，耗竭是明确的，并且通常在许多慢性感染(包括乙型肝炎病毒，丙型肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒感染)后的抗原持久性的条件下以及肿瘤转移期间发生。耗竭不是一致的无能力情况，因为表型和功能缺陷的分级可以显化，这些细胞与原型效应细胞，记忆和无能T细胞不同。耗竭的T细胞在高等级慢性感染期间最常出现，抗原刺激的水平和持续时间是该过程的关键决定因素。(Yi等，ImmunologyApr2010；129(4)：474-481)。循环人肿瘤特异性CD8+T细胞可能是细胞毒性的并且在体内产生细胞因子，表明自身和肿瘤特异性的人CD8+T细胞在有效的免疫治疗，如用肽，不完全弗氏佐剂(IFA)和CpG接种或过继转移后，能够达到功能的能力。与外周血相比，转移的T细胞功能缺陷，细胞因子产生异常低，并且抑制性受体PD-1，CTLA-4和TIM-3上调。功能缺陷是可逆的，因为从黑素瘤组织分离的T细胞在短期体外培养后可以恢复IFN-γ产生。然而，仍然要确定这种功能障碍是否涉及进一步的分子途径，可能类似于动物模型中定义的T细胞耗尽或无反应性。(Baitsch等，JClinInvest.2011；121(6)：2350-2360)。程序性细胞死亡(受体)1(PD-1)，也称为CD279，是PDCD1基因在人中编码的I型膜蛋白。它有两个配体PD-L1和PD-L2。PD-1途径是T细胞耗竭的关键免疫抑制介质。阻断该途径可导致T细胞活化，扩增和增强的效应子功能。因此，PD-1负调节T细胞反应。已经将PD-1鉴定为慢性疾病状态中耗竭的T细胞的标志物，并且已经显示阻断PD-1：PD-1L相互作用部分恢复T细胞功能。(Sakuishi等，JEM第207卷，2010年9月27日，pp2187-2194)。纳武单抗(Nivolumab)(BMS-936558)是2014年7月在日本被批准用于治疗黑色素瘤的抗PD-1抗体。其他抗PD-1抗体描述于WO2010/077634，WO2006/121168中。T细胞免疫球蛋白粘蛋白3(TIM-3)是被鉴定为在耗尽的CD8+T细胞上上调的免疫调节剂(Sakuishi等，JEMVol.207，2010年9月27日，pp2187-2194)。最初鉴定出TIM-3在分泌IFN-γ的Th1和Tc1细胞上选择性表达。TIM-3与其配体Galectin(半乳糖凝集素)-9的相互作用在TIM-3+T细胞中触发细胞死亡。抗TIM-3抗体描述于Ngiow等(CancerRes.，2011年5月15日；71(10)：3540-51)，以及US8,552,156中。TIM-3和PD-1可以作为T细胞反应的负调节因子，并且TIM-3和PD-1途径的组合靶向在控制肿瘤生长方面比单独靶向任何一个途径更有效。(Sakuishi等，JEMVol.207，2010年9月27日，pp2187-2194；和Ngiow等CancerRes.2011年5月15日；71(10)：3540-51)。TIM-3也可以在肿瘤细胞，特别是造血起源的肿瘤细胞表面表达，例如急性骨髓性白血病细胞(Kikushige等，CellStemCell2010；3：7(6)708-17)，因此，在某些情况下，TIM-3可能是可能被特异性抗体靶向的肿瘤相关抗原。专利技术概述本专利技术涉及与TIM-3结合的抗体或抗原结合片段。还公开了重链和轻链多肽。所述抗体，抗原结合片段和多肽可以分离和/或纯化形式提供，并且可以配制成适用于研究，治疗和诊断的组合物。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段或多肽是细胞毒性的，例如针对表达TIM-3的细胞，如表达TIM-3的T细胞或肿瘤细胞。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段或多肽由于其细胞毒性作用而可用于治疗癌症。合适的癌症包括白血病，例如急性骨髓性白血病。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段或多肽可有效恢复显示T细胞耗竭或T细胞无反应性的T细胞，例如，CD8+T细胞中的T细胞功能。在本专利技术的一个方面，提供了一种抗体或抗原结合片段，所述抗体的氨基酸序列可以包含氨基酸序列i)至iii)或氨基酸序列iv)至vi)，或优选地氨基酸序列i)至vi)：或其变体，其中序列(i)至(vi)中一个或多个序列中的一个或两个或三个氨基酸被另一个氨基酸替代，其中X1＝E或D,X2＝A或S,X3＝Y,S或A,X4＝Y,A,D或S,X5＝V,D,Y,L或A,X6＝A或S,X7＝A或S,X8＝Y,V或S和Z1＝V或Y,Z2＝S,F,Y或D,Z3＝A,D,S或Y。关于本专利技术的所有方面，在其中HC-CDR1：GYYWS(SEQIDNO：61)的实施方案中，该序列可被包含于较大序列GGSFSGYYWS(SEQIDNO：30)中。在一些实施方案中，LC-CDR3是下组之一：EAWDYYVAAGY(SEQIDNO:12),DSWDSADASGV(SEQIDNO:13),DSWDYDYAAGV(SEQIDNO:14),DSWDSYLAAGV(SEQIDNO:15),ESWDYDYASGV(SEQIDNO:16),DSWDSSDSSGV(SEQIDNO:17),EAWDSAYAAGS(SEQIDNO:18)DSWDAALSAGV(SEQIDNO:19)或ESWDAAAAAGY(SEQIDNO:20)。