一种从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法技术

本发明专利技术涉及一种从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法，包括将胆囊破裂后提出胆汁，经过滤去杂得胆汁，所得胆汁通过碱化处理后进行离心处理，收集过滤液，过滤液直接喷干后得干粉，干粉加混合溶剂，在亚临界条件下萃得到含脂浸膏和脱脂粉末；含脂浸膏加入丙酮回流萃取，收集滤液和滤渣，滤液经蒸发浓缩后用于提取胆固醇，滤渣回收用于提取卵磷脂；脱脂粉末加水和二氯甲烷后形成萃取液，经萃取得上层悬浮液和下层红色液，下层红色液用于提取胆红素，上层悬浮液用于提取胆酸。采用本发明专利技术所述的方法，在提取胆红素和胆酸同时，还能联产提取胆固醇和卵磷脂，实现胆汁综合利用，有利于节约资源和降低能耗，可推动行业持续性发展。

Method for extracting bilirubin and cholic acid from bile and producing cholesterol and lecithin

The invention relates to a method for extracting bilirubin and bile from the bile with cholesterol and lecithin, including the rupture of gallbladder bile through the filter to put forward, complex bile, bile the centrifugal processing through alkalization treatment, collecting the filtrate, filtering the liquid spray directly after the dry powder, dry powder and mixed solvent at subcritical conditions containing fat and nonfat extract obtained extract containing lipid extract powder; adding acetone reflux extraction, collecting filtrate and residue after evaporation of the filtrate, for the extraction of cholesterol, residue recovery for the extraction of lecithin; defatted powder and water, and after the formation of dichloromethane extract, extraction by the upper suspension and the lower red liquid, lower the red liquid for the extraction of the upper suspension for the extraction of bilirubin, cholic acid. The method of the invention, at the same time in the extraction of bilirubin and bile acid, but also combined extraction of cholesterol and lecithin, realize the comprehensive utilization of bile, is conducive to saving resources and reducing energy consumption can promote the industry sustainable development.

【技术实现步骤摘要】
一种从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法
