一种磷酸特地唑胺脂质体的制备方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种磷酸特地唑胺脂质体的制备方法及其应用，其特征是在于以大豆卵磷脂、胆固醇为膜材，采用醋酸钙梯度法，将磷酸特地唑胺包封制备成磷酸特地唑胺脂质体。平均粒径183.7nm，其包封率可达70%～75%。该脂质体具有被动靶向性、缓释性、细胞亲和性与组织相容性，无毒，同时提高药物的稳定性。醋酸钙梯度法制备磷酸特地唑胺脂质体不仅可以实现连续化生产，还能更好的适应工业化需求，因此在医药领域有广泛应用的前景。

【技术实现步骤摘要】
一种磷酸特地唑胺脂质体的制备方法及其应用
本专利技术属于药物制剂
，涉及一种磷酸特地唑胺脂质体的制备方法和应用。
技术介绍
如今，抗生素的滥用导致多药耐药性的现象愈演愈烈，为了应对此种现象继续恶化，新抗生素的研究刻不容缓。作为新型唑烷酮类抗菌药，磷酸特地唑胺于2013年获得美国FDA优先评审资格，并于2014年6月20日批准上市，常被用于耐甲氧西林菌株(MRSA)和甲氧西林敏感菌株（MSSA）等引起的急性、细菌性皮肤和皮肤结构感染(ABSSSI)。上市的商品名为SivextroTM，有静脉注射用冻干粉针剂和片剂两种剂型，规格均为200mg。注射用粉针剂在注射后1h就可达到血药浓度峰值，而口服片剂需要3h，绝对生物利用度约91%。脂质体是一种由类脂质双分子层形成的微形泡囊，又称为类脂小球或液晶微囊，根据药物的溶解特性，油溶性药物被包封于磷脂双分子层中，而水溶性药物则存在于中央的空腔中。脂质体由于具有被动靶向性、缓释性、细胞亲和性与组织相容性、降低药物的毒性、提高药物的稳定性等特点，因而在医药领域广泛应用。制备脂质体的方法多种多样，分为主动载药法和被动载药法两个大类。主动载药法又称化学梯度法，首先将一定浓度的离子溶液包封于空白脂质体中，透析除去外相离子，形成化学梯度，再加入药物溶液孵育，利用化学梯度将药物递送到脂质体中。被动载药法包括：（1）薄膜分散法：将脂质在二氯甲烷、氯仿、甲醇及乙醇等有机溶剂溶解，再利用旋转蒸发仪使圆底瓶内的溶剂挥发，在瓶壁上形成均匀的脂质膜，在临界温度以上的温度条件下，将欲包覆药物的水溶液和脂质膜混合，借助手摇或超声等机械力，将瓶壁上的脂质膜振摇下来，在水溶液中就会形成多层脂质体（MLV）。（2）反复冻融法：利用脂质体破裂后会再自行密合的特性，以多次冷冻、再解冻的方式，造成脂质体的破裂及重组再密合，最后可形成大小较均匀的单层脂质体。（3）逆相蒸发法：以有机溶剂溶解高浓度的脂质，与药物水溶液超声或剪切成初乳，再以旋转蒸发仪使有机溶剂挥发，形成包封率较高的脂质体。这种方法对于水溶性药物的包封率相对较高。（4）前体脂质体法：载体颗粒与脂质溶液的混悬液经旋转蒸发仪使有机溶剂挥发，脂质均匀吸附于载体颗粒上，形成脂质体前体。再将药物溶液，加入到脂质体前体中，搅拌，超声，形成大小均一的脂质体。由于磷酸特地唑胺在室温下不稳定，易水解，因此贮藏和运输极为不便，也增加了产品贮藏成本和运输成本。本专利技术，提供了一种醋酸钙梯度法制备磷酸特地唑胺脂质体，不仅能够提高药物的稳定性，细胞亲和性，还可以实现连续化生产，更好地适应工业化需求，因此在医药领域有广泛应用的前景。
技术实现思路
本专利技术提供了一种磷酸特地唑胺脂质体的制备方法及其应用。制备所述的磷酸特地唑胺脂质体的方法，步骤如下：按比例称取大豆卵磷脂、胆固醇，加入2mL无水乙醇于50～60℃旋转蒸发（真空度0.02～0.07MPa）成干膜，加5mL醋酸钙水溶液（120mmol/L），水化3～7min分散均匀（必要时超声分散），制成空白脂质体。将制备好的空白脂质体置于透析袋（8000～14000Da）中，用生理盐水透析三次，每次持续1h。透析后的空白脂质体加入磷酸特地唑胺溶液（为增加水溶性，与NaOH反应成二钠盐），45～55℃水浴孵育10～20min后即得，其理化性质如图1～4。本专利技术的一种磷酸特地唑胺脂质体的优势有：1.该磷酸特地唑胺脂质体具有良好的细胞亲和性与组织相容性。无溶血现象发生，注射安全性高，如图5～6。同时提高药物的稳定性；2.