一种含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统及其制备方法和应用技术方案

本发明专利技术提供一种含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统，按照重量计包括ApoG2 1～2份，AlpcS4 1～2份，泊洛沙姆3～5份，ApoG2和AlpcS4包封在泊洛沙姆中。该含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统，能够实现AlpcS4光敏剂的光动力治疗和ApoG2化疗药物协同灭活肿瘤细胞，而且有效解决ApoG2难溶性的问题，制备方法简单。本发明专利技术还提供了含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统的制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。

A two nanometer drug carrying system containing ApoG2 and AlpcS4 and its preparation and Application

The invention provides a containing ApoG2 and AlpcS4 double nano drug carrier system, in accordance with the weight of including ApoG2 1~2, AlpcS4 1~2, poloxamer 3~5, ApoG2 and AlpcS4 encapsulated in poloxamer in. The dual nanoparticle drug delivery system containing ApoG2 and AlpcS4 can realize photodynamic therapy of AlpcS4 photosensitizers and inactivate tumor cells with ApoG2 chemotherapy drugs, and effectively solve the problem of insoluble ApoG2, and the preparation method is simple. The invention also provides a preparation method of the double nano drug carrying system containing ApoG2 and AlpcS4 and the application in the preparation of antitumor drugs.

【技术实现步骤摘要】
一种含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统及其制备方法和应用
本专利技术涉及抗肿瘤药物研究领域，特别涉及一种含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统及其制备方法和应用。
技术介绍
根据世界卫生组织2014年全球癌症报告，全球每年新增病例1400万，死亡病例800万。因此，恶性肿瘤严重危害着人类生命健康。其中胃癌，是我国第三大常见肿瘤，每年新发率高达40多万人，死亡率高达30多万人，居世界首位。据统计，全球每年新发胃癌有40％以上发生在中国，而其在西方国家发病率较低，从而成为我国必须自主攻克的重大疾病之一。近几年，胃癌的基础研究和临床治疗受到了多个研究学者和医生的广泛关注，各种以期攻克胃癌的基础研究和临床治疗策略取得了很大的进展，各种新型药物和个性化治疗方案层出不穷，尽管治疗效果有所改进但是死亡率及转移复发率仍旧很高。随着癌症研究的不断深入，具有高效、安全、创伤小、副作用少、可协同性、可重复性和相对成本低等优点的光动力疗法，成为最具前景的肿瘤治疗方法之一。光动力疗法主要是利用光照下可产生光敏化作用的光敏剂来破坏病变组织的一种微创疗法，无疑光敏剂是光动力疗法的核心环节。四磺酸酞菁铝(AlPcS4)是一种具有近红外荧光特性的第二代光敏剂，由于其具有较深的光组织穿透性、高的荧光量子产量、较强的光稳定性、表面可修饰性以及对目标组织的可视化示踪而成为了光敏剂的研究热点。将其应用于乳腺癌、胰腺癌、卵巢癌、结肠癌等肿瘤光动力治疗已经有所报道，而针对胃癌的治疗研究方面几乎还是空白。而且从目前研究结果看，它对肿瘤组织的选择性和富集能力有限导致其不能完全根治肿瘤进而导致肿瘤复发从而大大阻碍了其向临床应用的推进。光动力疗法与化疗药物协同作用是一种有效的改善光动力治疗效果的途径，但是传统的化疗药物大的毒副作用，反复使用过程中的多药耐药现象导致治疗失败时有发生。项目专利技术人前期一直致力于一种新型Bcl-2/Bcl-xL小分子抑制剂ApoG2化疗药物作用于胃癌的治疗研究，研究结果表明ApoG2以小的毒副作用可靶向胃癌组织中高表达的Bcl-2，Bcl-xL蛋白通过激活线粒体凋亡通路以及内质网应激凋亡通路等多途径诱导胃癌细胞凋亡，具有较强的抑瘤效果。现有技术中还不存在以AlpcS4和ApoG2构建的双载药系统。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统及其制备方法和应用，其能够实现AlpcS4光敏剂的光动力治疗和ApoG2化疗药物协同灭活肿瘤细胞。本专利技术是通过以下技术方案来实现：一种含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统，以质量份数计，包括1～2份ApoG2，1～2份AlpcS4及3～5份泊洛沙姆；其中，ApoG2和AlpcS4包封于泊洛沙姆中。优选地，所述泊洛沙姆包括PluronicF127和PluronicP123。优选地，泊洛沙姆为纳米胶束；ApoG2和AlpcS4包含在泊洛沙姆的聚氧丙烯(PPO)嵌段中。