在一些实施方案中，HC-CDR3是下组之一：GYVAGSDA(SEQIDNO:32),GYVAGFDD(SEQIDNO:33),GYVAGFDS(SEQIDNO:34),GYVAGYDY(SEQIDNO:35),GYVAGSDA(SEQIDNO:36),GYVAGFDS(SEQIDNO:37),GYYAGDDY(SEQIDNO:38),GYVAGYDY(SEQIDNO:39),或GYVAGSDA(SEQIDNO:40)。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段可以包含至少一个包含以下CDR的轻链可变区：在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段可以包含至少一个包含以下CDR的轻链可变区：在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段可以包含至少一个包含以下CDR的轻链可变区：在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段可以包含至少一个包含以下CDR的轻链可变区：在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段可以包含至少一个包含以下CDR的轻链可变区：在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段可以包含至少一个包含以下CDR的轻链可变区：在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段可以包含至少一个包含以下CDR的轻链可变区：在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段可以包含至少一个包含以下CDR的轻链可变区：在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合片本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗体或抗原结合片段，其能够结合至TIM‑3，任选是分离的，具有i)至vi)所示的氨基酸序列：

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.10.27 GB 1419094.61.一种抗体或抗原结合片段，其能够结合至TIM-3，任选是分离的，具有i)至vi)所示的氨基酸序列：或其变体，其中序列(i)至(vi)中的一个或多个中的一个或两个或三个氨基酸被另一个氨基酸取代,其中X1＝E或D,X2＝A或S,X3＝Y,S或A,X4＝Y,A,D或S,X5＝V,D,Y,L或A,X6＝A或S,X7＝A或S,X8＝Y,V或S和Z1＝V或Y,Z2＝S,F,Y或D,Z3＝A,D,S或Y。2.如权利要求1所述的抗体或抗原结合片段,其中LC-CDR3是下组之一：EAWDYYVAAGY(SEQIDNO:12),DSWDSADASGV(SEQIDNO:13),DSWDYDYAAGV(SEQIDNO:14),DSWDSYLAAGV(SEQIDNO:15),ESWDYDYASGV(SEQIDNO:16),DSWDSSDSSGV(SEQIDNO:17),EAWDSAYAAGS(SEQIDNO:18)DSWDAALSAGV(SEQIDNO:19)或ESWDAAAAAGY(SEQIDNO:20)。3.如权利要求1或2所述的抗体或抗原结合片段,其中HC-CDR3是下组之一：GYVAGSDA(SEQIDNO:32),GYVAGFDD(SEQIDNO:33),GYVAGFDS(SEQIDNO:34),GYVAGYDY(SEQIDNO:35),GYVAGSDA(SEQIDNO:36),GYVAGFDS(SEQIDNO:37),GYYAGDDY(SEQIDNO:38),GYVAGYDY(SEQIDNO:39),或GYVAGSDA(SEQIDNO:40)。4.如权利要求1-3中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的轻链可变区：LC-CDR1:SGSSSNIGNNYVS(SEQIDNO:10)LC-CDR2:GNNWRPS(SEQIDNO:11)LC-CDR3:EAWDYYVAAGY(SEQIDNO:12)。5.如权利要求1-3中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的轻链可变区：LC-CDR1:SGSSSNIGNNYVS(SEQIDNO:10)LC-CDR2:GNNWRPS(SEQIDNO:11)LC-CDR3:DSWDSADASGV(SEQIDNO:13)。6.