The invention discloses a method for preparing novel bioactive peptides, this new type of bioactive peptides obtained, named Spider peptide (SPKP potassium suppressor XIII XIII), is obtained by HPLC cation exchange and reversed-phase HPLC two step three step separation, is a new type of neurotoxin isolated from the identification of Jing Da tarantula venom, its primary structure is composed of 35 amino acid residues, which contains 6 cysteine and three to form two disulfide bonds, C terminal amidation. The molecular weight of 4122.5 Da, the peptide purification physicochemical properties of freeze-dried powder for white or white loose body, no smell, easy to dissolve in water, aqueous solution is colorless and transparent.
【技术实现步骤摘要】
一种天然活性多肽SPKP-XIII的制备方法
本专利技术涉及一种新型生物活性多肽及其制备方法,具体涉及一种通过阳离子交换HPLC以及两步反相HPLC分离获得新型生物活性多肽的方法。
技术介绍
生物毒素是一种重要的生命现象,是生物界在亿万年进化过程中为了生存而形成的,是一个巨大的潜在发现新的生物活性分子的重要资源。目前国际上已经成功筛选到一些生物毒素分子用于治疗某些相关疾病或作为新型药物的设计参考。蜘蛛产生各种作用于神经系统的神经毒素,其神经毒素根据它们的化学结构分为蛋白多肽类神经毒素和多胺类神经毒素。其中蜘蛛多肽神经毒素最重要,蜘蛛多肽类神经毒素根据它们的功能和分子特征可分为两种类型:第一种是低分子量多肽类,它们能与兴奋性细胞膜上的阳离子通道相互作用;第二种是高分子量多肽类,它们与突触前膜的受体组分及增强神经介质的分泌作用密切相关。蜘蛛毒液已成为神经毒素的一个重要新来源,而且蜘蛛毒液中特异性药物和毒素分子也是我们寻找农业杀虫剂的较好模式分子。
技术实现思路
本专利技术的目的旨在于提供一种从广西缨毛蛛粗毒中制备新型生物活性多肽的方法,所述的生物活性多肽为蜘蛛抑钾肽-XIII(SPKP-XIII),其氨基酸序列为:NH2-GluCysArgTrpLeuPheGlyGlyCysGluLysAspAlaSerAspCysCysGluHisLeuGlyCysArgArgAlaLysProSerTrpCysGlyTrpAspPheThrPhe-NH2,所述的蜘蛛抑钾肽-XIII的N端第2位半胱氨酸和第17位半胱氨酸之间,N端第9位半胱氨酸和第22位半胱氨酸之间,N端第16 ...
【技术保护点】
一种从广西缨毛蛛粗毒中制备新型生物活性多肽的方法,所述的生物活性多肽为蜘蛛抑钾肽‑XIII(SPKP‑XIII),其氨基酸序列为:NH2‑Glu Cys Arg Trp Leu Phe Gly Gly Cys Glu Lys Asp Ala Ser Asp Cys Cys Glu His Leu Gly Cys Arg Arg Ala Lys Pro Ser Trp Cys Gly Trp Asp Phe Thr Phe‑NH2。
【技术特征摘要】
1.一种从广西缨毛蛛粗毒中制备新型生物活性多肽的方法,所述的生物活性多肽为蜘蛛抑钾肽-XIII(SPKP-XIII),其氨基酸序列为:NH2-GluCysArgTrpLeuPheGlyGlyCysGluLysAspAlaSerAspCysCysGluHisLeuGlyCysArgArgAlaLysProSerTrpCysGlyTrpAspPheThrPhe-NH2。2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述方法包括:(1)粗毒干粉用双蒸水溶解配成5mg/ml的毒素溶液,12000rpm离心5min,上清用Millipore公司一次性过滤器(0.22µm)过滤后,置于4°C保存;粗毒上样阳离子交换HPLC(ion-exchangeHPLC)进行第一步分离;采用Waters650型HPLC、美国Pharmacia公司的HiprepTM16/10CMFF预装柱进行分离;486检测器检测,检测波长为215nm;流动相为四相洗脱系统,流...
【专利技术属性】
技术研发人员:不公告发明人,
申请(专利权)人:长沙沁才生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:湖南,43
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