【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药，尤其涉及一种代谢物5,6-eet预测妊娠糖尿病产妇产后生活干预效果的研究方法。
技术介绍
1、妊娠糖尿病是指妊娠期间发生的糖代谢异常，但血糖未达到显性糖尿病水平，占妊娠期高血糖的83.6％。妊娠糖尿病女性产后发生2型糖尿病的风险比妊娠期间血糖正常的女性增加了7-10倍，其中20-50％的妊娠糖尿病女性在产后5年内发生2型糖尿病。生活方式干预是妊娠糖尿病患者产后血糖管理的基石，越来越多的研究显示，有妊娠糖尿病病史的女性产后可以从生活方式干预中获益，以降低她们进展为2型糖尿病的风险。
2、生活方式干预可减缓妊娠糖尿病产后糖代谢异常人群进展为2型糖尿病，但是也仍然有部分患者最终会很快进展为2型糖尿病。对于这部分生活方式干预无效的患者，可能需要早期采取更积极的干预措施(比如生活方式干预与药物相结合)。早期识别这部分单纯生活方式干预无效的患者，积极应对，才能使患者获得更良好防治效果。然而，目前尚无相关因素或指标提示哪些妊娠糖尿病产后糖代谢异常患者属于单纯生活方式干预效果差人群。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提出一种代谢物5,6-eet预测妊娠糖尿病产妇产后生活干预效果的研究方法，通过对入选的受试者进行标准化的生活方式干预，连续随访2年，每半年进行一次糖耐量检测，根据糖耐量结果，将受试者分为血糖正常组和血糖异常组(包括糖尿病、空腹血糖受损、糖耐量减低、空腹血糖受损+糖耐量减低)，分析两组受试者产后半年空腹血浆的代谢组学差异，筛选出两组受试者差异最大的
2、本专利技术的一个目的是提供一种代谢物5,6-eet预测妊娠糖尿病产妇产后生活干预效果的研究方法，该研究方法包括以下步骤：
3、步骤1：选取完成2年随访的患者，根据患者2年随访结局分为血糖恢复正常组及糖代谢异常组，将两组所有受试者产后半年的空腹血浆样本进行非靶向代谢组学检测分析，筛选得到32种差异代谢物；
4、步骤2：将筛选的32种差异代谢物通过在线数据库hmdb检索，得到差异代谢物5,6-eet，并以差异代谢物5,6-eet作为预测的标记物；
5、步骤3：通过elisa法对差异代谢物5,6-eet进行定量检测验证。
6、进一步地，步骤1的具体操作步骤如下：
7、步骤101：对空腹血浆样本进行处理，提取代谢物；
8、步骤102：将含有代谢物的上清液进行超高效液相色谱-质谱分析，得到包含代谢物峰面积和鉴定结果的数据矩阵；
9、步骤103：将上述分析结果依次进行预处理、数据质控、整体分析、比较组的组间差异筛选、比较组的组间差异分析，然后依据筛选条件筛选出差异代谢物。
10、更进一步地，差异代谢物筛选的条件包括：(1)非靶向代谢组学分析代谢物中的vip值≥1；(2)单变量分析中的fold change≥1.2或者≤0.83；(3)p值<0.05。
11、更进一步地，步骤3的具体操作过程如下：
12、从完成2年随访的患者中选取另外一部分人，根据患者2年随访结局分为血糖恢复正常组及糖代谢异常组，两组人群年龄、孕前bmi、孕期血糖水平匹配，采用elisa法对所有受试者产后半年的血浆样本进行差异代谢物5,6-eet检测分析：
13、(1)从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃；
14、(2)设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50l；样本孔加待测样50μl；
15、(3)样本孔先加待测样本10μl，再加样本稀释液40μl；空白孔不加；
16、(4)除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μl，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min；
17、(5)弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次；
18、(6)每孔加入底物a、b各50μl，37℃避光孵育15min；
19、(7)每孔加入终止液50μl，15min内，在450nm波长处测定各孔的od值。
20、本专利技术的另一个目的是提供一种5,6-eet标记物，5,6-eet标记物用于预测妊娠糖尿病产妇产后生活方式干预的效果。
21、与现有技术相比，本专利技术具有如下优点：
22、本专利技术利用妊娠糖尿病产后糖代谢异常女性产后早期空腹血浆代谢组学标志物5,6-eet预测生活方式干预对血糖异常逆转的roc曲线下面积达0.85。证明妊娠糖尿病产后糖代谢异常女性产后早期空腹血浆代谢组学标志物5,6-eet预测生活方式干预血糖效果的准确性更高。
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1.一种代谢物5,6-EET预测妊娠糖尿病产妇产后生活干预效果的研究方法，其特征在于，该研究方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种代谢物5,6-EET预测妊娠糖尿病产妇产后生活干预效果的研究方法，其特征在于，步骤1的具体操作步骤如下：
3.根据权利要求2所述的一种代谢物5,6-EET预测妊娠糖尿病产妇产后生活干预效果的研究方法，其特征在于，差异代谢物筛选的条件包括：(1)非靶向代谢组学分析代谢物中的VIP值≥1；(2)单变量分析中的Fold Change≥1.2或者≤0.83；(3)P值<0.05。
4.根据权利要求3所述的一种代谢物5,6-EET预测妊娠糖尿病产妇产后生活干预效果的研究方法，其特征在于，步骤3的具体操作过程如下：
5.一种5,6-EET标记物，其特征在于，5,6-EET标记物用于预测妊娠糖尿病产妇产后生活方式干预的效果。
【技术特征摘要】
1.一种代谢物5,6-eet预测妊娠糖尿病产妇产后生活干预效果的研究方法，其特征在于，该研究方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种代谢物5,6-eet预测妊娠糖尿病产妇产后生活干预效果的研究方法，其特征在于，步骤1的具体操作步骤如下：
3.根据权利要求2所述的一种代谢物5,6-eet预测妊娠糖尿病产妇产后生活干预效果的研究方法，其特征在于，差异代谢物筛选的条件包括：(1...
【专利技术属性】
技术研发人员：曹筱佩，赖凤华，陈楠，徐长柳，王陈雪，梁书荟，
申请(专利权)人：中山大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：
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