本专利技术还公开了上述含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统的制备方法，包括以下步骤：1)将泊洛沙姆和ApoG2溶解在第一溶剂中，得第一溶液；将AlpcS4溶解在第二溶剂中，得第二溶液；2)在搅拌下，将第一溶液加入到第二溶液中，搅拌12～36小时，得反应混合液；3)将反应混合液用透析袋纯化，纯化产物经过冷冻干燥，制备得含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统。优选地，在步骤1)中，将泊洛沙姆溶解在乙醇中，在加入ApoG2，溶解后得第一溶液。优选地，在步骤1)中，所述第二溶剂为去离子水。优选地，在第一溶液中，泊洛沙姆的浓度为5～15mg/mL。优选地，在第一溶液中，ApoG2的浓度为2～8mg/mL。优选地，在第二溶液中，AlpcS4的浓度为2～8mg/mL。优选地，步骤3)中，透析袋的截留分子量为3000。本专利技术还公开了上述含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统在制备抗肿瘤药物中的应用。优选地，所述肿瘤包括胃癌。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益的技术效果：本专利技术提供的含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统，其包括泊洛沙姆，ApoG2和AlpcS4包封在泊洛沙姆中。波洛沙姆嵌段共聚物在熔融状态和溶液状态下可实现自组装形成胶束，从而成为难溶性、具有不理想药动力学和低稳定药物的理想载体，其内核主要由PPO疏水嵌段构成，但是若干PEO亲水嵌段也会存在于内核中；ApoG2是一种疏水性药物，很容易被波洛沙姆包入胶束的内核中，AlpcS4是一类亲水性药物，会包借助PEO而含在PPO嵌段中，如此，可以简单快速的制备出含亲水性药物AlpcS4和疏水性药物ApoG2的双纳米载药系统，过程中不需要复杂的设备。而且波洛沙姆纳米胶束可以有效解决ApoG2难溶性的问题。光敏药物AlpcS4进行光动力效应过程中产生有毒的活性氧物质是其发挥作用的关键原因。而活性氧物质是激活内质网应激凋亡通路的关键因素，新型Bcl-2/Bcl-xL小分子抑制剂ApoG2化疗药物也可以通过提高细胞内活性氧浓度和钙离子浓度而激活内质网应激凋亡通路刺激细胞发生凋亡进而杀伤细胞。两者在协同过程中，都促进活性氧浓度升高，因此在短时间内就可以有效的杀伤细胞和激活内质网应激凋亡通路，从而有效的杀伤肿瘤细胞。如此，含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统能够实现AlpcS4光敏剂的光动力治疗和ApoG2化疗药物协同灭活肿瘤细胞，借助光敏剂AlpcS4的光动力治疗效果协同ApoG2化疗治疗效果有望有效提高肿瘤杀伤效率，解决AlpcS4光敏剂的药物传递效率低、光动力治疗效果有限的特点，而且有效解决ApoG2难溶性的问题，制备方法简单。另外，波洛沙姆具有良好的生物相容性和蛋白抗性，为后期的靶向治疗提供了可靠方案。不仅如此，光敏剂AlpcS4的近红外荧光特性为药物监测提供了有效途径：基于AlpcS4的荧光特性，可以利用荧光光学成像方式实时有效检测药物在体内外的存留情况，还可以根据AlpcS4的可修饰性对其进行靶向修饰实时检测治疗效果。本专利技术提供的含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统的制备方法，其方法简单，无需复杂设备。本专利技术提供的含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统在制备抗肿瘤药物中的应用，其可以制备高效的抗肿瘤药物。附图说明图1为本专利技术提供的F-127双载药纳米胶束吸收光谱；图2为本专利技术提供的F-127双载药纳米胶束电镜图；图3为本专利技术提供的F-127双载药纳米胶束在PBS和水中稳定性结果图；其中，(a)为PBS；(b)为水；图4为本专利技术提供的F-127双载药纳米胶束对胃癌细胞灭活效果。图5为本专利技术提供的F-127双载药纳米胶束中AlpcS4荧光定位结果图。具体实施方式下面结合具体的实施例对本专利技术做进一步的详细说明，所述是对本专利技术的解释而不是限定。1、双纳米载药系统的制备：称取10mgF-127溶于1ml无水乙醇中，再将2.5mg、2.5mg、5mgApoG2溶于F-127的无水乙醇溶液中备用。称取2.5mg、2.5mg、5mgAlpcS4溶于10ml去离子水中置于磁力搅拌器上搅拌。然后将含有2.5mg、5mg、2.5mgApoG2的F-127乙醇溶液缓慢滴加至对应的AlpcS4的去离子水中，搅拌本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统，其特征在于，以质量份数计，包括1～2份ApoG2，1～2份AlpcS4及3～5份泊洛沙姆；其中，ApoG2和AlpcS4包封于泊洛沙姆中。

【技术特征摘要】
1.一种含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统，其特征在于，以质量份数计，包括1～2份ApoG2，1～2份AlpcS4及3～5份泊洛沙姆；其中，ApoG2和AlpcS4包封于泊洛沙姆中。2.如权利要求1所述的含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统，其特征在于，所述泊洛沙姆为PluronicF127或PluronicP123。3.如权利要求1所述的含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统，其特征在于，泊洛沙姆为粒径30±5nm的纳米胶束；ApoG2和AlpcS4包封于泊洛沙姆的聚氧丙烯嵌段中。4.权利要求1～3中任一项所述的含有ApoG2和AlpcS4的双纳米载药系统的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将泊洛沙姆和ApoG2溶解在第一溶剂中，得第一溶液；将AlpcS4溶解在第二溶剂中，得第二溶液；2)在搅拌条件下，...

【专利技术属性】
技术研发人员：辛静，张镇西，姚翠萍，王兵，王晶，王斯佳，张璐薇，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61