适于实时荧光定量PCR检测假单胞菌PPZ‑1的特异基因片段及其引物与应用制造技术

本发明专利技术涉及适于实时荧光定量PCR检测假单胞菌PPZ‑1的特异基因片段及其引物与应用。适于实时荧光定量PCR检测假单胞菌PPZ‑1的特异基因片段，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；本发明专利技术还涉及利用该特异基因片段设计的检测引物与应用。本发明专利技术可实现对假单胞菌PPZ‑1的分布进行实时跟踪，满足了生物修复监测的需要；经实际检测，在未投加假单胞菌PPZ‑1的污染样品中检测不到背景噪音。

It is suitable for real-time fluorescence quantitative PCR detection of Pseudomonas PPZ 1 specific gene fragments and primer and Application

The present invention relates to suitable for real-time fluorescence quantitative PCR detection of Pseudomonas PPZ 1 specific gene fragments and primer and application. It is suitable for real-time fluorescence quantitative PCR detection of Pseudomonas PPZ 1 specific genes, the nucleotide sequence is shown as SEQ ID NO.1; the invention also relates to the use of primers and application of the specific gene fragment design. The invention can realize the real-time tracking of the distribution of Pseudomonas PPZ 1, to meet the needs of bioremediation monitoring; according to the actual detection, 1 PPZ contaminated samples were not detected in the background noise in the cast without pseudomonas.

【技术实现步骤摘要】
适于实时荧光定量PCR检测假单胞菌PPZ-1的特异基因片段及其引物与应用
本专利技术涉及适于实时荧光定量PCR检测假单胞菌PPZ-1的特异基因片段及其引物与应用，特别涉及针对多环芳烃污染土壤及环境中外源降解菌假单胞菌PPZ-1进行定量、特异检测的基因片段及其引物与应用，属于土壤微生物检测

技术介绍
多环芳烃是环境中广泛存在的一类典型持久性有机污染物，污染范围大、涉及面广，并呈现加重的趋势，治理多环芳烃污染迫在眉睫。国内外学者对多环芳烃污染修复技术开展了大量研究，主要有物理、化学和生物修复，其中生物修复因具有成本低、无二次污染、可大面积应用等优点受到重视。生物强化法是生物修复的重要手段之一，其主体是人为投加有高效降解能力的降解菌或菌群，这些微生物可通过从土著菌中筛选驯化或土著菌物理化学诱变后筛选或通过基因工程构建获得，菌浓度可控，降解能力强。外源降解菌进入污染环境后，会受污染物胁迫，并与土著菌竞争，其存活和增殖情况在整个修复期内呈现动态变化。外源降解菌的丰度与分布直接关系着修复效果。对降解菌进行实时定量的追踪，可准确了解其进入环境后的存活和增殖情况，从而为改进修复时菌剂的投加本文档来自技高网...

【技术保护点】
适于实时荧光定量PCR检测假单胞菌PPZ‑1的特异基因片段，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.适于实时荧光定量PCR检测假单胞菌PPZ-1的特异基因片段，核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。2.实时荧光定量PCR检测假单胞菌PPZ-1的特异引物，特异引物为一对，上游引物核苷酸序列如SEQIDNO.2所示，下游引物核苷酸序列如SEQIDNO.3所示。3.一种利用实时荧光定量PCR检测有机物污染土壤中假单胞菌PPZ-1的方法，其特征在于，步骤如下：(1)使用土壤基因组DNA抽提试剂盒，提取土样DNA；(2)以步骤(1)制备的DNA为模板，利用上述特异引物经实时荧光PCR扩增，制得PCR扩增产物；(3)将扩增产物的Ct值与标准曲线比对，得到假单胞菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：张闻，黄玉杰，王加宁，高永超，郭书海，陈贯虹，郑立稳，王磊磊，季蕾，
申请(专利权)人：山东省科学院生态研究所，
类型：发明
国别省市：山东,37