重组酵母细胞制造技术

技术编号:41125135 阅读:34 留言:0更新日期:2024-04-30 17:52
公开了一种重组酵母细胞,该重组酵母细胞功能性地表达:a)编码具有NAD+依赖性乙酰化乙醛脱氢酶活性的蛋白质(EC 1.2.1.10)的核酸序列;以及b)编码具有转酮酶活性的蛋白质(EC 2.2.1.1)的核酸序列,其中编码具有转酮酶活性的该蛋白质的该核酸序列的表达在启动子(“TKL启动子”)的控制下,该TKL启动子对转酮酶的厌氧/好氧表达比率为2或更高。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本专利技术涉及一种重组酵母细胞和一种用于生产乙醇的方法,其中使用所述重组酵母细胞。


技术介绍

1、将微生物发酵方法应用于从可再生碳水化合物原料工业生产广泛且快速扩大范围的化合物。尤其是在厌氧发酵方法中,辅因子对nadh/nad+的氧化还原平衡可能对产物产率造成重大限制。这种挑战的示例为在由酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)工业生产例如燃料乙醇时作为主要副产物的甘油的形成,这是需要再氧化在生物合成反应中形成的nadh的直接结果。

2、按体积计,由酿酒酵母生产乙醇是目前工业生物技术中最大的单一发酵方法。已经提出了多种方法以通过基因修饰来改善工业生物技术中使用的生物体的发酵性质。与基于酵母的乙醇生产的化学计量相关的重大挑战是大量的nadh依赖性副产物(诸如甘油)通常作为副产物形成,尤其是在厌氧和氧气受限的条件下或在呼吸以其他方式受限或不存在的条件下。据估计,在典型的工业乙醇工艺中,高达约4wt.%的糖原料被转化为甘油(nissen等人,"anaerobic and aerobic batch cultivations of 本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组酵母细胞,所述重组酵母细胞功能性地表达:

2.根据权利要求1所述的重组酵母细胞,其中所述TKL启动子是选自由以下组成的列表的基因的启动子:FET4、ANB1、YHR048W、DAN1、AAC3、TIR2、DIP5、HEM13、YNR014W、YAR028W、FUN 57、COX5B、OYE2、SUR2、FRDS1、PIS1、LAC1、YGR035C、YAL028W、EUG1、HEM14、ISU2、ERG26、YMR252C、SML1、TIR2、TIR4、TIR3、PAU7、PAU5、YLL064C、YGR294W、DAN3、YIL176C、YGL261C、YOL1...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种重组酵母细胞,所述重组酵母细胞功能性地表达:

2.根据权利要求1所述的重组酵母细胞,其中所述tkl启动子是选自由以下组成的列表的基因的启动子:fet4、anb1、yhr048w、dan1、aac3、tir2、dip5、hem13、ynr014w、yar028w、fun 57、cox5b、oye2、sur2、frds1、pis1、lac1、ygr035c、yal028w、eug1、hem14、isu2、erg26、ymr252c、sml1、tir2、tir4、tir3、pau7、pau5、yll064c、ygr294w、dan3、yil176c、ygl261c、yol161c、pau1、pau6、dan2、ydr542w、yir041w、ykl224c、pau3、yll025w、yor394w、yhl046c、ymr325w、yal068c、ypl282c、pau2、pau4。

3.根据权利要求1或2所述的重组酵母菌株,其中所述tkl启动子是合成的寡核苷酸。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的重组酵母细胞,其中编码具有转酮酶活性的蛋白质的天然核酸序列在所述tkl启动子的控制下。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的重组酵母细胞,其中所述重组酵母细胞功能性地表达编码具有转酮酶活性的蛋白质的异源核酸序列。

6.根据权利要求5所述的重组酵母细胞,其中具有转酮酶活性的所述蛋白质包含以下或由以下组成:

7.根据权利要求5或6所述的重组酵母细胞,其中编码具有转酮酶活性的所述蛋白质的所述异源核酸序列在所述tkl启动子的控制下。

8.根据权利要求5至7中任一项所述的重组酵母细胞,其中所述重组酵母细胞是重组酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)酵母细胞,其功能性地表达编码具有转酮酶活性...

【专利技术属性】
技术研发人员:S·L·罗塞尔阿拉戈特M·L·A·詹森I·M·武格特范卢茨J·P·J·施密茨E·T·范里吉R·M·德容
申请(专利权)人:丹尼斯科美国公司
类型:发明
国别省市:

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