一种检测试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种检测试剂盒及其应用，检测试剂盒包括包被有抗瓜氨酸化纤维蛋白抗体、抗瓜氨酸化波形蛋白抗体、抗瓜氨酸化α‑烯纯化酶抗体或抗瓜氨酸化II型胶原抗体中至少两种组合的固相载体，可用于制备类风湿关节炎的检测试剂和/或检测药物。本发明专利技术采用两种或两种以上瓜氨酸化蛋白组合检测RA，可显著提高敏感性和特异性，为RA临床诊断提供一种灵敏快速的检测工具，试剂盒组成简洁，使用方法简便，应用范围广泛，具有巨大的市场价值。

A detection kit and its application

The invention relates to a detection kit and application kit, including coated with antibody, anti citrullinated protein fiber citrullinated alpha ene purified enzyme antibody or solid phase carrier at least two combinations of anti citrullinated collagen type II antibody of anti vimentin antibody, anti acidification melon ammonia, which can be used for preparing the preparation of rheumatoid arthritis and / or drug detection kit. The invention adopts two or more than two kinds of citrullinated protein combined detection of RA, can significantly improve the sensitivity and specificity, provide a sensitive and rapid detection tool for the clinical diagnosis of RA, kit is simple, easy to use, wide application range, has a huge market value.

