一种胎盘潜能细胞及其培养方法技术

技术编号:16580486 阅读:80 留言:0更新日期:2017-11-18 04:00
本发明专利技术提供一种胎盘潜能细胞的培养方法,包括如下步骤:(1)在无菌条件下获取胎盘细胞和/或组织;(2)将所述胎盘细胞和/或组织接种在培养基中培养,并在所述培养基中加入细胞生长调节剂,以使胎盘潜能细胞生长使所述胎盘细胞和/或组织进入增殖状态;及(3)培养所述胎盘潜能细胞,使其持续增殖并具有干细胞特性的细胞。本发明专利技术而且找到了能维持、支持、潜能细胞的生命物质,用生命物质代替药物;可以通过组织器官的复制,及时生理性修补组织器官,维持生命器官的平衡,治疗疑难顽症和疾病,使病人摆脱医疗痛苦和损伤;并有望用顺应细胞调控的方法,攻克癌症。

【技术实现步骤摘要】
一种胎盘潜能细胞及其培养方法
本专利技术涉及一种潜能细胞及其培养方法,尤其是一种来源于动物胎盘的潜能细胞及其培养方法。
技术介绍
20世纪末以来,生命科学研究发现:干细胞可在体外培养成人体的各个器官特征的细胞/组织。因此,体外培养“建造器官”,有望在不久的将来进行“自体器官”移植治疗疾病;或者,将干细胞注射在人体的某一部位,让干细胞在局部发挥一个器官的功能,最终实现对疾病的治疗。但在干细胞的培养过程中,体外干细胞培养技术受限于干细胞的迅速老化和自我分化并失去其干细胞的干性。现有技术中,细胞培养是指模拟体内环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使细胞生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。细胞培养的环境要求无毒和无菌是保证细胞生存的首要条件。当细胞放置于体外培养时,与体内相比细胞缺失了对微生物和有毒物的防御能力,一旦被污染或自身代谢物质积累等,可导致细胞死亡。因此在进行培养中,保持细胞生存环境无污染、代谢物及时清除等,是维持细胞生存的基本条件。细胞培养的温度是维持培养细胞旺盛生长的另一条件,培养时要求有恒定适宜的温度。人体细胞培养的标准本文档来自技高网...
一种胎盘潜能细胞及其培养方法

【技术保护点】
一种胎盘潜能细胞的培养方法,其特征在于:包括如下步骤:(1)在无菌条件下获取胎盘细胞和/或组织;(2)将所述胎盘细胞和/或组织接种在培养基中培养,并在所述培养基中加入细胞生长调节剂,以使胎盘潜能细胞生长使所述胎盘细胞和/或组织进入增殖状态。(3)培养所述胎盘潜能细胞,使其持续增殖为具有干细胞特性的细胞。

【技术特征摘要】
1.一种胎盘潜能细胞的培养方法,其特征在于:包括如下步骤:(1)在无菌条件下获取胎盘细胞和/或组织;(2)将所述胎盘细胞和/或组织接种在培养基中培养,并在所述培养基中加入细胞生长调节剂,以使胎盘潜能细胞生长使所述胎盘细胞和/或组织进入增殖状态。(3)培养所述胎盘潜能细胞,使其持续增殖为具有干细胞特性的细胞。2.根据权利要求1所述的胎盘潜能细胞的培养方法,进一步包括步骤:增殖后的细胞在体外诱导的条件下,形成各种组织。3.根据权利要求1所述的胎盘潜能细胞的培养方法,其特征在于:所述步骤(2)中将所述胎盘细胞和/或组织接种在培养基中培养包括如下步骤:(2-A)将所述胎盘组织用至少两种抗生素包括:青霉素和链霉素冷磷酸缓冲液(PBS)连续洗涤至少2次,每次30秒至3分钟;(2-B)将所述胎盘组织置于含双抗的完全培养液中冲洗至少2次,每次30秒至3分钟;(2-C)将所述胎盘组织剪成极小的器官型植块,大小约1-5mm3;(2-D)将植块置于培养板的培养孔中央,间隔约1-5mm,轻轻按压每块植块,使其紧贴培养板的表面;(2-E)沿着培养孔的边缘,每孔中加入约0.1-1.0ml的完全培养液,勿使培养液与植块接触;(2-F)将培养板置于37℃,1-10%CO2培养箱中预孵育0.5-2小时;(2-G)每个培养孔加完全培养液,轻拿轻放,切勿使植块飘起,加细胞生长调节剂。4.根据权利要求1所述的胎盘潜能细胞的培养方法,其特征在于:所述步骤(2)中将所述胎盘细胞和/或组织接种在培养基中培养包括如下步骤:(2-a)为将组织块离散为单个细胞,首先将组织块置入含有至少两种抗生素包括:青霉素和链霉素的4℃预冷的磷酸缓冲盐水(PBS)中,洗涤至少3次,每次30秒至3分钟,然后将此组织块切成1-5mm3的小组织块,再用含有双抗的冷PBS洗涤两遍,将经过洗涤的组织块置入用无菌PBS配制的0.1-0.5%中性蛋白酶溶液或者0.5-2%胶原酶溶液中消化,条件是36.5-37℃恒温振荡,时间0.5-3小时;(2-b)用加样器或者吸管反复吹打组织块,或者将组织块连同消化液一起倾倒至不锈钢滤网上,用注射器栓研磨组织块,直到组织块完全离散,成为单个细胞为止,将此含有细胞和本领域技术人员公知的消化酶溶液的混合物静置2-8分钟,弃去沉淀的大块以及不易消化的结缔组织,将含大量细胞...

【专利技术属性】
技术研发人员:张继岗王灏川
申请(专利权)人:上海聚仁生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:上海,31

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