一种复合纳米诊疗制剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种复合纳米诊疗制剂及其制备方法。复合纳米诊疗制剂，包裹薄荷醇和IR‑780碘化物，于脂质载体中，所述载体包括磷脂、胆固醇、二肉豆蔻酰基磷脂酰乙醇胺‑二乙基三胺五乙酸‑钆。所述复合纳米诊疗制剂的粒径为90 nm‑2μm。本发明专利技术制备的集超声/光声/核磁共振成像与光热治疗功能于一体的复合纳米诊疗制剂，将多模态造影与光热治疗结合在一起，其中多模态成像为光热治疗提供了可靠的影像依据，提高了光热治疗的时间、空间选择性及准确性。另外，该复合纳米诊疗制剂因纳米尺寸所特有的EPR效应，易于在肿瘤部位富集。这样既提高了诊断效率，又降低了患者承担毒副作用的风险，加快了多模态造影与光热治疗诊疗一体化的进程。

A compound nano diagnosis and treatment preparation and its preparation method

The invention discloses a compound nano diagnosis and treatment preparation and a preparation method. The nano composite treatment agent, menthol and IR 780 package iodide, in lipid carrier, wherein the carrier comprises a phospholipid, cholesterol, two myristoyl phosphatidyl ethanolamine two ethyl three amine five acetic acid gadolinium. The diagnosis and treatment of preparation of composite nano particle diameter of 90 nm 2 m. In the ultrasound / prepared by the invention of the photoacoustic / magnetic resonance imaging and photothermal therapy in one composite treatment agent, multimodal imaging and photothermal therapy together, which provides a reliable basis for the imaging of multi modality imaging photothermal therapy, photothermal therapy improves the temporal and spatial selectivity and accuracy. In addition, the compound nano diagnosis and treatment preparation is easy to accumulate in the tumor site because of the EPR effect unique to the nanometer size. This not only improves the diagnostic efficiency, but also reduces the risk of taking the side effects of the patients, and accelerates the process of the integration of multimodal angiography and photothermal treatment.

【技术实现步骤摘要】
一种复合纳米诊疗制剂及其制备方法
本专利技术涉及生物医学领域，具体地说，涉及一种复合纳米诊疗制剂及其制备方法。
技术介绍
