一种戊糖乳杆菌及其在抑制沙门氏菌方面的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种戊糖乳杆菌及其在抑制沙门氏菌方面的应用，属于微生物技术领域。本发明专利技术提供了一种药物组合物，所述药物组合物含有戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)AT6及其活性成分，能够用于抑制沙门氏菌生长；戊糖乳杆菌AT6能降低沙门氏菌对HT‑29细胞的黏附、侵袭，降低沙门氏菌在小鼠肠道内容物和器官中的载量，并减缓沙门氏菌引起的小鼠死亡。

【技术实现步骤摘要】
一种戊糖乳杆菌及其在抑制沙门氏菌方面的应用
本专利技术涉及一种戊糖乳杆菌及其在抑制沙门氏菌方面的应用，属于微生物

技术介绍
沙门氏菌病(Salmonellosis)是有沙门氏菌属细菌引起的各种动物和人的疾病的总称。沙门氏菌属的宿主包括哺乳类、禽类、爬虫类、鱼类和人等，宿主广泛，可引发各种各样的疾病。疾病的严重程度从慢性到急性，从局部感染到全身性败血症，严重的可引起死亡。沙门氏菌病作为全球性疾病，地理位置分布十分广泛，世界各国均有较多沙门氏菌病情发生，带来严重的经济损失和安全隐患。人类沙门氏菌感染往往多见于急性感染病例，表现为绞痛、腹泻、恶心、呕吐和发热等。其发病程度与沙门氏菌血清型和感染剂量有关。目前有多种用于治疗致病菌感染的药物如抗生素等，可有效减缓沙门氏菌等致病菌感染后的发病症状。也有一些中药配方可以有效缓解致病菌感染症状。但是，抗生素在治疗致病菌感染的同时也会杀死大量的肠道共生菌、造成肠道菌群紊乱，并且抗生素的使用不仅对人本身产生副作用，也会流入到环境中造成环境中抗生素压力增大、破坏生态平衡。而中药治疗的作用效果往往不理想，而且与抗生素治疗一样存在滞后性的问题。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是提供一种戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)，已于2017年3月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.13956，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。本专利技术的第二个目的是提供一种药物组合物，所述药物组合物含有所述戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)和/或其代谢产物。在本专利技术的一种实施方式中，所述戊糖乳杆菌的含量≥1×108CFU/mL。在本专利技术的一种实施方式中，所述戊糖乳杆菌的含量≥1×108CFU/g。在本专利技术的一种实施方式中，所述代谢产物是将戊糖乳杆菌接种至MRS培养基中，离心后收集的上清。在本专利技术的一种实施方式中，所述的药物组合物由戊糖乳杆菌菌剂与药学上可接受的载体组成。在本专利技术的一种实施方式中，所述药学上可接受的载体是一种或多种选自药学上通常使用的填充剂、润湿剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂或矫味剂的载体。本专利技术的第三个目的是提供所述戊糖乳杆菌在抑制沙门氏菌生物量方面的应用。在本专利技术的一种实施方式中，所述戊糖乳杆菌接种至MRS培养基中，35～37℃培养14～36h后，再加入至含沙门氏菌的液体、固体或半固体中。在本专利技术的一种实施方式中，所述戊糖乳杆菌与沙门氏菌的菌浓比为1:1～100。本专利技术还提供所述戊糖乳杆菌制备的食品或保健品。有益效果：本专利技术的戊糖乳杆菌AT6培养物上清与沙门氏菌共培养，能抑制沙门氏菌生长，使其生物量降低82.9％；戊糖乳杆菌AT6能降低沙门氏菌对HT-29细胞的黏附、侵袭，能使其黏附率降低75.0％，侵袭率降低89.3％。摄入戊糖乳杆菌AT6使小鼠肝脏、脾脏中沙门氏菌检出率从60％、50％分别降至0％、0％，回肠、盲肠、结肠内容物中的沙门氏菌数量分别降低了71.0％、67.7％、84.3％。戊糖乳杆菌AT6能减缓沙门氏菌引起的小鼠死亡，15天时小鼠的存活率从40％提高至65％。生物材料保藏本专利技术所提供的戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)，已于2017年3月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.13956，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。