一种基于正电荷吸附分离外泌体的方法技术
A method based on positive charge adsorption for separation of exocrine bodies
The present invention discloses a method for separating an outer body based on positive charge adsorption. The first use of 3 aminopropyltriethoxysilane and APTES glass surface silanization reaction, on glass surface with positive charge; and then to join with the modified exosomes samples glass positive charge, the realization of foreign body secrete grab; then use PBS buffer for glassware the surface of the washing, pure exosomes adsorbed on the glass surface, to achieve the purpose of separation of exosomes. The invention can complete the grasping foreign body urinary in a few minutes, high separation efficiency, and the method allows all subsequent molecular analysis, including Elisa, Western blot, genomic DNA extraction, amplification and sequencing identification.
【技术实现步骤摘要】
一种基于正电荷吸附分离外泌体的方法
本专利技术属于生物医学
，具体的说，涉及一种基于正电荷吸附分离外泌体的方法。
技术介绍
外泌体属于细胞外囊泡的一种，尺寸约为30-150nm，在多种生物状态与疾病中发挥着重要的生理病理学功能。外泌体结构与细胞膜结构相似，由磷脂双分子层构成，厚度约为5nm，成分主要包含神经酰胺、胆固醇、鞘脂以及含有长饱和脂肪链的甘油磷脂。外泌体表面及内部富含各种蛋白质，并且含有多重核酸等重要的生物大分子物质，这些生物大分子物质可以被用来检测反映包括肿瘤在内等疾病的状态。近些年研究表明外泌体可以作为分泌母细胞生物信息指纹，激起了研究人员的极大兴趣。虽然人们还没有完全理解外泌体的生物学功能，但是越来越多的实验数据表明，外泌体在细胞间通讯、抗原呈递以及蛋白质核酸物质交换等起到重要的作用。特别是外泌体参与的细胞通讯方面尤为重要，外泌体通过参与细胞间免疫信号、血管生成、增值和分化等功能，直接影响了诸如癌症、神经退行性疾病等的发生。越来越多的证据表明，外泌体直接参与了肿瘤的发生，包括血管生成，免疫抑制，转移等。因此可以通过对外泌体内容物的检测，实现微创...
【技术保护点】
一种基于正电荷吸附分离外泌体的方法，其特征在于，其首先利用3‑氨基丙基三乙氧基硅烷APTES和玻璃器皿表面发生硅烷化反应，对玻璃器皿表面进行正电荷修饰；然后向修饰有正电荷的玻璃器皿中加入带有外泌体的样品，实现对外泌体的抓取；最后利用缓冲液PBS对玻璃器皿表面进行冲洗，得到吸附于玻璃器皿表面的纯外泌体，实现外泌体分离的目的。
【技术特征摘要】
1.一种基于正电荷吸附分离外泌体的方法，其特征在于，其首先利用3-氨基丙基三乙氧基硅烷APTES和玻璃器皿表面发生硅烷化反应，对玻璃器皿表面进行正电荷修饰；然后向修饰有正电荷的玻璃器皿中加入带有外泌体的样品，实现对外泌体的抓取；最后利用缓冲液PBS对玻璃器皿表面进行冲洗，得到吸附于玻璃器皿表面的纯外泌体，实现外泌体分离的目的。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，玻璃器皿是玻璃瓶或玻璃皿。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，带有外泌体的样品为血液、唾液或尿液。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将3-氨基丙基三乙氧基硅烷APTES溶解到无...
【专利技术属性】
技术研发人员：雷豪志，祝琳，张群，
申请(专利权)人：上海浦美生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31
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