近年来，癌症已严重威胁人类健康，对癌症的精确诊断和有效治疗是本领域长期以来研究的热点与难点。在临床实践中，肿瘤的诊断与治疗仍为两个相对独立的过程。诊断试剂与治疗用药分开使用，延长了疾病诊断-治疗的周期，造成贻误病情风险高，患者的经济负担加重。依托于纳米技术的迅猛发展，诊疗一体化制剂以其良好的生物膜穿透力、被动靶向实体瘤的高通透性和滞留效应（EPR效应）及易于多功能化等优势在生物医学领域得到广泛关注。光热治疗技术是一种可控、非侵入式的肿瘤治疗方法。该技术利用光热材料吸收近红外光，将其转化为局部热能使肿瘤区域温度升高，从而达到杀死肿瘤细胞的目的。目前，光热材料主要包括高分子纳米材料（如聚吡咯纳米材料）、碳材料、贵金属材料及有机小分子（如吲哚菁绿、IR-780碘化物）材料。其中贵金属材料、高分子材料、碳材料类虽然有良好的光热转化能力及可修饰性，但这类材料的生物安全性及不可降解等问题仍然颇具争议；小分子染料虽然具有良好的生物相容性及可代谢等优势，但由于分子量小，存在体内循环时间短、不具备肿瘤靶向性等问题。因此，如何提高小分子染料的肿瘤靶向性、延长其体内循环时间成为该领域亟待解决的问题。另外，单一光热转换剂无法确定治疗部位，使其在临床应用中受到极大限制。因此，为了有效确定治疗部位，实时监测治疗进程与治疗效果，将光热治疗与造影技术结合。利用造影技术高分辨率的优势，并借助具有造影增强效果的造影剂，可大大提高诊断的灵敏度及治疗效率。超声、光声、核磁这三种成像方式是目前科学研究应用最为广泛的分子影像诊断方式，各自拥有优势特点，如超声具有实时动态成像,便携经济、时间分辨率好的特点,但是灵敏度和分辨率较低；光声成像具有深穿透的优势，但声学信号较弱；核磁灵敏度和空间分辨率大,但时间分辨率差,不能进行动态、实时成像。因此，将以上三种成像造影剂结合不仅可以提高单独成像的灵敏度，更可以通过优势互补，实现肿瘤的早期高效诊断及术中引导和术后评价，为光热治疗提供多模态图像，避免单一图像方式的局限性，可有效提高治疗效率，避免正常组织的损伤及破坏。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对上述诊断及治疗制剂存在的不足，提供一种生物相容性好、毒副作用小，且集超声/光声/核磁成像与光热治疗功能于一体的复合纳米诊疗制剂及其制备方法。本专利技术的技术方案是通过以下方式实现的：本专利技术所述的复合纳米诊疗制剂，是一种集超声/光声/核磁共振成像与光热治疗功能于一体的复合纳米诊疗制剂。一种复合纳米诊疗制剂，包裹薄荷醇和IR-780碘化物（IR-780），于脂质载体中，所述载体包括磷脂、胆固醇、二肉豆蔻酰基磷脂酰乙醇胺-二乙基三胺五乙酸-钆（DMPE-DTPA-Gd）。所述复合纳米诊疗制剂的粒径为90nm-2μm。上述复合纳米诊疗制剂的制备方法，包括如下步骤：（1）以二肉豆蔻酰基磷脂酰乙醇胺(DMPE)为载体，采用交联剂将等摩尔含量的二乙基三胺五乙酸（DTPA）分子接枝到DMPE分子上，得到DMPE-DTPA分子；（2）将得到的DMPE-DTPA分子溶于水中，加入氯化钆（GdCl3·6H2O）溶液室温搅拌，透析后冻干，得到DMPE-DTPA-Gd材料；（3）以磷脂、胆固醇及DMPE-DTPA-Gd作为载体原料，通过乙醇注入法包裹薄荷醇及IR-780；（4）将混合溶液在水浴超声及探头超声条件下进行分散，结束后透析；（5）将步骤（4）获得的产物冷冻干燥48h后取出，4℃冰箱保存。在上述复合纳米诊疗制剂的制备方法中,所述交联剂为1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐或N-羟基琥珀酰亚胺。在上述复合纳米诊疗制剂的制备方法中,步骤（3）所述磷脂为饱和磷脂或不饱和磷脂。在上述复合纳米诊疗制剂的制备方法中,步骤（3）所述磷脂为DPPC、DSPE-PEG、DPPG、卵磷脂中的一种或多种的混合。在上述复合纳米诊疗制剂的制备方法中,磷脂、胆固醇与DMPE-DTPA-Gd的质量比例范围为2-6：3:1。在上述复合纳米诊疗制剂的制备方法中,所述薄荷醇为左旋薄荷醇、右旋薄荷醇或消旋薄荷醇中的一种或多种混合。本专利技术与现有技术相比，具有如下优点：（1）本专利技术制备的集超声/光声/核磁共振成像与光热治疗功能于一体的复合纳米诊疗制剂，将多模态造影与光热治疗结合在一起，其中多模态成像为光热治疗提供了可靠的影像依据，提高了光热治疗的时间、空间选择性及准确性。另外，该复合纳米诊疗制剂因纳米尺寸所特有的EPR效应，易于在肿瘤部位富集。这样既提高了诊断效率，又降低了患者承担毒副作用的风险，加快了多模态造影与光热治疗诊疗一体化的进程；（2）本专利技术制备的复合纳米诊疗制剂的粒径分布均匀、性质稳定且呈单分散状态、水溶性和生物相容性良好，且磷脂包覆在薄荷醇及IR-780表面，可有效解决薄荷醇、IR780疏水性的问题；此外，DMPE-DTPA-Gd与商用钆喷酸葡胺比较，弛豫率显著提高。（3）本专利技术的制备方法条件温和、可控性强、简便易行。另外，本专利技术制备的复合纳米诊疗制剂最终形态可为冻干粉剂，稳定性好且易于储存运输。因此，本专利技术在肿瘤临床诊断与治疗方面具有广阔的应用前景。下面结合附图对本专利技术作进一步的说明。附图说明图1为本专利技术实施例1中制备的复合纳米诊疗制剂的流程示意图。图2为本专利技术实施例1中制得的复合纳米诊疗制剂的透射电镜图。图3为本专利技术实施例2中制得的复合纳米诊疗制剂的核磁共振成像及弛豫率对比图。图4为本专利技术实施例3中制得的复合纳米诊疗制剂的紫外-可见光吸收光谱图。图5为本专利技术实施例4中制得的复合纳米诊疗制剂的近红外热效应图。图6为本专利技术实施例5中制得的复合纳米诊疗制剂在近红外激光辐照前后的超声造影增强效果。图7为本专利技术实施例6中制得的复合纳米诊疗制剂的光声成像图。图8为本专利技术实施例7中制得的复合纳米诊疗制剂的粒径分布图。图9为本专利技术实施例8中制备的复合纳米诊疗制剂的粒径分布图。具体实施方式本专利技术所述的复合纳米诊疗制剂，是一种集超声/光声/核磁共振成像与光热治疗功能于一体的复合纳米乳。本专利技术通过乙醇注入法将薄荷醇、IR-780包裹在由磷脂、胆固醇及二肉豆蔻酰基磷脂酰乙醇胺-二乙基三胺五乙酸-钆（DMPE-DTPA-Gd）的组成的脂质体中，得到性质稳定且呈单分散状态的复合纳米乳。实施例1：（1）DMPE-DTPA-Gd的制备过程：将1,2-十四酰基磷脂酰乙醇胺（DMPE）溶于氯仿，配制浓度为0.1mM的溶液4mL。将30μL三乙胺逐滴加入20mL1mM的二乙基三胺五乙酸（DTPA）溶于二甲基亚砜（DMSO）的溶液并加入交联剂1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC）及N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)。将上述两种溶液混合后在氩气的氛围内室温孵育3h后，先在DMSO溶液中透析12h（透析袋:MW3500），再在超纯水中透析48h。制备得到DMPE-DTPA冻干储存。精准称取0.384gDMPE-DTPA，溶于10mMpH=5.8的醋酸钠缓冲溶液，再加入0.337mM的GdCl3水溶液3.1mL，用1M的NaOH将溶液pH调节至6.5，然后在50℃的条件下加热5h。反应完全后，离心（4本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种复合纳米诊疗制剂，其特征在于包裹薄荷醇和IR‑780碘化物的脂质载体，所述载体包括磷脂、胆固醇及二肉豆蔻酰基磷脂酰乙醇胺‑二乙基三胺五乙酸‑钆。

【技术特征摘要】
1.一种复合纳米诊疗制剂，其特征在于包裹薄荷醇和IR-780碘化物的脂质载体，所述载体包括磷脂、胆固醇及二肉豆蔻酰基磷脂酰乙醇胺-二乙基三胺五乙酸-钆。2.根据权利要求1所述的复合纳米诊疗制剂，其特征在于所述复合纳米诊疗制剂的粒径为90nm-2μm。3.权利要求1所述复合纳米诊疗制剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤：（1）以二肉豆蔻酰基磷脂酰乙醇胺DMPE为载体，采用交联剂将等摩尔含量的二乙基三胺五乙酸DTPA分子接枝到DMPE分子上，得到DMPE-DTPA分子；（2）将得到的DMPE-DTPA分子溶于水中，加入氯化钆溶液室温搅拌，透析后冻干，得到DMPE-DTPA-Gd材料；（3）以磷脂、胆固醇及DMPE-DTPA-Gd作为载体原料，通过乙醇注入法包裹薄荷醇及IR-780；（4）将混合溶液在水浴超声及探头超声条件下进行分散，...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢晓燕，张春阳，
申请(专利权)人：中山大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：广东,44