一种抗PEDV的单克隆抗体及其化学发光方法检测方法技术
A monoclonal antibody against PEDV and its chemiluminescence detection method
The invention provides an anti porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) luminescence detection method of monoclonal antibody and chemical, triple from porcine epidemic diarrhea transmissible gastroenteritis rotavirus vaccine in purified PEDV strain, as the preparation of monoclonal antibody against PEDV antigen; Balb/c mice were immunized by culture, virus. By using cell fusion technique, obtained anti PEDV IgG2a monoclonal antibody; using the monoclonal antibody by monoclonal antibody coating solution, concentration, optimization of sealing liquid, two anti enzyme concentration and reaction time, a chemical detection PEDV chemiluminescence detection method was established. The method has the characteristics of strong specificity, high sensitivity, large amount of disposable detection and good stability, and can detect 0.26ng virus.
【技术实现步骤摘要】
一种抗PEDV的单克隆抗体及其化学发光方法检测方法
本专利技术属于生物监测领域，具体涉及一种抗PEDV的单克隆抗体及其化学发光方法检测方法。
技术介绍
猪流行性腹泻（PED）由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起猪只发生呕吐、腹泻、肠炎、脱水以及哺乳仔猪的高死亡率为特征。所有不同阶段的猪群均可感染，发病率可达100%，哺乳仔猪的死亡率高达90%以上。在许多养猪业发达的国家都己有此病暴发的报道,尤其是在亚洲、欧洲等地区引起了重大的经济损失。PED首次在1971年于英国报道，随后在1978年该病在比利时和英国首次得到鉴定，我国于1984年证实该病在的存在，目前世界上大多数养猪国家都有该病的报道，尤其以韩国、日本、中国、泰国和越南等国家发病严重。自2010年秋以来,我国南方部分省份出现了严重的仔猪流行性腹泻,发病情况比先前更为凶猛，造成仔大量的哺乳仔猪发病死亡，尤其是7日龄以内的仔猪死亡率高达100%，给养殖户造成了巨大的经济损失，并已成为影响我国养猪业健康发展的重要疫病之一。由于PED与猪传染性胃肠炎(TGE)在流行病学、临床症状等变化上非常相似这给该病的快速诊断与防治都...
【技术保护点】
一种抗猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体，其特征在于：从猪流行性腹泻‑猪传染性胃肠炎‑猪轮状病毒的三联活疫苗中纯化获得猪流行性腹泻病毒毒株，作为制备猪流行性腹泻病毒单克隆抗体的抗原；通过病毒培养、免疫Balb/c小鼠，单抗制备技术，经克隆，获得猪流行性腹泻病毒单克隆抗体。
【技术特征摘要】
1.一种抗猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体，其特征在于：从猪流行性腹泻-猪传染性胃肠炎-猪轮状病毒的三联活疫苗中纯化获得猪流行性腹泻病毒毒株，作为制备猪流行性腹泻病毒单克隆抗体的抗原；通过病毒培养、免疫Balb/c小鼠，单抗制备技术，经克隆，获得猪流行性腹泻病毒单克隆抗体。2.根据权利要求1所述的一种抗猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体，其特征在于：其为IgG2a亚型单克隆抗体。3.一种利用权利要求1所述单克隆抗体的检测猪流行性腹泻病毒的化学发光检测方法，其特征在于：利用所述单克隆抗体，通过包被液、单抗包被浓度、封闭液、酶标二抗浓度及反应时间的优化，建立了一种检测猪流行性腹泻病毒的化学发光检测方法。4.根据权利要求3所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：王隆柏，周伦江，王晨燕，吴学敏，陈如敬，车勇良，刘玉涛，
申请(专利权)人：福建省农业科学院畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：福建,35
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