The present invention provides a primer for detecting TOLLIP pyrosequencing and genotyping of the kit, which relates to the technical field of in vitro nucleic acid detection, can detect TOLLIP rapid and accurate genotyping, low cost, high sensitivity and specificity for TOLLIP. The detection of TOLLIP primers for pyrosequencing genotyping including positive TOLLIP primers, TOLLIP reverse primers, TOLLIP sequencing primers; among them, the TOLLIP forward primers and reverse primer 5 'end were labeled with biotin. The kit for detecting TOLLIP genotype by pyrosequencing includes PCR reaction solution, and the PCR reaction solution includes the TOLLIP forward amplification primer, the TOLLIP reverse amplification primer and the TOLLIP sequencing primer.
【技术实现步骤摘要】
焦磷酸测序法检测TOLLIP基因分型的引物对及试剂盒
本专利技术涉及体外核酸检测
,尤其涉及焦磷酸测序领域,具体涉及一种焦磷酸测序法检测TOLLIP基因分型的引物对及试剂盒。
技术介绍
特发性肺纤维化(IPF)是一种慢性、进行性、纤维化性间质性肺疾病,病变局限在肺脏,好发于中老年人群,其肺组织学和/或胸部高分辨率CT(HRCT)特征性表现为普通型间质性肺炎(UIP),病因不清。按病程有急性、亚急性和慢性之分,多为散发,据统计,每年整体人群中的患病率约(2-29)/10万,且呈逐渐增长趋势,估计以每年11%的比例增长。在美国特发性肺纤维化患者大约有100000人,欧盟地区大约有110000人,而且每年欧盟地区新增IPF患者35000人。日本每年整体人群中的IPF患病率约(2.23-10)/10万,实际值远高于这个数目。作为一种慢性间质性肺病,IPF起病隐匿、病情逐渐加重,也可表现为急性加重。IPF诊断后的平均生存期仅2.8年,死亡率高于大多数肿瘤,IPF被称为一种“类肿瘤疾病”。其中位生存期只有3年,生存率类似于许多癌症,预后差且缺乏有效的治疗。目前,除肺移植外,尚无证据证实哪一种药物能够有效的治疗IPF,有少数研究提示某些药物对IPF患者可能有益。近年来,大规模的全基因组关联研究已经强调出基因多态性的重要性,TOLLIP基因已经证实与IPF易感性和生存有关。具研究标明TOLLIP(rs3750920)TT基因型患者与安慰剂组相比改善生存,CC基因型患者NAC治疗较差,CT基因型与安慰剂组患者生存区间相似。焦磷酸测序(Pyrosequencing)是基 ...
【技术保护点】
焦磷酸测序法检测TOLLIP基因分型的引物对,其特征在于,所述引物对包括:TOLLIP正向扩增引物:5’‑GCGTAGGACATGACGAGGTT‑3’;TOLLIP反向扩增引物:5’‑AGCCCTGTTCCACAGATAAGAC‑3’;TOLLIP测序引物:5’‑GCCTGGACCCACATCACC‑3’;其中,所述TOLLIP正向扩增引物和反向扩增引物的5’端分别进行生物素标记。
【技术特征摘要】
1.焦磷酸测序法检测TOLLIP基因分型的引物对,其特征在于,所述引物对包括:TOLLIP正向扩增引物:5’-GCGTAGGACATGACGAGGTT-3’;TOLLIP反向扩增引物:5’-AGCCCTGTTCCACAGATAAGAC-3’;TOLLIP测序引物:5’-GCCTGGACCCACATCACC-3’;其中,所述TOLLIP正向扩增引物和反向扩增引物的5’端分别进行生物素标记。2.焦磷酸测序法检测TOLLIP基因分型的试剂盒,其特征在于,所述TOLLIP基因检测的多态性位点为rs3750920,所述试剂盒包括PCR反应液;所述PCR反应液包括:TOLLIP正向扩增引物:5’-GCGTAGGACATGACGAGGTT-3’;TOLLIP测序引物:5’-GCCTGGACCCACATCACC-3’;TOLLIP反向扩增引物:5’-AGCCCTGTTCCACAGATAAGAC-3’;其中,所述TOLLIP正向扩增引物和反向扩增引物的5’端分别进行生物素标记。3.根据权利要求2所述的焦磷酸测序法检测TOLLIP基因分型的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括TOLLIP阳性对照品,TOLLIP阳性对照品1为插有SEQIDNO.4所示核苷酸序列的TOLLIP野生纯合子质粒;TOLLIP阳性对照品2为插有SEQIDNO.5所示核...
【专利技术属性】
技术研发人员:赵永伟,韩桂玲,
申请(专利权)人:山东百茂生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:山东,37
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