包含LG12进化枝蛋白酶变体的组合物和方法技术

本披露提供了LG12进化枝酶变体、包含这些酶变体的组合物、和使用这些酶和组合物的方法、以及编码这些酶的多核苷酸、包含这些多核苷酸的载体和用这样的载体转化的宿主细胞。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含LG12进化枝蛋白酶变体的组合物和方法丝氨酸蛋白酶是一类在蛋白质中切割肽键的酶。丝氨酸蛋白酶在活性位点含有亲核丝氨酸残基。枯草杆菌蛋白酶是丝氨酸蛋白酶的大家族，并且虽然在工业酶领域中很久以来就已经知道枯草杆菌蛋白酶，但是仍然需要适合于特定条件和用途的工程化蛋白酶。本披露尤其提供了LG12进化枝蛋白酶(包括变体LG12进化枝蛋白酶)、编码它们的核酸、以及与其生产和使用相关的组合物和方法。在一些实施例中，本专利技术是包含至少一种本文所披露的变体的组合物。在一些实施例中，本专利技术是使用包含至少一种本文所披露的变体的清洁组合物的清洁方法。本文所披露的变体、组合物和方法涉及通过常规分子生物学技术产生的蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段(参见例如，Sambrook等人，Cloning：ColdSpringHarborLaboratoryPress[分子克隆：冷泉港实验室出版社])。一些实施例涉及包含如下氨基酸序列的蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段，该氨基酸序列在选自以下的一个或多个位置处包含两个或更多个取代：(i)1、3、7、9、19、24、27、30、38、40、43、45、48、52、53、57、72、76、78、79、86、87、88、89、90、91、93、97、99、100、101、103、104、106、107、111、114、115、116、117、118、120、122、123、124、128、129、130、131、133、134、136、139、140、141、143、144、145、147、148、149、150、153、156、158、159、160、166、181、182、185、188、194、209、212、213、215、216、217、222、224、228、234、236、238、240、242、245、246、248、251、252、256、265、267、269、270、271、272、273、和275；(ii)1、3、9、19、24、27、30、38、40、43、45、48、52、53、57、72、76、78、79、86、87、88、89、90、91、93、97、99、100、101、103、104、106、107、111、114、115、116、117、118、120、122、123、124、128、129、130、131、133、134、136、139、140、141、143、144、145、147、148、149、150、153、156、158、159、160、166、181、182、185、188、194、209、212、213、215、216、217、222、224、228、234、236、238、240、242、245、246、248、251、252、256、265、267、271、272、和275；(iii)1、7、9、27、38、40、45、48、52、53、76、78、91、100、114、117、118、122、128、129、130、140、147、149、156、158、159、160、166、181、182、194、209、217、222、228、234、236、238、245、248、256、269、270、271、272、273、和275；(iv)1、24、30、38、40、48、52、53、76、78、79、86、87、88、89、91、93、97、100、103、104、106、111、114、115、116、117、118、120、122、124、128、129、130、131、133、134、136、139、141、143、144、147、148、149、150、153、156、158、159、166、182、185、194、209、212、213、216、217、222、224、236、238、248、251、252、256、272、和275；(v)1、24、30、38、40、52、53、76、78、79、86、87、88、89、93、97、100、103、104、106、111、114、115、116、117、118、120、122、124、128、129、131、133、134、136、139、141、143、144、147、148、149、150、153、156、158、159、166、182、185、194、209、212、213、216、217、222、224、236、238、248、251、252、256、272、和275；或(vi)1、38、40、48、52、53、76、91、114、117、118、128、129、130、147、149、156、158、159、166、182、217、238、248、256、和272；其中该变体或重组多肽或其活性片段的氨基酸位置通过与SEQIDNO:10的氨基酸序列相对应来编号。