本专利技术属于食品加工
，具体涉及一种从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法。
技术介绍
胆汁是在胆道中流动的一种特殊的体液，由哺乳动物肝脏分泌产生。在肝脏中形成后经胆囊管进入胆囊，并在那里储存起来；进食后从胆囊中释放出来，消化食物中的脂肪和类脂。胆汁中极大部分是水(约占97％)，在水中溶有许多种物质，其中包括能帮助脂肪消化和吸收的胆汁酸(约占2.5％)，以及与消化无关的肝的排泄物胆红素(约占0.4％)。此外，胆汁中含有磷脂、胆固醇、钠、钾、钙、磷酸盐、碳酸盐以及极少量蛋白质等成分。胆酸别名三羟基胆烷酸、三羟基胆甾烷酸、环孢素等，属于固醇类，具有乳化脂肪，促进消化，利胆、镇咳、祛痰、平喘等功效；胆红素是胆汁色素的一种，别名胆深素、胆红质等，虽然有一定毒性，但是具有镇静、镇惊、解热、降压、抑制癌瘤、灭活脑炎病毒、抗氧化、促进红血球再生等功效；胆固醇别名胆甾醇，可用于乳化剂，是合成牛黄、维生素B、化妆品、激素的重要原料；卵磷脂简称PC，与蛋白、维生素并列为第三“营养物质”，是血管的“清道夫”，肝脏的“保护神”，糖尿病的“康复品”，并有减缓记忆力衰退、清除毒素、化解胆结石的功效。其中胆酸、胆固醇和胆红素均是合成人工牛黄的重要原料。因为天然牛黄极少，远远满足不了市场需求，随着体外模拟牛黄结石技术的推广，对于胆酸、胆固醇和胆红素的需求必然是“水涨船高”。因为多以动物的胆汁为原料提取，云贵是全国重要的牛羊养殖区域，牛羊的胆汁资源比较丰富，然而以上产品在云贵尚属空白，所以研发从牛羊胆汁中综合提取胆固醇、卵磷脂、胆酸和胆红素的优化工艺，对于发展云贵特色的生物产业有着积极的意义。目前现行综合提取胆红素和胆酸主要有两种途径，一是加入氢氧化钙提取胆红素钙盐沉淀，滤液再酸化提取胆酸沉淀，然后分别纯化；二是弱酸性条件下以氯仿或者二氯甲烷萃取胆红素，萃取余液再强酸条件沉淀胆酸，然后分别纯化。采用现行的工艺方法普遍存在如下问题：一是胆汁中脂肪酸、卵磷脂、胆固醇含量较多，对于提取胆红素和胆酸的收率和纯度影响较大，更没有考虑卵磷脂、胆固醇的回收；二是胆红素的纯化主要采用强酸性条件以二氯甲烷萃取，不仅杂质去除不完全，而且很容易促使胆红素异构化；三是胆酸的纯化主要采用反复结晶和活性炭处理，过程繁琐，流失较多，并缺少去除去氧胆酸杂质的有效措施。由此可见现有的工艺方法提取胆红素和胆酸的收率和纯度均不是很理想。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法，应用此种方法通过对胆汁碱化处理后，并以亚临界萃取技术分离并回收胆固醇和卵磷脂，不仅回收了胆固醇和卵磷脂，而且使胆红素和胆酸的收率和纯度得以提高，其产品可以用于制备人工牛黄等药物，为制药行业提供必要的原料，解决市场供需缺口大的矛盾。为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案是：一种从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法，所述方法包括以下步骤：(1)将新鲜或冷冻的待处理胆囊破裂后，提出胆汁，经过滤去杂后得胆汁，再所得胆汁中加入胆汁量的1%亚硫酸钠和0.2%EDTA钠盐进行碱化处理，并加热至70℃，然后再加10%的氢氧化钠溶液调节pH值至10.5，之后再加热至85℃,并保温10min，最后将所得碱化液进行离心处理，收集过滤液，所述过滤液直接喷干后得干粉，其中在喷干过程中控制进风温度为170℃，出风温度为85℃；(2)将步骤(1)中所得的干粉加入混合溶剂，在亚临界条件下萃取1～3次得到含脂浸膏和脱脂粉末；(3)将步骤(2)中所得的含脂浸膏加入丙酮进行回流萃取，收集滤液和滤渣，所述滤液经蒸发浓缩后用于提取胆固醇，所述滤渣回收用于提取卵磷脂；(4)将步骤(2)中所得的脱脂粉末加入水和二氯甲烷，在常温条件下搅拌均匀后形成萃取液，经静置分层后，分别收集上层悬浮液和下层红色液，并对收集的上层悬浮液再加入二氯甲烷进行萃取2～4次，萃取至上层悬浮液接近无色为止，收集的萃取液合并下层红色液用于提取胆红素，剩余的上层悬浮液用于提取胆酸。