【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本公开总体上涉及细菌学、微生物学、遗传学、分子生物学、酶学、工业蛋白质生产等领域。本公开的某些实施例涉及包含增强的蛋白质生产力表型的重组芽孢杆菌属(bacillus)细胞(菌株)、用于构建这样的重组(修饰的)芽孢杆菌属细胞的组合物和方法等。序列表的引用命名为“nb41871-us-psp_sequencelisting.txt”的文本文件序列表的电子提交的内容创建于2021年5月13日，并且大小为64kb，将其通过引用以其全文特此并入。
技术介绍
1、革兰氏阳性细菌如枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)、地衣芽孢杆菌(bacilluslicheniformis)、解淀粉芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)等由于其优异的发酵特性和高产率(例如，高达25克/升培养物；van dijl和hecker,2013)经常被用作用于产生工业相关蛋白质的微生物工厂。例如，芽孢杆菌属物种宿主细胞因其产生食品、纺织品、衣物洗涤、医疗器械清洁、制药工业等所需的酶(例如，淀粉酶、纤维素酶、甘露聚糖酶、果胶酸裂合酶、蛋白...
【技术保护点】
1.一种重组芽孢杆菌属物种(Bacillus sp.)细胞，其包含引入的与SEQ ID NO:16的核酸序列具有至少85％序列同一性的多核苷酸。
2.如权利要求1所述的重组细胞，其中所述引入的多核苷酸编码与SEQ ID NO:17具有至少85％序列同一性的磷脂酰丝氨酸合酶(PssA)蛋白。
3.如权利要求1所述的重组细胞，其产生目的蛋白(POI)。
4.如权利要求1所述的重组细胞，其中所述引入的多核苷酸是表达盒，所述表达盒包含可操作地连接到下游(3′)可读框(ORF)的上游(5′)启动子，所述ORF编码与SEQ ID NO:17具有...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种重组芽孢杆菌属物种(bacillus sp.)细胞，其包含引入的与seq id no:16的核酸序列具有至少85％序列同一性的多核苷酸。
2.如权利要求1所述的重组细胞，其中所述引入的多核苷酸编码与seq id no:17具有至少85％序列同一性的磷脂酰丝氨酸合酶(pssa)蛋白。
3.如权利要求1所述的重组细胞，其产生目的蛋白(poi)。
4.如权利要求1所述的重组细胞，其中所述引入的多核苷酸是表达盒，所述表达盒包含可操作地连接到下游(3′)可读框(orf)的上游(5′)启动子，所述orf编码与seq id no:17具有至少85％序列同一性的pssa蛋白；以及任选地包含可操作地连接到上游(5′)orf的下游(3′)终止子序列。
5.如权利要求3所述的重组细胞，其中所述poi是酶。
6.一种重组芽孢杆菌属物种细胞，其衍生自产生目的蛋白(poi)的亲本芽孢杆菌属物种细胞，其中所述重组细胞包含引入的编码与seq id no:17具有至少85％序列同一性的磷脂酰丝氨酸合酶(pssa)蛋白的多核苷酸，并且当在相同条件下培养时，所述重组细胞相对于所述亲本细胞产生增加量的所述poi。
7.如权利要求6所述的重组细胞，其中所述引入的多核苷酸是表达盒，所述表达盒包含可操作地连接到下游(3′)可读框(orf)的上游(5′)启动子，所述orf编码与seq id no:17具有至少85％序列同一性的pssa蛋白；以及任选地包含可操作地连接到上游(5′)orf的下游(3′)终止子序列。
8.如权利要求6所述的重组细胞，其中所述poi是酶。
9.一种重组芽孢杆菌属物种细胞，其衍生自包含编码天然磷脂酰丝氨酸合酶(pssa)蛋白的野生型pssa基因的亲本芽孢杆菌属物种细胞，其中所述重组细胞包含引入的替代所述亲本细胞的野生型pssa基因启动子序列的异源启动子序列。
10.如权利要求9所述的重组细胞，其中相对于所述野生型pssa基因启动子，所述异源启动子使pssa基因表达增加至少1.2倍。
11.如权利要求9所述的重组细胞，其中所述亲本细胞包含编码目的蛋白(poi)的表达盒。
12.如权利要求11所述的重组细胞，当在相同条件下培养时，所述重组细胞相对于所述亲本细胞产生增加量的所述poi。
13.如权利要求11所述的重组细胞，其中所述poi是酶。
14.如权利要求5、8或13中任一项所述的重组细胞，其中所述酶选自由以下组成的组：乙酰酯酶、氨肽酶、淀粉酶、阿拉伯聚糖酶、阿拉伯呋喃糖苷酶、碳酸酐酶、羧肽酶、过氧化氢酶、...
【专利技术属性】
技术研发人员：R·L·弗里希，马臻，H·贺，B·保罗，
申请(专利权)人：丹尼斯科美国公司，
类型：发明
国别省市：
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