【技术实现步骤摘要】
一种检测试剂盒及其应用
本专利技术属于医学免疫应用领域，涉及一种检测试剂盒及其应用，具体涉及一种瓜氨酸化抗体的检测试剂盒及其应用。
技术介绍
类风湿性关节炎又称类风湿(RA)，是一种病因尚未明了的慢性全身性炎症性疾病，以慢性、对称性、多滑膜关节炎和关节外病变为主要临床表现，属于自身免疫炎性疾病，病程长，易反复，给患者造成很大痛苦，该病在我国的发病率约为0.36％。由于病因至今尚未完全清楚，而且早期临床表现不典型，加之缺乏特异性的诊断方法，给疾病早期诊断及治疗带来一定困难。RA的治疗关键在于早期治疗，而早期治疗的前提是早期诊断。因此，寻求准确的早期诊断RA的方法成为各国学者研究的热点。瓜氨酸化蛋白(fibrinogen、vimentin、collagen、enolase)是一类重要的RA抗原，目前尚无采用检测相关抗原来诊断RA的试剂盒。常用于RA诊断的类风湿因子RF特异性较差，而现有方法(文献和专利)检测单一抗原的敏感性不高。CN1796997公开了一种用于类风湿性关节炎的诊断试剂盒及其制备及完成质量检测标准的方法。所述试剂盒是检测抗环瓜氨酸肽抗体的检测试剂盒。检测试剂盒的制备方法包括包被抗原、制备对照物和配制液体试剂。该专利技术仅检测单一抗原，敏感性不高。CN204882569U涉及一种用于类风湿关节炎的联合检测试剂盒。该技术的用于类风湿关节炎的联合检测试剂盒可以同时检测RF、CRP、ASO、C3和IgM五种标记物，但制备方法复杂，使用过程繁琐。CN204964515U涉及类风湿因子双抗体夹心ELISA试剂盒。该试剂盒包括设置有凹槽的盒体(1)，其特征在于，所述盒体内设置有酶联板(2)、封板膜(3)和放置于凹槽上的试剂瓶(4)；所述酶联板(2)包括基板和设置于基板上的包被有抗IgG型RF抗体的反应槽(21)；所述反应槽为腰鼓状结构，槽底和槽口的直径小于中间部分的直径。该技术所述ELISA试剂盒对滑膜液中IgG型RF进行检测，因此灵敏度低，特异性差。因此，开发一种瓜氨酸化蛋白组合检测方法及相关试剂盒，以实现快速、准确、灵敏诊断RA的目的，具有巨大的应用价值和市场前景。
技术实现思路
针对现有技术中，用于RA诊断的类风湿因子特异性较差和敏感性不高的缺陷，本专利技术提供一种检测试剂盒及其应用，以实现快速、准确、灵敏诊断RA的目的。第一方面，本专利技术的目的在于提供一种检测试剂盒，所述试剂盒包括包被有复合抗体的固相载体，所述复合抗体为抗瓜氨酸化纤维蛋白抗体、抗瓜氨酸化波形蛋白抗体、抗瓜氨酸化α-烯纯化酶抗体或抗瓜氨酸化II型胶原抗体中任意一种或至少两种的组合。所述组合例如可以是抗瓜氨酸化纤维蛋白抗体和抗瓜氨酸化波形蛋白抗体的组合，抗瓜氨酸化纤维蛋白抗体和抗瓜氨酸化α-烯纯化酶抗体的组合，抗瓜氨酸化纤维蛋白抗体和抗瓜氨酸化II型胶原抗体的组合，抗瓜氨酸化波形蛋白抗体和抗瓜氨酸化α-烯纯化酶抗体的组合，抗瓜氨酸化波形蛋白抗体和抗瓜氨酸化II型胶原抗体的组合，抗瓜氨酸化α-烯纯化酶抗体和抗瓜氨酸化II型胶原抗体的组合，抗瓜氨酸化纤维蛋白抗体、抗瓜氨酸化波形蛋白抗体和抗瓜氨酸化α-烯纯化酶抗体的组合，抗瓜氨酸化纤维蛋白抗体、抗瓜氨酸化波形蛋白抗体和抗瓜氨酸化II型胶原抗体的组合，抗瓜氨酸化波形蛋白抗体、抗瓜氨酸化α-烯纯化酶抗体和抗瓜氨酸化II型胶原抗体的组合或抗瓜氨酸化纤维蛋白抗体、抗瓜氨酸化波形蛋白抗体、抗瓜氨酸化α-烯纯化酶抗体和抗瓜氨酸化II型胶原抗体的组合，所述复合抗体为抗瓜氨酸化纤维蛋白抗体、抗瓜氨酸化波形蛋白抗体、抗瓜氨酸化α-烯纯化酶抗体或抗瓜氨酸化II型胶原抗体中至少两种的组合，优选为抗瓜氨酸化纤维蛋白抗体、抗瓜氨酸化波形蛋白抗体、抗瓜氨酸化α-烯纯化酶抗体和抗瓜氨酸化II型胶原抗体的组合。本专利技术中，专利技术人通过大量的实验发现你，特异的选择抗瓜氨酸化纤维蛋白抗体、抗瓜氨酸化波形蛋白抗体、抗瓜氨酸化α-烯纯化酶抗体或抗瓜氨酸化II型胶原抗体中的任意一种或至少两种的组合就能够准确的检测类风湿关节炎，尤其采用这四种瓜氨酸化抗体的组合能够进一步提高检测的准确度。优选地，所述抗瓜氨酸化纤维蛋白抗体的工作质量浓度为0.5-50μg/mL，例如可以是0.5μg/mL、0.8μg/mL、1.0μg/mL、1.2μg/mL、1.6μg/mL、1.8μg/mL、2μg/mL、5μg/mL、8μg/mL、10μg/mL、12μg/mL、14μg/mL、16μg/mL、18μg/mL、20μg/mL、22μg/mL、30μg/mL、40μg/mL、42μg/mL、46μg/mL、48μg/mL或50μg/mL，优选为1-20μg/mL。优选地，所述抗瓜氨酸化波形蛋白抗体的工作质量浓度为0.5-50μg/mL，例如可以是0.5μg/mL、0.8μg/mL、1.0μg/mL、1.2μg/mL、1.6μg/mL、1.8μg/mL、2μg/mL、5μg/mL、8μg/mL、10μg/mL、12μg/mL、14μg/mL、16μg/mL、18μg/mL、20μg/mL、22μg/mL、30μg/mL、40μg/mL、42μg/mL、46μg/mL、48μg/mL或50μg/mL，优选为1-20μg/mL。优选地，所述抗瓜氨酸化α-烯纯化酶抗体的工作质量浓度为0.5-50μg/mL，例如可以是0.5μg/mL、0.8μg/mL、1.0μg/mL、1.2μg/mL、1.6μg/mL、1.8μg/mL、2μg/mL、5μg/mL、8μg/mL、10μg/mL、12μg/mL、14μg/mL、16μg/mL、18μg/mL、20μg/mL、22μg/mL、30μg/mL、40μg/mL、42μg/mL、46μg/mL、48μg/mL或50μg/mL，优选为1-20μg/mL。优选地，所述抗瓜氨酸化II型胶原抗体的工作质量浓度为0.5-50μg/mL，例如可以是0.5μg/mL、0.8μg/mL、1.0μg/mL、1.2μg/mL、1.6μg/mL、1.8μg/mL、2μg/mL、5μg/mL、8μg/mL、10μg/mL、12μg/mL、14μg/mL、16μg/mL、18μg/mL、20μg/mL、22μg/mL、30μg/mL、40μg/mL、42μg/mL、46μg/mL、48μg/mL或50μg/mL，优选为1-20μg/mL。优选地，所述包被包括直接包被和/或间接包被，例如可以是直接包被、间接包被或直接包被和间接包被，优选为直接包被；优选地，所述间接包被为通过生物素与链霉亲和素的特异性反应将抗体间接固定于固相载体上。优选地，所述固相载体为酶标板、磁珠、微球、亲和膜或液相芯片中的任意一种或至少两种的组合。优选地，所述检测试剂盒还包括第一抗体；优选地，所述第一抗体包括抗纤维蛋白原抗体、抗波形蛋白抗体、抗胶原抗体或α-烯醇化酶抗体中的任意一种或至少两种的组合，例如可以是抗纤维蛋白原抗体和抗波形蛋白抗体的组合，抗波形蛋白抗体和抗胶原抗体的组合，抗胶原抗体和α-烯醇化酶抗体的组合或抗纤维蛋白原抗体、抗波形蛋白抗体、抗胶原抗体和α-烯醇化酶抗体的组合。优选地，所述第一抗体的工作质量浓度为0.1-10μg/ml，例如可以是0.1μg/ml、0.本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括固相载体，所述固相载体包被有复合抗体，所述复合抗体为抗瓜氨酸化纤维蛋白抗体、抗瓜氨酸化波形蛋白抗体、抗瓜氨酸化α‑烯纯化酶抗体或抗瓜氨酸化II型胶原抗体中的任意一种或至少两种的组合。

