使用聚酰亚胺多孔膜的细胞的长期培养、与使用聚酰亚胺多孔膜的细胞的冷冻保存方法技术

本发明专利技术涉及，使用聚酰亚胺多孔膜的细胞的长期培养方法，细胞培养装置和试剂盒。本发明专利技术还涉及使用聚酰亚胺多孔膜的细胞的冷冻保存方法和试剂盒。

Long term culture of cells using polyimide porous membranes and cryopreservation of cells using polyimide porous membranes

The present invention relates to a long-term culture method for cells using a polyimide porous membrane, a cell culture apparatus, and a kit. The invention also relates to a method and a kit for cryopreservation of cells using a polyimide porous membrane.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】使用聚酰亚胺多孔膜的细胞的长期培养、与使用聚酰亚胺多孔膜的细胞的冷冻保存方法
本专利技术涉及，细胞的长期培养方法、细胞培养装置和试剂盒。详细地说，涉及使用聚酰亚胺多孔膜的细胞的长期培养方法，细胞培养装置和试剂盒。此外，本专利技术涉及细胞的冷冻保存方法和试剂盒。具体而言，涉及使用聚酰亚胺多孔膜的细胞的冷冻保存方法和试剂盒。
技术介绍
细胞培养细胞在体内一般作为三维群体存在，在经典的平面培养中，细胞以粘到容器的形式单层培养。在附着性细胞(付着細胞)的培养中，长期以来，不同的培养方法已通过培养皿(皮氏培养皿)(シャーレ)等被开发。通过这种培养皿(皮氏培养皿)(シャーレ)等进行培养的情况下，培养细胞持续增殖，成为被称为“融合(铺满)”的无法再增殖更多的情况下，增殖停止。虽然也取决于细胞类型，在不传代的情况下如果继续这种融合(铺满)状态，那么在一定的时间段后，开始自发地剥落，细胞不能传代的情况也在许多细胞中被发现。随着再生医疗中对由细胞移植与细胞的物质生产得到更多关注，附着性细胞的培养方法不断增长的需求。迄今，利用微载体等的载体的疑似悬浮培养或使用工作表面的球状体培养或使用中空纤维作为细胞培养本文档来自技高网...

【技术保护点】
细胞的长期培养方法，其包括(1)将细胞施加到聚酰亚胺多孔膜，和(2)将施加了细胞的聚酰亚胺多孔膜施加到细胞培养培养基中，将细胞培养30天以上。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.01.26 JP 2015-012537;2015.01.26 JP 2015-012811.细胞的长期培养方法，其包括(1)将细胞施加到聚酰亚胺多孔膜，和(2)将施加了细胞的聚酰亚胺多孔膜施加到细胞培养培养基中，将细胞培养30天以上。2.权利要求1中记载的方法，在工序(2)中，培养细胞60天以上。3.权利要求1中记载的方法，在工序(2)中，培养细胞120天以上。4.权利要求1～3中任一项中记载的方法，将两种以上(两个以上)的聚酰亚胺多孔膜，在细胞培养培养基中上下或左右地层叠。5.权利要求1～4中任一项中记载的方法，将聚酰亚胺多孔膜i)折叠，ii)卷成卷状，iii)将片材或小片通过丝状结构体连接，或iv)系成绳状悬浮或固定在细胞培养容器中的细胞培养培养基中。6.权利要求1～5中任一项中记载的方法，在工序(2)的培养中，聚酰亚胺多孔膜的部分或全部不与细胞培养培养基的液相接触。7.权利要求1～6中任一项中记载的方法，在工序(2)的培养中，在细胞培养容器中包含的细胞培养培养基的总体积是，包括细胞生存区的聚酰亚胺多孔膜体积总和的10000倍或比其更少。8.权利要求1～7中任一项中记载的方法，在工序(2)的培养中，在细胞培养容器中包含的细胞培养培养基的总体积是，包括细胞生存区的聚酰亚胺多孔膜体积总和的100倍或比其更少。9.权利要求1～8中任一项中记载的方法，工序(2)的培养，通过从细胞培养容器外设置的细胞培养培养基供给手段(装置，器件)、连续或间歇地将细胞培养培养基供给至细胞培养容器中的系统进行。10.权利要求9中记载的方法，细胞培养培养基在细胞培养培养基供给手段(装置，器件)和细胞培养容器中之间循环。11.权利要求9或10中记载的方法，其中前述系统是细胞培养装置，其包括是细胞培养容器的培养单元(培养部件)以及是细胞培养培养基供给手段(装置，器件)的培养基供给单元(培养基供给部件)、此处培养单元(培养部件)是容纳用于承载细胞的一种或多种(一个或多个)聚酰亚胺多孔膜的培养单元(培养部件)，是具有培养基供给口和培养基排出口的培养单元(培养部件)，培养基供给单元(培养基供给部件)具备培养基收纳容器，培养基供给线，以及用于通过所述培养基供给线连续地或间歇地将培养基送液的送液泵，此处培养基供给线的第一端部与培养基收纳容器的培养基接触，培养基供给线的第二端部通过培养单元(培养部件)的培养基供给口与培养单元(培养部件)内连通。12.权利要求13中记载的方法，培养单元(培养部件)是不具备空气供给口，空气排出口，和氧交换膜的培养单元(培养部件)。13.权利要求11或12中记载的方法，培养单元(培养部件)还具备培养基排出线，其中，培养基排出线的第一端部连接到培养基收纳容器，培养基排出线第二端部经由培养单元(培养部件)的培养基排出口，连通至培养单元(培养部件)内，培养基能在培养基供给单元(培养基供给部件)以及培养单元(培养部件)之间循环。14.权利要求1～13中任一项中记载的方法，细胞选自由以下组成的组：动物细胞，昆虫细胞，植物细胞，酵母菌和细菌。15.权利要求14中记载的方法，动物细胞是来自属于脊椎动物的动物的细胞。16.权利要求15中记载的方法，细胞选自由以下组成的组：CHO细胞，CHO-K1细胞株，CHODP-12细胞株，CHO细胞关联株，Vero细胞，和MDCK细胞。17.权利要求1～16中任一项中记载的方法，聚酰亚...

【专利技术属性】
技术研发人员：萩原昌彦，清水基久，和田幸周，
申请(专利权)人：宇部兴产株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP