一种海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒及其制备方法和应用、一种载药纳米粒子技术

本发明专利技术公开了一种海藻酸钠‑植物甾醇‑乳糖酸靶向纳米粒及其制备方法和应用、一种载药纳米粒子，此靶向纳米粒以植物甾醇作为载体的基本骨架，植物甾醇作为疏水配基，构建两亲性的抗肿瘤药物载体‑海藻酸钠‑植物甾醇纳米粒，同时将乳糖酸通过酯化作用连接在纳米粒上，作为具有靶向作用的信号分子。该靶向纳米粒能够包载治疗肿瘤的药物形成载药纳米粒子，并将其靶向输送到肝癌细胞中，增加肝癌组织和细胞中的药物浓度，减少药物对正常组织的损害，提高药物的利用率，从而达到更好的治疗效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，具体涉及一种海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒及其制备方法和应用及一种海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒包载盐酸多柔比星制成的载药纳米粒子。
技术介绍
癌症是世界上死亡率极高的一种疾病，其中肝癌被称为“癌中之王”，据不完全统计，全世界每年有超过700000人被诊断为肝癌患者，大约有600000人死于肝癌，我国的肝癌发病人数约占全球的55％，每年的死亡率达20.4/10万。肝癌组织和细胞不规则的脉管系统，组织间液高压等构成肝癌复杂的生理屏障，传统的抗癌药物由于药物的分子量低，在体内容易扩散，对肝癌细胞的选择性差，因此在杀死肝癌细胞的同时也对正常的组织和细胞产生毒副作用。同时在体内是非特异性分布，经代谢等步骤过程后，只有少部分药物进入肝靶向细胞。因此，开发一种具有肝靶向功能的纳米药物载体十分有必要，目前公认的纳米药物载体包括脂质体、脂质微粒、纳米囊和纳米球以及聚合物胶束等。其中，脂质体因具有良好的组织相容性、安全性、靶向性、缓释性、实用性等特点而倍受关注，据不完全统计，已经有16个脂质体药物成功上市。近年来，科学家在对原有的处方工艺技术的不断改良下，已获得长循环脂质体、免疫脂质体、温度敏感脂质体等。但是针对脂质体的不稳定性、包封率低等缺点，近年来针对纳米药物载体的研究已经向低毒、低免疫性、高包封率、高稳定性等的纳米球发展，此类的研究具有较好的应用前景。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒，此靶向纳米粒以植物甾醇作为载体的基本骨架，植物甾醇作为疏水配基，构建两亲性的抗肿瘤药物载体-海藻酸钠-植物甾醇纳米粒，同时将乳糖酸通过酯化作用连接在纳米粒上，作为具有靶向作用的信号分子。本专利技术还提供了一种海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒的制备方法，该制备方法步骤简单。本专利技术还提供了海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒在制备具有肝靶向功能的纳米药物载体中的应用，可定向的将抗肿瘤的药物输送到肝癌细胞中，从而达到更好的治疗效果。本专利技术还提供了一种载药纳米粒子，通过海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒采用物理渗透的方法包载盐酸多柔比星制得。本专利技术采取的技术方案为：一种海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒，海藻酸钠作为载体的基本骨架，植物甾醇作为疏水配基，乳糖酸作为具有靶向作用的信号分子，三者通过酯键连接，并在水中超声自组装成核壳式纳米颗粒。本专利技术还提供了上述海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：(a)通过二环己基碳二亚胺和4-二甲基氨基吡啶介导的酯化反应将植物甾醇连到海藻酸钠上，形成海藻酸钠-植物甾醇聚合物；(b)将乳糖酸活化，然后与海藻酸钠-植物甾醇进行聚合物反应，制备连有乳糖酸的海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸聚合物分子；(c)将海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸聚合物分子在水中超声自组装成核壳式纳米颗粒。步骤(a)中，所述海藻酸钠、植物甾醇、二环己基碳二亚胺、4-二甲基氨基吡啶之间的物质的量之比为1：(1～2)：(0.2～0.22)：(0.1～0.12)。所述步骤(a)进一步包括：在25～30℃反应24～48小时，通过透析袋透析3次，所述透析袋能够截留分子量为8000～14000的大分子，形成海藻酸钠-植物甾醇聚合物。所述步骤(b)具体包括：先将乳糖酸在碳酰二亚胺盐酸盐和4-二甲基氨基吡啶作用下活化，然后与海藻酸钠-植物甾醇进行聚合物反应。所述海藻酸钠-植物甾醇聚合物和乳糖酸质量之比为(1.5～2.0)：1。所述乳糖酸、碳酰二亚胺盐酸盐、4-二甲基氨基吡啶之间的物质的量之比为1：(0.2～0.22)：(0.1～0.12)。所述聚合反应的温度为25～30℃，时间为24～48小时。所述聚合反应后进一步包括使用透析袋透析3次，所述透析袋能够截留分子量为8000～14000的大分子。所述步骤(c)具体包括：海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸聚合物分子溶于水，36～38℃下超声震荡40～55小时，自组装成具有靶向功能的核壳式纳米颗粒。本专利技术还提供了根据上述制备方法制备得到的藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒在制备具有肝靶向功能的纳米药物载体中的应用。本专利技术还提供了一种载药纳米粒子，所述载药纳米粒子由海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒采用物理渗透的方法包载盐酸多柔比星制得。