另一个实施例涉及包含如下氨基酸序列的蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段，该氨基酸序列在选自以下的一个或多个位置处包含两个或更多个取代：(i)52、53、76、86、97、103、104、106、111、114、115、116、118、120、122、124、128、129、130、131、134、136、139、141、143、144、147、148、150、156、158、159、166、217、248、和272；(ii)53、76、106、128、131、134、139、158、159、166、217、248、和272；(iii)52、53、76、106、118、128、129、130、131、134、139、156、158、166、217、248、和272；(iv)52、53、76、128、118、156、158、166、217、和248；(v)53、76、128、158、166、和248；(vi)52、53、76、118、128、156、158、166、217、和248；或(vii)52-129、53-166、76-166、166-159、166-272、53-76-166、53-118-166、53-166-272、76-118-166、76-166-248、76-166-256、和76-166-272；其中该变体或重组多肽或其活性片段的氨基酸位置通过与SEQIDNO:10的氨基酸序列相对应来编号。仍进一步的实施例涉及包含如下氨基酸序列的蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段，该氨基酸序列包含两个或更多个选自以下各项的取代：(i)A1X、T3X、G7X、P9X、A19X、S24X、K27X、I30X、N38X、A40X、N43X、K45X、A48X、S52X、G53X、A57X、V72X、N76X、T78X、T79X、Y86X、N87X、A88X、D89X、L90X、Y91X、V93X、S97X、S99X、G100X、S101X、T103X、L104X、G106X、I107X、I111X、S114X、I115X、S116X、N117X、G118X、N120X、I122X、N123X、M124X、G128X、S129X、S130X、G131X、T133X、A134X、Q136X、C139X本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种包含如下氨基酸序列的蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段，所述氨基酸序列在选自以下的一个或多个位置处包含两个或更多个取代：(i)1，3，7，9，19，24，27，30，38，40，43，45，48，52，53，57，72，76，78，79，86，87，88，89，90，91，93，97，99，100，101，103，104，106，107，111，114，115，116，117，118，120，122，123，124，128，129，130，131，133，134，136，139，140，141，143，144，145，147，148，149，150，153，156，158，159，160，166，181，182，185，188，194，209，212，213，215，216，217，222，224，228，234，236，238，240，242，245，246，248，251，252，256，265，267，269，270，271，272，273，和275；(ii)1，3，9，19，24，27，30，38，40，43，45，48，52，53，57，72，76，78，79，86，87，88，89，90，91，93，97，99，100，101，103，104，106，107，111，114，115，116，117，118，120，122，123，124，128，129，130，131，133，134，136，139，140，141，143，144，145，147，148，149，150，153，156，158，159，160，166，181，182，185，188，194，209，212，213，215，216，217，222，224，228，234，236，238，240，242，245，246，248，251，252，256，265，267，271，272，和275；(iii)1，7，9，27，38，40，45，48，52，53，76，78，91，100，114，117，118，122，128，129，130，140，147，149，156，158，159，160，166，181，182，194，209，217，222，228，234，236，238，245，248，256，269，270，271，272，273，和275；(iv)1，24，30，38，40，48，52，53，76，78，79，86，87，88，89，91，93，97，100，103，104，106，111，114，115，116，117，118，120，122，124，128，129，130，131，133，134，136，139，141，143，144，147，148，149，150，153，156，158，159，166，182，185，194，209，212，213，216，217，222，224，236，238，248，251，252，256，272，和275；(v)1，24，30，38，40，52，53，76，78，79，86，87，88，89，93，97，100，103，104，106，111，114，115，116，117，118，120，122，124，128，129，131，133，134，136，139，141，143，144，147，148，149，150，153，156，158，159，166，182，185，194，209，212，213，216，217，222，224，236，238，248，251，252，256，272，和275；或(vi)1，38，40，48，52，53，76，91，114，117，118，128，129，130，147，149，156，158，159，166，182，217，238，248，256，和272；其中所述变体或重组多肽或其活性片段的氨基酸位置通过与SEQ ID NO：10的氨基酸序列相对应来编号。