一种重组的H9N2亚型禽流感病毒样颗粒及其制备方法和用途技术

本发明专利技术提供了一种重组的H9N2 亚型禽流感病毒样颗粒，含有A/ chicken/Shanghai/06/2015(H9N2)的HA蛋白和NA蛋白。本发明专利技术还提供了上述重组的H9N2 亚型禽流感病毒的制备方法，利用RT‑PCR 法扩增HA和NA 基因片段，并同时亚克隆至杆状病毒穿梭质粒中，构建重组杆状病毒穿梭质粒，转染Sf9 昆虫细胞，获得重组的H9N2 亚型禽流感病毒样颗粒。本发明专利技术的表达的重组蛋白经透射电镜观察具有病毒样颗粒的形态结构。本发明专利技术的病毒可同时表达HA、NA蛋白，2 种蛋白可自行组装成VLPs，并分泌至细胞培养上清中，血凝效价可达1∶64。

【技术实现步骤摘要】
一种重组的H9N2亚型禽流感病毒样颗粒及其制备方法和用途
本专利技术属于生物
，涉及一种重组杆状病毒样颗粒，具体来说是一种重组的H9N2亚型禽流感病毒样颗粒及其制备方法和用途。
技术介绍
接种疫苗是预防禽流感发生与传播最有效的手段之一，对提高我国的禽病防制水平，保障我国养禽业的健康发展有十分积极的意义。目前使用的H9N2亚型禽流感疫苗均为灭活疫苗，我国有多个厂家生产的10多株H9N2亚型禽流感系列灭活苗，使用的疫苗株皆为2001年前分离获得的。近年来，我国H9N2亚型的禽流感病毒分离株的抗原性发生了很大变化，疫苗毒株升级迫在眉睫。研究发现，1998年-2006年间的毒株抗原性无变化，疫苗的保护率为100％。而对2009－2010年禽流感的流行病学研究中发现，H9抗体较高的免疫鸡依然携带H9N2亚型AIV。表明现有的H9N2亚型AIV灭活疫苗免疫鸡只后，尽管能使鸡只产生较高的抗体，但已经不能有效地保护其免受当前H9N2亚型AIV流行株的攻击。因此，商品化H9N2亚型AIV灭活疫苗的制备毒株急需更新。病毒样颗粒(Virus-likeparticle，VLP)疫苗以其安全性和抗病毒的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重组的H9N2 亚型禽流感病毒样颗粒，其特征在于：含有A/ chicken/Shanghai/06/2015(H9N2)的HA蛋白和NA蛋白。

【技术特征摘要】
1.一种重组的H9N2亚型禽流感病毒样颗粒，其特征在于：含有A/chicken/Shanghai/06/2015(H9N2)的HA蛋白和NA蛋白。2.根据权利要求1所述的一种重组的H9N2亚型禽流感病毒样颗粒，其特征在于：所述的编码HA蛋白的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。3.根据权利要求1所述的一种重组的H9N2亚型禽流感病毒样颗粒，其特征在于：所述的编码NA蛋白的核苷酸基因序列如SEQIDNO.2所示。4.权利要求1所述的一种重组的H9N2亚型禽流感病毒样颗粒的制备方法，其特征在于包括如下步骤：一个设计引物的步骤，根据A/chicken/Shanghai/06/2015(H9N2)的HA基因和NA基因，设计引物，所述的HA基因的上游引物序列如SEQIDNO.3所示，所述的HA基因的上游引物序列如SEQIDNO.4所示；所述的NA基因的上游引物序列如SEQIDNO.5所示，所述的NA基因的上游引物序列如SEQIDN...

【专利技术属性】
技术研发人员：李鑫，葛菲菲，刘健，鞠厚斌，杨德全，周锦萍，
申请(专利权)人：上海市动物疫病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：上海,31