【技术特征摘要】
1.一种检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括固相载体，所述固相载体包被有复合抗体，所述复合抗体为抗瓜氨酸化纤维蛋白抗体、抗瓜氨酸化波形蛋白抗体、抗瓜氨酸化α-烯纯化酶抗体或抗瓜氨酸化II型胶原抗体中的任意一种或至少两种的组合。2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述复合抗体为抗瓜氨酸化纤维蛋白抗体、抗瓜氨酸化波形蛋白抗体、抗瓜氨酸化α-烯纯化酶抗体或抗瓜氨酸化II型胶原抗体中至少两种的组合，优选为抗瓜氨酸化纤维蛋白抗体、抗瓜氨酸化波形蛋白抗体、抗瓜氨酸化α-烯纯化酶抗体和抗瓜氨酸化II型胶原抗体的组合。3.根据权利要求1或2所述的检测试剂盒，其特征在于，所述抗瓜氨酸化纤维蛋白抗体的工作质量浓度为0.5-50μg/mL，优选为1-20μg/mL；优选地，所述抗瓜氨酸化波形蛋白抗体的工作质量浓度为0.5-50μg/mL，优选为1-20μg/mL；优选地，所述抗瓜氨酸化α-烯纯化酶抗体的工作质量浓度为0.5-50μg/mL，优选为1-20μg/mL；优选地，所述抗瓜氨酸化II型胶原抗体的工作质量浓度为0.5-50μg/mL，优选为1-20μg/mL。4.根据权利要求1-3中任一项所述的检测试剂盒，其特征在于，所述包被包括直接包被和/或间接包被，优选为直接包被；优选地，所述间接包被为通过生物素与链霉亲和素的特异性反应将抗体间接固定于固相载体上。5.根据权利要求1-4中任一项所述的检测试剂盒，其特征在于，所述固相载体为酶标板、磁珠、微球、亲和膜或液相芯片中的任意一种或至少两种的组合。6.根据权利要求1-5中任一项所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括第一抗体；优选地，所述第一抗体包括抗纤维蛋白原抗体、抗波形蛋白抗体、抗胶原抗体或α-烯醇化酶抗体中的任意一...

【专利技术属性】
技术研发人员：茹志伟，楼建荣，杨翔，
申请(专利权)人：广州市雷德生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44