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.03.12 US 62/131,8341.一种包含如下氨基酸序列的蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段，所述氨基酸序列在选自以下的一个或多个位置处包含两个或更多个取代：(i)1，3，7，9，19，24，27，30，38，40，43，45，48，52，53，57，72，76，78，79，86，87，88，89，90，91，93，97，99，100，101，103，104，106，107，111，114，115，116，117，118，120，122，123，124，128，129，130，131，133，134，136，139，140，141，143，144，145，147，148，149，150，153，156，158，159，160，166，181，182，185，188，194，209，212，213，215，216，217，222，224，228，234，236，238，240，242，245，246，248，251，252，256，265，267，269，270，271，272，273，和275；(ii)1，3，9，19，24，27，30，38，40，43，45，48，52，53，57，72，76，78，79，86，87，88，89，90，91，93，97，99，100，101，103，104，106，107，111，114，115，116，117，118，120，122，123，124，128，129，130，131，133，134，136，139，140，141，143，144，145，147，148，149，150，153，156，158，159，160，166，181，182，185，188，194，209，212，213，215，216，217，222，224，228，234，236，238，240，242，245，246，248，251，252，256，265，267，271，272，和275；(iii)1，7，9，27，38，40，45，48，52，53，76，78，91，100，114，117，118，122，128，129，130，140，147，149，156，158，159，160，166，181，182，194，209，217，222，228，234，236，238，245，248，256，269，270，271，272，273，和275；(iv)1，24，30，38，40，48，52，53，76，78，79，86，87，88，89，91，93，97，100，103，104，106，111，114，115，116，117，118，120，122，124，128，129，130，131，133，134，136，139，141，143，144，147，148，149，150，153，156，158，159，166，182，185，194，209，212，213，216，217，222，224，236，238，248，251，252，256，272，和275；(v)1，24，30，38，40，52，53，76，78，79，86，87，88，89，93，97，100，103，104，106，111，114，115，116，117，118，120，122，124，128，129，131，133，134，136，139，141，143，144，147，148，149，150，153，156，158，159，166，182，185，194，209，212，213，216，217，222，224，236，238，248，251，252，256，272，和275；或(vi)1，38，40，48，52，53，76，91，114，117，118，128，129，130，147，149，156，158，159，166，182，217，238，248，256，和272；其中所述变体或重组多肽或其活性片段的氨基酸位置通过与SEQIDNO：10的氨基酸序列相对应来编号。2.如前述权利要求中任一项所述的蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段，其中所述变体或重组多肽或其活性片段包含如下氨基酸序列，所述氨基酸序列包含两个或更多个选自以下的取代：(i)A1X，T3X，G7X，P9X，A19X，S24X，K27X，I30X，N38X，A40X，N43X，K45X，A48X，S52X，G53X，A57X，V72X，N76X，T78X，T79X，Y86X，N87X，A88X，D89X，L90X，Y91X，V93X，S97X，S99X，G100X，S101X，T103X，L104X，G106X，I107X，1111X，S114X，I115X，S116X，N117X，G118X，N120X，I122X，N123X，M124X，G128X，S129X，S130X，G131X，T133X，A134X，Q136X，C139X，N140X，N141X，Y143X，N144X，R145X，1147X，V148X，V149X，I150X，A153X，S156X，S158X，S159X，G160X，G166X，S181X，S182X，T185X，S188X，S194X，T209X，N212X，N213X，A215X，S216X，F217X，M222X，A224X，A228X，1234X，A236X，Y238X，S240X，T242X，Q245X，I246X，E