进一步地，所述的从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法，其中所述步骤(2)中的混合溶剂由丙烷、丁烷和乙醚按重量比1:1.5:1.5组成，加入混合溶剂后，在亚临界条件下萃取2～3次得到含脂浸膏和脱脂粉末。进一步地，所述的从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法，其中所述步骤(2)中的亚临界条件，指在常温条件下，萃取压力为5Mpa，萃取时间为3h。进一步地，所述的从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法，其中所述步骤(3)中提取胆固醇具体包括以下步骤：(1)将所收集的含脂浸膏中加入3倍量的丙酮进行回流萃取，萃取温度为45～50℃，萃取时间为6～8h，分别收集滤液和滤渣；(2)将步骤(1)中所得的滤液加热至60℃进行蒸发浓缩回收丙酮，并得呈黄色状的浓缩液；(3)将步骤(2)中所得的浓缩液加入混合溶剂和甲醇钠混合后进行回流醇解，经醇解后过滤去杂，收集滤液；(4)将步骤(3)中所得的滤液加10%的硫酸调节pH值在5～6之间，然后加入滤液量0.3%的活性炭进行吸附，在温度为50℃条件下回流吸附，回流吸附时间≥0.5h，然后过滤去杂，收集滤液；对收集的滤液再次调节pH值在1～2之间，在温度为50℃条件下回流酸化，回流酸化时间≥4h，经过滤去杂后收集滤液；(5)将步骤(4)中所得的滤液进行真空蒸发回收混合溶剂，收集的浓缩液加3倍量的水稀释并降至常温，经过滤后取沉淀物，并用水反复洗涤至中性，最后将沉淀物过滤沥干；(6)将步骤(5)中所得的沉淀物再加10倍量乙醇进行回流溶解，回流溶解温度≥50℃，回流溶解时间为1h，然后将溶解液降温至≤5℃条件下进行结晶，过滤取结晶体，最后将结晶体洗涤后，在温度为70～80℃条件下进行真空干燥，即得精品胆固醇，并避光密封保存。进一步地，所述的从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法，其中所述步骤(3)中所加入的混合溶剂由乙醇与正己烷按其重量比1:1.5组成，其加入量为浓缩液5倍量的混合溶剂和6%的甲醇钠，经充分混合后进行回流醇解，其中醇解温度为50℃，醇解时间≤1h，经醇解后过滤去杂，收集滤液。进一步地，所述的从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法，其中所述步骤(3)中提取卵磷脂具体包括以下步骤：(1)将在所收集的滤渣中加入3倍量的85%乙醇进行回流溶解，回流溶解温度≥50℃，回流溶解时间为1h，然后将溶解液过滤，收集滤液；(2)将步骤(1)中所得的滤液以10%盐酸调节pH值至5，然后加入滤液量0.3%的活性炭进行吸附，在温度为50℃条件下回流吸附，回流吸附时间≥0.5h，然后过滤去杂，收集滤液降至常温后，再以10%氢氧化钠调节pH值至7，再经过氧化铝层析柱吸附至终点，收集滤液；(3)将步骤(2)中所得的滤液以浓度95%的乙醇在常温条件下进行洗脱，洗脱后收取204nm处有吸收值的活性洗脱液；(4)将步骤(3)中所得活性洗脱液调节pH值至7，在温度为45℃条件下进行真空蒸发浓缩，回收乙醇，经浓缩后得浓缩液，在所得浓缩液中加少量丙酮和水进行洗涤后再进行离心脱水处理本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)将新鲜或冷冻的待处理胆囊破裂后，提出胆汁，经过滤去杂后得胆汁，再所得胆汁中加入胆汁量的1%亚硫酸钠和0.2%EDTA钠盐进行碱化处理，并加热至70℃，然后再加10%的氢氧化钠溶液调节pH值至10.5，之后再加热至85℃,并保温10min，最后将所得碱化液进行离心处理，收集过滤液，所述过滤液直接喷干后得干粉，其中在喷干过程中控制进风温度为170℃，出风温度为85℃；(2)将步骤(1)中所得的干粉加入混合溶剂，在亚临界条件下萃取1～3次得到含脂浸膏和脱脂粉末；(3)将步骤(2)中所得的含脂浸膏加入丙酮进行回流萃取，收集滤液和滤渣，所述滤液经蒸发浓缩后用于提取胆固醇，所述滤渣回收用于提取卵磷脂；(4)将步骤(2)中所得的脱脂粉末加入水和二氯甲烷，在常温条件下搅拌均匀后形成萃取液，经静置分层后，分别收集上层悬浮液和下层红色液，并对收集的上层悬浮液再加入二氯甲烷进行萃取2～4次，萃取至上层悬浮液接近无色为止，收集的萃取液合并下层红色液用于提取胆红素，剩余的上层悬浮液用于提取胆酸。

