一种高营养细胞扩大培养的方法技术

本发明专利技术提供了一种高营养细胞扩大培养的方法，用移液枪将培养基吸尽，加入3‑5ml PBS洗涤细胞2‑3次，向细胞培养皿中加入1‑2ml 0.38%的胰蛋白酶，于37℃条件下消化3‑5min，加入2‑3ml的新鲜培养基，使用移液枪吹打细胞培养皿底40‑50次；将液体移至细胞离心管中，在1000‑1500g/min条件下离心3‑10min，用移液枪去除上清液，加入2‑3ml新鲜培养基，使用移液枪上下吹打细胞40‑50次；平均加入到3‑8个细胞培养皿中，进行扩大培养。方法合理，易于实现，细胞生长速度快，细胞状态好，边界清晰，镜下观察透亮、分裂相更多、形态及分散度佳，可以有利于生物与健康相关研究。

【技术实现步骤摘要】
一种高营养细胞扩大培养的方法
本专利技术属于生物技术应用领域，具体地，涉及一种高营养细胞扩大培养的方法。
技术介绍
细胞培养是生物与健康相关研究领域的一项重要技术。随着生命科学的迅速发展，目前细胞培养已成为细胞生物学、分子生物学、遗传学和免疫学等学科研究的重要基础。为了深入探讨细胞的生长活动规律、有关疾病的病理和药物的药理（毒理）机制，开发具有不同针对性的细胞培养方法具有重要意义。细胞培养作为生命及再生医学领域中广泛应用的关键技术。尤其随着细胞治疗个性化技术的兴起，体外扩增特殊功效的细胞成了临床前研究以及临床治疗的重点研发项目。具有体外扩增特殊功效的细胞包括由多功能的造血干细胞、T细胞、NK细胞、DC细胞以及CIK细胞等，将这类细胞体外扩增之后再回输到哺乳生物体内，有利于提高机体的造血装置功能：如提升红细胞、免疫细胞等的数量及功能维护、抗肿瘤能力以及免疫防御能力。
技术实现思路
专利技术目的：本专利技术提供了一种高营养细胞扩大培养的方法，用于多种人源以及非人源细胞的培养。技术方案：本专利技术提供了一种高营养细胞扩大培养的方法，包括以下步骤：用移液枪将培养基吸尽，加入3-5mlPBS洗涤细本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高营养细胞扩大培养的方法，其特征在于：包括以下步骤：用移液枪将培养基吸尽，加入3‑5ml PBS洗涤细胞2‑3次，向细胞培养皿中加入1‑2ml 0.38%的胰蛋白酶，于37℃条件下消化3‑5min，加入2‑3ml的新鲜培养基，使用移液枪吹打细胞培养皿底40‑50次；将液体移至细胞离心管中，在1000‑1500g/min条件下离心3‑10min，用移液枪去除上清液，加入2‑3ml新鲜培养基，使用移液枪上下吹打细胞40‑50次；平均加入到3‑8个细胞培养皿中，进行扩大培养。

【技术特征摘要】
1.一种高营养细胞扩大培养的方法，其特征在于：包括以下步骤：用移液枪将培养基吸尽，加入3-5mlPBS洗涤细胞2-3次，向细胞培养皿中加入1-2ml0.38%的胰蛋白酶，于37℃条件下消化3-5min，加入2-3ml的新鲜培养基，使用移液枪吹打细胞培养皿底40-50次；将液体移至细胞离心管中，在1000-1500g/min条件下离心3-10min，用移液枪去除上清液，加入2-3ml新鲜培养基，使用移液枪上下吹打细胞40-50次；平均加入到3-8个细胞培养皿中，进行扩大培养。2.根据权利要求1所述的高营养细胞扩大培养的方法，其特征在于：所述胰蛋白酶中还包含0.01%的EDTA。3.根据权利要求1或2所述的高营养细胞扩大培养的方法，其特征在于：所述培养基包括70-90%的基础培养基以及10-30%的胎牛血清。4.根据权利要求3所述的高营养细胞扩大培养的方法，其特征在于：所述基础培养基以重量组分计，包括以下组分：葡萄糖80-90份、碳酸氢钠10-20份、丙酮酸钠8-18份、丝胶蛋白3-12份、氯化钾30-50份、无水硫酸镁5-12份、氯化钠60-80份、无水磷酸二氢钠8-16份、叶酸0.2-0.6份、肌醇0.5-1.5份、烟酰胺0.2-0.8份、无水氯化钙20-40份、硝酸铁0.1-0.5份、丁二酸5-10份、丁二酸钠9-18份、D-泛酸钙0.2-0.8份、酒石酸胆碱0.5-1份、核黄素0.1-0.3份、盐酸硫胺0.1-0.5份、盐酸吡哆辛0....

【专利技术属性】
技术研发人员：曹先艳，王文峰，施亮，
申请(专利权)人：太仓东浔生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32