248X，K251X，N252X，N256X，K265X，V267X，N269X，V270X，E271X，S272X，A273X，和Q275X；(ii)A1X，T3X，P9X，A19X，S24X，K27X，I30X，N38X，A40X，N43X，K45X，A48X，S52X，G53X，A57X，V72X，N76X，T78X，T79X，Y86X，N87X，A88X，D89X，L90X，Y91X，V93X，S97X，S99X，G100X，S101X，T103X，L104X，G106X，I107X，I111X，S114X，I115X，S116X，N117X，G118X，N120X，I122X，N123X，M124X，G128X，S129X，S130X，G131X，T133X，A134X，Q136X，C139X，N140X，N141X，Y143X，N144X，R145X，I147X，V148X，V149X，I150X，A153X，S156X，S158X，S159X，G160X，G166X，S181X，S182X，T185X，S188X，S194X，T209X，N212X，N213X，A215X，S216X，F217X，M222X，A224X，A228X，1234X，A236X，Y238X，S240X，T242X，Q245X，I246X，E248X，K251X，N252X，N256X，K265X，V267X，E271X，S272X，和Q275X；(iii)A1X，G7X，P9X，K27X，N38X，A40X，K45X，A48X，S52X，G53X，N76X，T78X，Y91X，G100X，S114X，N117X，G118X，I122X，G128X，S129X，S130X，N140X，I147X，V149X，S156X，S158X，S159X，G160X，G166X，S181X，S182X，S194X，T209X，F217X，M222X，A228X，I234X，A236X，Y238X，Q245X，E248X，N256X，N269X，V270X，E271X，S272X，A273X，和Q275X；(iv)A1X，S24X，130X，N38X，A40X，A48X，S52X，G53X，N76X，T78X，T79X，Y86X，N87X，A88X，D89X，Y91X，V93X，S97X，G100X，T103X，L104X，G106X，1111X，S114X，I115X，S116X，N117X，G118X，N120X，I122X，M124X，G128X，S129X，S130X，G131X，T133X，A134X，Q136X，C139X，N141X，Y143X，N144X，I147X，V148X，V149X，1150X，A153X，S156X，S158X，S159X，G166X，S182X，T185X，S194X，T209X，N212X，N213X，S216X，F217X，M222X，A224X，A236X，Y238X，E248X，K251X，N252X，N256X，S272X，和Q275X；(v)A1X，S24X，I30X，N38X，A40X，S52X，G53X，N76X，T78X，T79X，Y86X，N87X，A88X，D89X，V93X，S97X，G100X，T103X，L104X，G106X，I111X，S114X，I115X，S116X，N117X，G118X，N120X，1122X，M124X，G128X，S129X，G131X，T133X，A134X，Q136X，C139X，N141X，Y143X，N144X，I147X，V148X，V149X，I150X，A153X，S156X，S158X，S159X，G166X，S182X，T185X，S194X，T209X，N212X，N213X，S216X，F217X，M222X，A224X，A236X，Y238X，E248X，K251X，N252X，N256X，S272X，和Q275X；或(vi)A1X，N38X，A40X，A48X，S52X，G53X，N76X，Y91X，S114X，N117X，G118X，G128X，S129X，S130X，1147X，V149X，S156X，S158X，S159X，G166X，S182X，F217X，Y238X，E248X，N256X，和S272X：其中X是任何氨基酸，并且所述变体或重组多肽或其活性片段的氨基酸位置通过与SEQIDNO：10的氨基酸序列相对应来编号。3.如前述权利要求中任一项所述的蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段，其中所述变体或重组多肽或其活性片段包含如下氨基酸序列，所述氨基酸序列包含两个或更多个选自以下的取代：(i)X1G，X1T，X3E，X3V，X7C，X9I，X9T，X9V，X19R，X24R，X24T，X27S，X27T，X30V，X38A，X38Q，X38T，X40D，X40E，X40L，X40V，X43D，X43H，X43L，X43S，X45Q，X45R，X48E，X48Q，X52A，X52N，X52Q，X52T，X53D，X53E，X53N，X57P，X72A，X76D，X78A，X78D，X78G，X78S，X79I，X86P，X87S，X88V，X89E，X89S，X90P，X91H，X93T，X97G，X99L，X100A，X100K，X101T，X103E，X103S，X104V，X106S，X107T，X107V，X111L，X114A，X114T，X115G，X116E，X116N，X117E，X117S，X118R，X120H，X122A，X123D，X124L，X128A，X128D，X128E，X128H，X128K，X128M，X128N，X128Q，X128S，X128Y