所述载药纳米粒子的制备方法包括以下步骤：盐酸多柔比星溶于二甲基乙酰胺溶液，加入三乙胺，盐酸多柔比星与三乙胺的物质的量之比为1：(3.0～3.9)，然后将其与海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒在避光条件下反应，反应结束后，经pH＝7.4，1/15mol/L、20～30℃的磷酸缓冲液透析，再经微孔滤膜过滤、冻干，即可制得载药纳米粒子。所述盐酸多柔比星在二甲基乙酰胺溶液中的浓度为1.0～1.1mol/L。所述盐酸多柔比星与所述海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳粒子的质量之比为(1.5～3.0)：1。所述避光条件下反应的反应温度为4℃，时间为36～72小时。所述微孔滤膜的孔径为1.0um。所述透析所用透析袋能够截留分子量为8000～14000的大分子。与现有技术相比，本专利技术通过自组装的海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸的纳米药物载体作为肝靶向药物载体，能够将抗癌药物靶向的输送到肝癌细胞中，增加肝癌组织和细胞中的药物浓度，减少药物对正常组织的损害，提高药物的利用率。具有安全性、有效性、靶向性等，为将来其作为一种新型药物载体应用于临床提供理论基础。附图说明图1为海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒的透射电镜图；图2为海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒子的粒径分布图；图3为载药纳米粒子在不同PH值环境下，其药物释放量与时间的关系图；图4为盐酸多柔比星、载药纳米粒子一和载药纳米粒子二与HepG2细胞作用后的体外细胞实验图，图中DOX.HCl为盐酸多柔比星；PA/DOX为载药纳米粒子二；GPA/DOX为载药纳米粒子一。具体实施方式实施例1一种海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：(a)海藻酸钠-植物甾醇合成：通过二环己基碳二亚胺(DCC)和4-二甲基氨基吡啶(DMAP)介导的酯化反应将植物甾醇连到海藻酸钠上，海藻酸钠、植物甾醇、二环己基碳二亚胺、4-二甲基氨基吡啶之间的物质的量之比为1：1：0.2：0.1，在30℃反应24小时，通过透析袋透析3次，所述透析袋能够截留分子量为8000～14000的大分子，形成海藻酸钠-植物甾醇聚合物。(b)海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸的制备：先将乳糖酸在碳酰二亚胺盐酸盐(EDC.HCL)和4-二甲基氨基吡啶(DMAP)下活化，然后与海藻酸钠-植物甾醇聚合物反应，海藻酸钠-植物甾醇聚合物和乳糖酸质量之比为1.5：1，乳糖酸、碳酰二亚胺盐酸盐、4-二甲基氨基吡啶之间的物质的量之比为1：0.2：0.1，在25℃反应48小时，通过透析袋透析3次，所述透析袋能够截留分子量为8000～14000的大分子，制备连有乳糖酸的海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸聚合物分子。(c)上述两种聚合物溶于水，在37℃下超声震荡48小时。两种聚合物分子分别自组装形成非靶向功能的海藻酸钠-植物甾醇纳米粒和海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒。实施例2一种本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种海藻酸钠‑植物甾醇‑乳糖酸靶向纳米粒，其特征在于：海藻酸钠作为载体的基本骨架，植物甾醇作为疏水配基，乳糖酸作为具有靶向作用的信号分子，三者通过酯键连接，并在水中超声自组装成核壳式纳米颗粒。

【技术特征摘要】
1.一种海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒，其特征在于：海藻酸钠作为载体的基本骨架，植物甾醇作为疏水配基，乳糖酸作为具有靶向作用的信号分子，三者通过酯键连接，并在水中超声自组装成核壳式纳米颗粒。2.根据权利要求1所述的海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸靶向纳米粒的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：(a)通过二环己基碳二亚胺和4-二甲基氨基吡啶介导的酯化反应将植物甾醇连到海藻酸钠上，形成海藻酸钠-植物甾醇聚合物；(b)将乳糖酸活化，然后与海藻酸钠-植物甾醇进行聚合物反应，制备连有乳糖酸的海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸聚合物分子；(c)将海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸聚合物分子在水中超声自组装成核壳式纳米颗粒。3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述步骤(b)具体包括：先将乳糖酸在碳酰二亚胺盐酸和4-二甲基氨基吡啶作用下活化，然后与海藻酸钠-植物甾醇进行聚合物反应。4.根据权利要求2或3所述制备方法，其特征在于，所述步骤(c)具体包括：海藻酸钠-植物甾醇-乳糖酸聚合物分子溶于水，36～38℃下超声震荡40～55小时，自组装成具有靶向功能的核壳式纳米颗粒。5.根据权利要求2所述的制备方法制...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄美玲，龚仁敏，
申请(专利权)人：安徽师范大学，
类型：发明
国别省市：安徽;34