附图说明图1为戊糖乳杆菌AT6培养物上清在LB培养基中对沙门氏菌的抑制效果图；其中，AT6组为戊糖乳杆菌AT6与沙门氏菌共培养；LGG组为鼠李糖乳杆菌LGG与沙门氏菌共培养；MRS组为空白对照组，MRS培养基与沙门氏菌共培养；HCl-3.81组为用盐酸调pH至3.81的MRS与沙门氏菌共培养；LA-3.81组为用DL-乳酸调pH至3.81的MRS与沙门氏菌共培养；图2是戊糖乳杆菌AT6抑制沙门氏菌黏附HT-29细胞的作用；其中，CON组为对照组，六孔板中加入1640空白培养基，后加入1.0×108CFU沙门氏菌；LGG组表示向六孔板中加入1.0×108CFU鼠李糖乳杆菌LGG，后加入1.0×108CFU沙门氏菌；AT6组表示向六孔板中加入1.0×108CFU戊糖乳杆菌AT6，后加入1.0×108CFU沙门氏菌；图3是戊糖乳杆菌AT6抑制沙门氏菌侵袭HT-29细胞的作用；其中，CON组为对照组，六孔板中加入1640空白培养基，后加入1.0×108CFU沙门氏菌；LGG组表示向六孔板中加入1.0×108CFU鼠李糖乳杆菌LGG，后加入1.0×108CFU沙门氏菌；AT6组表示向六孔板中加入1.0×108CFU戊糖乳杆菌AT6，后加入1.0×108CFU沙门氏菌；图4是戊糖乳杆菌AT6对沙门氏菌感染小鼠肝脏和脾脏中沙门氏菌载量的影响；其中，liver-con表示模型组肝脏沙门氏菌载量；liver-LGG表示鼠李糖乳杆菌LGG处理组肝脏沙门氏菌载量；liver-AT6表示戊糖乳杆菌AT6处理组肝脏沙门氏菌载量；spleen-con表示模型组脾脏沙门氏菌载量；spleen-LGG表示鼠李糖乳杆菌LGG处理组脾脏沙门氏菌载量；spleen-AT6表示戊糖乳杆菌AT6处理组脾脏沙门氏菌载量；图5是戊糖乳杆菌AT6对沙门氏菌感染小鼠肠道内容物中沙门氏菌载量的影响；其中，Ileum-con表示模型组回肠内容物中沙门氏菌载量；Ileum-LGG表示鼠李糖乳杆菌LGG处理组回肠内容物中沙门氏菌载量；Ileum-AT6表示戊糖乳杆菌AT6处理组回肠内容物中沙门氏菌载量；Cecum-con表示模型组盲肠内容物中沙门氏菌载量；Cecum-LGG表示鼠李糖乳杆菌LGG处理组盲肠内容物中沙门氏菌载量；Cecum-AT6表示戊糖乳杆菌AT6处理组盲肠内容物中沙门氏菌载量；Colon-con表示模型组结肠内容物中沙门氏菌载量；Colon-LGG表示鼠李糖乳杆菌LGG处理组结肠内容物中沙门氏菌载量；Colon-AT6表示戊糖乳杆菌AT6处理组结肠内容物中沙门氏菌载量；图6是戊糖乳杆菌AT6的摄入提高鼠伤寒沙门氏菌感染后小鼠的存活率；其中，control组灌胃PBS；model组灌胃沙门氏菌；LGG组先灌胃鼠李糖乳杆菌LGG，后灌胃沙门氏菌；AT6组先灌胃戊糖乳杆菌，后灌胃沙门氏菌。具体实施方式MRS液体培养基(每1L)：胰蛋白胨10g、牛肉浸膏10g、酵母粉5g、葡萄糖20g、柠檬酸氢二铵2g、无水乙酸钠5g、磷酸氢二钾2g、七水硫酸镁0.5g、一水硫酸锰0.25g、吐温801mL，加水至1000mL，pH调至6.2-6.4，115℃、20min湿热灭菌。MRS固体培养基(每L)：液体培养基中添加琼脂粉15g/L。LB培养基(每L)：酵母粉5.0g，胰蛋白胨10.0g，氯化钠5.0g。加水1L，121℃15min湿热灭菌。菌种活化：用接种环从保菌管中挑取少量菌液，在MRS固体平板中划线。放在37℃恒温培养箱中培养，直至长出单菌落。菌种培养：用接种环挑取MRS固体培养基上的单菌落至MRS液体培养基中，37℃静置培养14-18h。之后，1％接种量转移至液体MRS培养本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)，已于2017年3月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.13956，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

【技术特征摘要】
2017.06.26 CN 20171049301301.一种戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)，已于2017年3月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.13956，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。2.一种药物组合物，其特征在于，含有权利要求1所述的戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)和/或其代谢产物。3.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，所述戊糖乳杆菌的含量≥1×108CFU/g或1×108CFU/mL。4.根据权利要求2所述的药物组合物，其特征在于，所述代谢产物是所述戊糖乳杆菌接种至MRS培养基中培养，离心后收集的上...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵建新，张灏，陈卫，陆文伟，顾震南，刘俊生，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32