，X129D，X129E，X129G，X129H，X129I，X129K，X129L，X129M，X129N，X129P，X129Q，X129R，X129T；X129V，X129Y，X130A，X130E，X130F，X130G，X130H，X130I，X130L，X130M，X130N，X130Q，X130R，X130T，X130V，X130W，X130Y，X131P，X133A，X133D，X133V，X134T，X136E，X139V，X140D，X140Y，X141S，X143T，X144S，X145N，X145W，X147A，X147V，X148L，X149G，X149L，X149N，X149S，X150V，X153S，X156A，X156H，X156N，X158T，X158V，X159D，X159E，X159N，X159Q，X160D，X166A，X166D，X166H，X166N，X166S，X166Y，X181A，X181N，X182E，X185Q，X188Y，X194P，X209F，X209V，X209Y，X212S，X213T，X215D，X215E，X216T，X217L，X217R，X222L，X224T，X228S，X234V，X236N，X236Q，X238F，X240F，X242S，X245A，X245N，X246V，X248K，X248N，X251R，X251S，X252S，X256E，X256K，X256P，X256R，X256Y，X265S，X267N，X269K，X270C，X271F，X271W，X272K，X272N，X272Q，X273V，X275H，和X275R；(ii)X1G，X1T，X3E，X3V，X91，X9T，X9V，X19R，X24R，X24T，X27S，X27T，X30V，X38A，X38Q，X38T，X40D，X40E，X40L，X40V，X43D，X43H，X43L，X43S，X45Q，X45R，X48E，X48Q，X52A，X52N，X52Q，X52T，X53D，X53E，X53N，X57P，X72A，X76D，X78A，X78D，X78G，X78S，X79I，X86P，X87S，X88V，X89E，X89S，X90P，X91H，X93T，X97G，X99L，X100A，X100K，X101T，X103E，X103S，X104V，X106S，X107T，X107V，X111L，X114A，X114T，X115G，X116E，X116N，X117E，X117S，X118R，X120H，X122A，X123D，X124L，X128A，X128D，X128E，X128H，X128K，X128M，X128N，X128Q，X128S，X128Y，X129D，X129E，X129G，X129H，X129I，X129K，X129L，X129M，X129N，X129P，X129Q，X129R，X129T，X129V，X129Y，X130A，X130E，X130F，X130G，X130H，X130I，X130L，X130M，X130N，X130Q，X130R，X130T，X130V，X130W，X130Y，X131P，X133A，X133D，X133V，X134T，X136E，X139V，X140D，X140Y，X141S，X143T，X144S，X145N，X145W，X147A，X147V，X148L，X149G，X149L，X149N，X149S，X150V，X153S，X156A，X156H，X156N，X158T，X158V，X159D，X159E，X159N，X159Q，X160D，X166A，X166D，X166H，X166N，X166S，X166Y，X181A，X181N，X182E，X185Q，X188Y，X194P，X209F，X209V，X209Y，X212S，X213T，X215D，X215E，X216T，X217L，X217R，X222L，X224T，X228S，X234V，X236N，X236Q，X238F，X240F，X242S，X245A，X245N，X246V，X248K，X248N，X251R，X251S，X252S，X256E，X256K，X256P，X256R，X256Y，X265S，X267N，X271F，X271W，X272K，X272N，X272Q，X275H，和X275R；(iii)X1G，X7C，X9T，X27M，X38Q，X38T，X40D，X45Q，X45R，X48E，X48Q，X52F，X52Q，X52T，X53D，X53E，X53Y，X76D，X78A，X91H，X100A，X114T，X117S，X118R，X122V，X128A，X128D，X128E，X128H，X128K，X128L，X128M，X128N，X128Q，X128R，X128S，X128T，X128V，X128W，X128Y，X129D，X129E，X129F，X129G，X129H，X1291，X129K，X129L，X129M，X129N，X129P，X129Q，X129R，X129T，X129V，X129Y，X130A，X130D，X130E，X130F，X130G，X130H，X1301，X130L，X130M，X130N，X130Q，X130R，X130T，X130V，X130W，X130Y，X140D，X147A，X149G，X156D，X156H，X156N，X156T，X158T，X158V，X159D，X159N，X160D，X166D，X166H，X166Y，X181N，X182E，X194P，X209V，X217R，X222L，X228S，X234V，X236N，X236Q，X238F，X245A，X248D，X248K，X248N，X256E，X256P，X256R