【技术特征摘要】
1.一种从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)将新鲜或冷冻的待处理胆囊破裂后，提出胆汁，经过滤去杂后得胆汁，再所得胆汁中加入胆汁量的1%亚硫酸钠和0.2%EDTA钠盐进行碱化处理，并加热至70℃，然后再加10%的氢氧化钠溶液调节pH值至10.5，之后再加热至85℃,并保温10min，最后将所得碱化液进行离心处理，收集过滤液，所述过滤液直接喷干后得干粉，其中在喷干过程中控制进风温度为170℃，出风温度为85℃；(2)将步骤(1)中所得的干粉加入混合溶剂，在亚临界条件下萃取1～3次得到含脂浸膏和脱脂粉末；(3)将步骤(2)中所得的含脂浸膏加入丙酮进行回流萃取，收集滤液和滤渣，所述滤液经蒸发浓缩后用于提取胆固醇，所述滤渣回收用于提取卵磷脂；(4)将步骤(2)中所得的脱脂粉末加入水和二氯甲烷，在常温条件下搅拌均匀后形成萃取液，经静置分层后，分别收集上层悬浮液和下层红色液，并对收集的上层悬浮液再加入二氯甲烷进行萃取2～4次，萃取至上层悬浮液接近无色为止，收集的萃取液合并下层红色液用于提取胆红素，剩余的上层悬浮液用于提取胆酸。2.根据权利要求1所述的从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法，其特征在于：所述步骤(2)中的混合溶剂由丙烷、丁烷和乙醚按重量比1:1.5:1.5组成，加入混合溶剂后，在亚临界条件下萃取2～3次得到含脂浸膏和脱脂粉末。3.根据权利要求2所述的从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法，其特征在于：所述步骤(2)中的亚临界条件，指在常温条件下，萃取压力为5Mpa，萃取时间为3h。4.根据权利要求1所述的从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法，其特征在于，所述步骤(3)中提取胆固醇具体包括以下步骤：(1)将所收集的含脂浸膏中加入3倍量的丙酮进行回流萃取，萃取温度为45～50℃，萃取时间为6～8h，分别收集滤液和滤渣；(2)将步骤(1)中所得的滤液加热至60℃进行蒸发浓缩回收丙酮，并得呈黄色状的浓缩液；(3)将步骤(2)中所得的浓缩液加入混合溶剂和甲醇钠混合后进行回流醇解，经醇解后过滤去杂，收集滤液；(4)将步骤(3)中所得的滤液加10%的硫酸调节pH值在5～6之间，然后加入滤液量0.3%的活性炭进行吸附，在温度为50℃条件下回流吸附，回流吸附时间≥0.5h，然后过滤去杂，收集滤液；对收集的滤液再次调节pH值在1～2之间，在温度为50℃条件下回流酸化，回流酸化时间≥4h，经过滤去杂后收集滤液；(5)将步骤(4)中所得的滤液进行真空蒸发回收混合溶剂，收集的浓缩液加3倍量的水稀释并降至常温，经过滤后取沉淀物，并用水反复洗涤至中性，最后将沉淀物过滤沥干；(6)将步骤(5)中所得的沉淀物再加10倍量乙醇进行回流溶解，回流溶解温度≥50℃，回流溶解时间为1h，然后将溶解液降温至≤5℃条件下进行结晶，过滤取结晶体，最后将结晶体洗涤后，在温度为70～80℃条件下进行真空干燥，即得精品胆固醇，并避光密封保存。5.根据权利要求4所述的从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法，其特征在于，所述步骤(3)中所加入的混合溶剂由乙醇与正己烷按其重量比1:1.5组成，其加入量为浓缩液5倍量的混合溶剂和6%的甲醇钠，经充分混合后进行回流醇解，其中醇解温度为50℃，醇解时间≤1h，经醇解后过滤去杂，收集滤液。6.根据权利要求1所述的从胆汁中提取胆红素和胆酸并联产胆固醇、卵磷脂的方法，其特征在于，所述步骤(3)中提取卵磷脂...

【专利技术属性】
技术研发人员：李能强，
申请(专利权)人：贵州慧静生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：贵州,52