The invention belongs to the technical field of biocatalysis, in particular to a method for fungal catalyzed steroid biotransformation. Sodium alginate grafted cyclodextrin immobilized cells of the invention is constructed for the first time in cyclodextrin medium, fungal cells and reaction solution recycling, reduce production cost, improve the catalytic efficiency in steroid and reduce environmental pollution, achieve the purpose of green biological conversion method has good application value and promotion prospects.
【技术实现步骤摘要】
一种真菌催化甾体生物转化的方法
：本专利技术属于生物催化
，具体涉及一种真菌催化甾体生物转化的方法。
技术介绍
：甾体化合物作为仅次于抗生素的第二大类药物，其在生命体内具有调控各种物质代谢及生理作用的功能。甾体的工业化生产主要是改造天然甾体化合物的结构，与传统化学方法合成相比，微生物转化的方法可以形成多种甾体活性中间体且产物纯度高。环糊精作为增溶剂能增加疏水性甾体的溶解度，其特殊空腔结构可以包结甾体底物，从而提高甾体化合物的生物利用度和产率。但是环糊精的价格较高，制约了其在生物催化领域中的大范围应用；同时微生物转化过程中大量反应溶液的使用造成浪费，并且污染环境，如Tris-HCl缓冲液，PBS缓冲液等。采用合适的方法扩大环糊精在生物转化反应中的应用以及减少反应溶液的浪费、降低环境污染是亟待解决的重要问题。通过接枝技术将环糊精固载到壳聚糖、海藻酸钠等高分子载体上，可以把β-环糊精从溶于水的粉体材料制备成不溶于水的高分子材料，克服环糊精难回收的缺陷，使其能够循环利用，降低工业使用的成本。接枝后的环糊精仍保留独特的空腔结构及其它优良性质，同时还拥有了高分子载体良好...
【技术保护点】
一种真菌催化甾体生物转化的方法，其特征在于，具体如下：在真菌催化的甾体生物转化反应中，以环糊精‑海藻酸钠固定化细胞胶珠作催化剂，反应结束后进行过滤，分别得滤液和过滤物，滤液经离心、有机溶剂萃取后，所得的含有反应溶液的萃余相除去残留有机溶剂后备用，过滤物使用反应溶液洗涤1‑6次后，重新用于甾体生物催化反应，从而实现环糊精介质、真菌细胞和反应溶液的循环利用。
【技术特征摘要】
1.一种真菌催化甾体生物转化的方法，其特征在于，具体如下：在真菌催化的甾体生物转化反应中，以环糊精-海藻酸钠固定化细胞胶珠作催化剂，反应结束后进行过滤，分别得滤液和过滤物，滤液经离心、有机溶剂萃取后，所得的含有反应溶液的萃余相除去残留有机溶剂后备用，过滤物使用反应溶液洗涤1-6次后，重新用于甾体生物催化反应，从而实现环糊精介质、真菌细胞和反应溶液的循环利用。2.如权利要求1所述的一种真菌催化甾体生物转化的方法，其特征在于，所述的真菌是赭曲霉、雅致小克银汉霉、黑根霉或绿僵菌等。3.如权利要求1所述的一种真菌催化甾体生物转化的方法，其特征在于，所述反应溶液为Tris-HCl缓冲液、乙酸-乙酸钠缓冲液或生理盐水，pH5.0-pH7.0。4.如权利要求1所述的一种真菌催化甾体生物转化的方法，其特征在于，所述滤液的处理方法具体如下：(1)滤液经离心后得二次滤液；(2)按照有机溶剂与二次滤液体积比为1-10:1加入有机溶剂萃取，收集萃余相；所述的有机溶剂为乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙酸异丁酯、二氯甲烷或三氯甲烷等；(3)萃余相30-45℃真空旋蒸除去残留有机溶剂后，将回收的反应溶液重新用于甾体生物催化反应。5.如权利要求1所述的一种真菌催化甾体生物转化的方法，其特征在于，回收的反应溶液和细胞胶珠可循环利用6次以上。6.如权利要求1所述的一种真菌催化甾体生物转化的方法，其特征在于，所述的环糊精，具体为羟丙基-β-环糊精、甲基-β-环糊精、磺丁基-β-环糊精、羧甲基-β-环糊精、羟乙基-β-环糊精、...
【专利技术属性】
技术研发人员：王敏，申雁冰，牛璐璐，杨妍，骆健美，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：天津,12
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