，X269K，X270C，X271G，X272K，X272Q，X273V，X275R，和X275Y；(iv)X1G，X1T，X24R，X24T，X30V，X38A，X38Q，X38T，X40D，X40E，X40L，X40V，X48Q，X52A，X52N，X52Q，X52T，X53D，X53E，X53N，X76D，X78A，X78D，X78G，X78S，X79I，X86P，X87S，X88V，X89E，X91H，X93T，X97G，X100A，X100K，X103E，X103S，X104V，X106S，X111L，X114A，X114T，X115G，X116E，X116N，X117E，X117S，X118R，X120H，X122A，X124L，X128A，X128D，X128E，X128H，X128K，X128M，X128N，X128Q，X128S，X128Y，X129D，X129E，X129G，X129H，X1291，X129K，X129L，X129M，X129N，X129P，X129Q，X129R，X129T，X129V，X129Y，X130F，X130H，X130I，X130Y，X131P，X133A，X133D，X133V，X134T，X136E，X139V，X141S，X143T，X144S，X147A，X147V，X148L，X149G，X149L，X149N，X149S，X150V，X153S，X156A，X156H，X156N，X158T，X158V，X159D，X159E，X159N，X159Q，X166A，X166D，X166H，X166N，X166S，X166Y，X182E，X185Q，X194P，X209F，X209V，X209Y，X212S，X213T，X216T，X217L，X217R，X222L，X224T，X236N，X236Q，X238F，X248K，X248N，X251R，X251S，X252S，X256E，X256K，X256P，X256R，X256Y，X272K，X272N，X272Q，X275H，和X275R；(v)X1G，X1T，X24R，X24T，X30V，X38A，X38Q，X38T，X40D，X40E，X40L，X40V，X52A，X52N，X52Q，X52T，X53D，X53E，X53N，X76D，X78A，X78D，X78G，X78S，X79I，X86P，X87S，X88V，X89E，X93T，X97G，X100A，X100K，X103E，X103S，X104V，X106S，X111L，X114A，X114T，X115G，X116E，X116N，X117E，X117S，X118R，X120H，X122A，X124L，X128A，X128D，X128E，X128H，X128K，X128M，X128N，X128Q，X128S，X128Y，X129D，X129E，X129G，X129H，X129I，X129K，X129L，X129M，X129N，X129P，X129Q，X129R，X129T，X129V，X129Y，X131P，X133A，X133D，X133V，X134T，X136E，X139V，X141S，X143T，X144S，X147A，X147V，X148L，X149G，X149L，X149N，X149S，X150V，X153S，X156A，X156H，X156N，X158T，X158V，X159D，X159E，X159N，X159Q，X166A，X166D，X166H，X166N，X166S，X166Y，X182E，X185Q，X194P，X209F，X209V，X209Y，X212S，X213T，X216T，X217L，X217R，X222L，X224T，X236N，X236Q，X238F，X248K，X248N，X251R，X251S，X252S，X256E，X256K，X256P，X256R，X256Y，X272K，X272N，X272Q，X275H，和X275R；或(vi)X1G，X38Q，X40D，X48Q，X52F，X52T，X53E，X53Y，X76D，X91H，X114T，X117S，X118R，X128D，X128M，X128V，X129F，X129M，X129R，X129V，X130F，X130H，X1301，X130Y，X147A，X149G，X156N，X158T，X159N，X166D，X166H，X182E，X217R，X238F，X248N，X256E，X256P，X256R，和X272K；其中X是任何氨基酸，并且所述变体或重组多肽或其活性片段的氨基酸位置通过与SEQIDNO：10的氨基酸序列相对应来编号。4.如前述权利要求中任一项所述的蛋白酶变体、或重组多肽或其活性片段，其中所述变体或重组多肽或其活性片段包含如下氨基酸序列，所述氨基酸序列包含两个或更多个选自以下的取代：(i)A001G，A001T，T003E，T003V，G007C，P009I，P009T，P009V，A019R，S024R，S024T，K027S，K027T，1030V，N038A，N038Q，N038T，A040D，A040E，A040L，A040V，N043D，N043H，N043L，N043S，K045Q，K045R，A048E，A048Q，S052A，S052N，S052Q，S052T，G053D，G053E，G053N，A057P，V072A，N076D，T078A，T078D，T078G，T078S，T0791，Y086P，N087S，A088V.D089E，D089S，L090P，Y091H，V093T，S097G，S099L，G100A，G100K，S101T，T103E，T103S，L104V，G106S，I107T，I107V，I111L，S114A，S114T，I115G，S116E，S