该磷酸特地唑胺脂质体具有缓释效果，如图7。同时它还具有一定的靶向性，降低了其对机体的耐药性。该磷酸特地唑胺脂质体对耐甲氧西林菌株（MRSA）和甲氧西林敏感菌株(MSSA)等引起的感染有效。采用醋酸钙梯度法制备磷酸特地唑胺脂质体，包封率高，不仅可以实现连续化生产，还能更好的适应工业化需求，因此在医药领域有广泛应用的前景。附图说明图1磷酸特地唑胺脂质体照片（A新鲜制备脂质体，B冻干粉，C冻干复溶后脂质体）；图2磷酸特地唑胺脂质体透射电镜照片；图3磷酸特地唑胺脂质体粒径分布图；图4磷酸特地唑胺脂质体电位分布图；图5磷酸特地唑胺脂质体溶血试验结果（1.阴性对照，2～6.不同浓度的TDZA-Lips组，7.阳性对照）；图6磷酸特地唑胺脂质体溶血率结果；图7磷酸特地唑胺脂质体体外释放曲线。具体实施方式实施例1按质量比6：1称取大豆卵磷脂、胆固醇，加入2mL无水乙醇于55℃旋转蒸发（真空度0.05MPa）成干膜，加5mL醋酸钙水溶液（120mmol/L），水化5min分散均匀（必要时超声分散），制成空白脂质体。将制备好的空白脂质体置于透析袋（8000～14000Da）中，用生理盐水透析三次，每次持续1h。透析后的空白脂质体加入磷酸特地唑胺溶液（为增加水溶性，与NaOH反应成二钠盐），50℃水浴孵育15min后即得。实施例2按质量比6：1称取蛋黄卵磷脂、胆固醇，加入2mL无水乙醇于55℃旋转蒸发（真空度0.05MPa）成干膜，加5mL醋酸钙水溶液（120mmol/L），水化5min分散均匀（必要时超声分散），制成空白脂质体。将制备好的空白脂质体置于透析袋（8000～14000Da）中，用生理盐水透析三次，每次持续1h。透析后的空白脂质体加入磷酸特地唑胺溶液（为增加水溶性，与NaOH反应成二钠盐），50℃水浴孵育15min后即得。实施例3按质量比6：1称取大豆卵磷脂、胆固醇，加入2mL二氯甲烷于42℃旋转蒸发（真空度0.04MPa）成干膜，加5mL醋酸钙水溶液（120mmol/L），水化5min分散均匀（必要时超声分散），制成空白脂质体。将制备好的空白脂质体置于透析袋（8000-14000Da）中，用生理盐水透析三次，每次持续1h。透析后的空白脂质体加入磷酸特地唑胺溶液（为增加水溶性，与NaOH反应成二钠盐），50℃水浴孵育15min后即得。实施例4将含有3%甘露糖的脂质体混悬液过0.22μm滤膜除菌，放入超低温冰箱-80℃预冻24h，然后将得到的样品转移到冷冻干燥机中冻干-50℃，48h，制得冻干粉针剂。实施例5将含有3%蔗糖的脂质体混悬液过0.22μm滤膜除菌，放入超低温冰箱-80℃预冻24h，然后将得到的样品转移到冷冻干燥机中冻干-50℃，48h，制得冻干粉针剂。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种磷酸特地唑胺脂质体的制备方法，其特征在于：磷酸特地唑胺脂质体以大豆卵磷脂、胆固醇为膜材，采用醋酸钙梯度法，将磷酸特地唑胺包封制备而成。

【技术特征摘要】
1.一种磷酸特地唑胺脂质体的制备方法，其特征在于：磷酸特地唑胺脂质体以大豆卵磷脂、胆固醇为膜材，采用醋酸钙梯度法，将磷酸特地唑胺包封制备而成。2.如权利要求1所述的磷酸特地唑胺脂质体的制备方法，其步骤如下：（1）按比例称取大豆卵磷脂、胆固醇，加入2mL无水乙醇于55℃旋转蒸发（真空度0.05MPa）成干膜，加5mL醋酸钙水溶液（120mmol/L），水化5min分散均匀，制成空白脂质体；（2）将制备好的空白脂质体置于透析袋（8000～14000Da）中，用生理盐水透析三次，每次持续1h，透析后的空白脂质体加入磷酸特地唑胺药物溶液，50℃水浴孵育15min后即得。3.如权利要求2所述的磷酸特地唑胺脂质体的制备方法，其特征在于，S1中，所述大豆卵磷脂、胆固醇旋转蒸发成膜的真空度为0.05...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄桂华，杨振磊，邵爱霞，
申请(专利权)人：济南维瑞医药科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37