如权利要求1-3中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的轻链可变区：LC-CDR1:SGSSSNIGNNYVS(SEQIDNO:10)LC-CDR2:GNNWRPS(SEQIDNO:11)LC-CDR3:DSWDYDYAAGV(SEQIDNO:14)。7.如权利要求1-3中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的轻链可变区：LC-CDR1:SGSSSNIGNNYVS(SEQIDNO:10)LC-CDR2:GNNWRPS(SEQIDNO:11)LC-CDR3:DSWDSYLAAGV(SEQIDNO:15)。8.如权利要求1-3中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的轻链可变区：LC-CDR1:SGSSSNIGNNYVS(SEQIDNO:10)LC-CDR2:GNNWRPS(SEQIDNO:11)LC-CDR3:ESWDYDYASGV(SEQIDNO:16)。9.如权利要求1-3中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的轻链可变区：LC-CDR1:SGSSSNIGNNYVS(SEQIDNO:10)LC-CDR2:GNNWRPS(SEQIDNO:11)LC-CDR3:DSWDSSDSSGV(SEQIDNO:17)。10.如权利要求1-3中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的轻链可变区：LC-CDR1:SGSSSNIGNNYV(SEQIDNO:10)LC-CDR2:GNNWRPS(SEQIDNO:11)LC-CDR3:EAWDSAYAAGS(SEQIDNO:18)。11.如权利要求1-3中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的轻链可变区：LC-CDR1:SGSSSNIGNNYVS(SEQIDNO:10)LC-CDR2:GNNWRPS(SEQIDNO:11)LC-CDR3:DSWDAALSAGV(SEQIDNO:19)。12.如权利要求1-3中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的轻链可变区：LC-CDR1:SGSSSNIGNNYVS(SEQIDNO:10)LC-CDR2:GNNWRPS(SEQIDNO:11)LC-CDR3:ESWDAAAAAGY(SEQIDNO:20)。13.如权利要求1-12中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的重链可变区：14.如权利要求1-12中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的重链可变区：15.如权利要求1-12中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的重链可变区：16.如权利要求1-12中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的重链可变区：17.如权利要求1-12中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的重链可变区：18.如权利要求1-12中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的重链可变区：19.如权利要求1-12中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的重链可变区：20.如权利要求1-12中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的重链可变区：21.如权利要求1-12中任一所述的抗体或抗原结合片段,具有至少一个包含以下CDR的重链可变区：22.根据权利要求1至21中任一项所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体是细胞毒性的。23.如权利要求1至22中任一项所述的抗体或抗原结合片段，其中所述抗体有效恢复显示T细胞耗尽或T细胞无反应性的T细胞中的T细胞功能。24.一种体外复合物，任选分离的，其包含根据权利要求1至23中任一项所述的与TIM-3结合的抗体或抗原结合片段。25.一种分离的轻链可变区多肽，其包含以下CDR：LC-CDR1:SGSSSNIGNNYVS(SEQIDNO:10)LC-CDR2:GNNWRPS(SEQIDNO:11)LC-CDR3:X1X2WDX3X4X5X6X7GX8(SEQIDNO:41)其中X1＝E或D,X2＝A或S,X3＝Y,S或A,X4＝Y,A,D或S,X5＝V,D,Y,L或A,X6＝A或S,X7＝A或S,X8＝Y,V或S。26.如权利要求25所述的分离的轻链可变区多肽，...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪正一，胡雪玲，杨淑斌，吴云佩，
申请(专利权)人：新加坡科技研究局，
类型：发明
国别省市：新加坡,SG