116N，N117E，N117S，G118R，N120H，1122A，N123D，M124L，G128A，G128D，G128E，G128H，G128K，G128M，G128N，G128Q，G128S，G128Y，S129D，S129E，S129G，S129H，S129I，S129K，S129L，S129M，S129N，S129P，S129Q，S129R，S129T，S129V，S129Y，S130A，S130E，S130F，S130G，S130H，S130I，S130L，S130M，S130N，S130Q，S130R，S130T，S130V，S130W，S130Y，G131P，T133A，T133D，T133V，A134T，Q136E，C139V，N140D，N140Y，N141S，Y143T，N144S，R145N，R145W，I147A，I147V，V148L，V149G，V149L，V149N，V149S，I150V，A153S，S156A，S156H，S156N，S158T，S158V，S159D，S159E，S159N，S159Q，G160D，G166A，G166D，G166H，G166N，G166S，G166Y，S181A，S181N，S182E，T185Q，S188Y，S194P，T209F，T209V，T209Y，N212S，N213T，A215D，A215E，S216T，F217L，F217R，M222L，A224T，A228S，I234V，A236N，A236Q，Y238F，S240F，T242S，Q245A，Q245N，1246V，E248K，E248N，K251R，K251S，N252S，N256E，N256K，N256P，N256R，N256Y，K265S，V267N，N269K，V270C，E271F，E271W，S272K，S272N，S272Q，A273V，Q275H，和Q275R；(ii)A001G，A001T，T003E，T003V，P009I，P009T，P009V，A019R，S024R，S024T，K027S，K027T，1030V，N038A，N038Q，N038T，A040D，A040E，A040L，A040V，N043D，N043H，N043L，N043S，K045Q，K045R，A048E，A048Q，S052A，S052N，S052Q，S052T，G053D，G053E，G053N，A057P，V072A，N076D，T078A，T078D，T078G，T078S，T079I，Y086P，N087S，A088V，D089E，D089S，L090P，Y091H，V093T，S097G，S099L，G100A，G100K，S101T，T103E，T103S，L104V，G106S，1107T，I107V，I111L，S114A，S114T，I115G，S116E，S116N，N117E，N117S，G118R，N120H，I122A，N123D，M124L，G128A，G128D，G128E，G128H，G128K，G128M，G128N，G128Q，G128S，G128Y，S129D，S129E，S129G，S129H，S1291，S129K，S129L，S129M，S129N，S129P，S129Q，S129R，S129T，S129V，S129Y，S130A，S130E，S130F，S130G，S130H，S130I，S130L，S130M，S130N，S130Q，S130R，S130T，S130V，S130W，S130Y，G131P，T133A，T133D，T133V，A134T，Q136E，C139V，N140D，N140Y，N141S，Y143T，N144S，R145N，R145W，I147A，I147V，V148L，V149G，V149L，V149N，V149S，I150V，A153S，S156A，S156H，S156N，S158T，S158V，S159D，S159E，S159N，S159Q，G160D，G166A，G166D，G166H，G166N，G166S，G166Y，S181A，S181N，S182E，T185Q，S188Y，S194P，T209F，T209V，T209Y，N212S，N213T，A215D，A215E，S216T，F217L，F217R，M222L，A224T，A228S，1234V，A236N，A236Q，Y238F，S240F，T242S，Q245A，Q245N，I246V，E248K，E248N，K251R，K251S，N252S，N256E，N256K，N256P，N256R，N256Y，K265S，V267N，E271F，E271W，S272K，S272N，S272Q，Q275H，和Q275R；(iii)A001G，G007C，P009T，K027M，N038Q，N038T，A040D，K045Q，K045R，A048E，A048Q，S052F，S052Q，S052T，G053D，G053E，G053Y，N076D，T078A，Y091H，G100A，S114T，N117S，G118R，1122V，G128A，G128D，G128E，G128H，G128K，G128L，G128M，G128N，G128Q，G128R，G128S，G128T，G128V，G128W，G128Y，S129D，S129E，S129F，S129G，S129H，S1291，S129K，S129L，S129M，S129N，S129P，S129Q，S129R，...

【专利技术属性】
技术研发人员：H·穆尔德，J·V·米勒，F·格德埃格伯，D·A·埃斯特尔，K·奥古斯汀，L·M·贝比，R·R·博特，M·C·斯科特谢尔，J·姚，
申请(专利权)人：丹尼斯科美国公司，
类型：发明
国别省市：美国,US