一种优化角蛋白酶Ker高效分泌表达的信号肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种优化角蛋白酶高效分泌表达的信号肽及其应用，属于基因工程和酶工程领域。本发明专利技术通过对来源于枯草芽孢杆菌的46种分泌信号肽进行初步筛选，然后对其中6种明显提高角蛋白酶分泌量的分泌信号肽进行定向改造，从而获得一种优化角蛋白酶高效分泌表达的信号肽。此信号肽的N端具有信号肽AbnA的前九个氨基酸残基，H段具有信号肽YfkN的疏水序列，C端具有信号肽PhoB的后四个氨基酸残基。本发明专利技术通过在角蛋白酶Ker的N端融合此信号肽，使重组枯草芽孢杆菌的角蛋白酶分泌效率显著提高，其胞外角蛋白酶酶活提高了3.39倍。改造后的菌株的胞外产角蛋白酶能力显著提高，更利于工业化应用，可降低生产成本，提高生产效率。

A signal peptide optimized for efficient secretion of keratin Ker and its application

The invention discloses a signal peptide optimized for efficient secretion of keratin protease and the application thereof, belonging to the field of gene engineering and enzyme engineering. The method of the invention from Bacillus subtilis 46 secretory signal peptide for preliminary screening, and 6 of them significantly improve keratinase secretion of secretory signal peptide orientation transformation, so as to obtain an optimal signal peptide for efficient expression of keratinase. The N end of the signal peptide has the first nine amino acid residues of the signal peptide AbnA, and the H segment has a hydrophobic sequence of the signal peptide YfkN, and the C end has a four amino acid residue of the signal peptide PhoB. The present invention through the integration of the signal peptide in the N terminal of Ker keratinase, the keratinase recombinant Bacillus subtilis secretion efficiency improved significantly, the extracellular keratinase activity increased 3.39 times. The ability of extracellular protease produced by the modified strain was significantly increased, which was more favorable for industrial application, and could reduce production cost and increase production efficiency.

【技术实现步骤摘要】
一种优化角蛋白酶Ker高效分泌表达的信号肽及其应用
本专利技术属于基因工程和酶工程领域，具体是一种优化角蛋白酶Ker高效分泌表达的信号肽及其应用。
技术介绍
角蛋白是一类不溶性的硬质蛋白，广泛存在于生物体的组织中，是羽毛、毛发、羊毛、指甲、犄角、蹄和鳞片等的主要组成成分。角蛋白作为家禽业的副产物，是一笔可观的再生利用资源。由于角蛋白结构的特殊性，角蛋白很难被一般蛋白酶如木瓜蛋白酶、胃蛋白酶以及胰蛋白酶降解。传统的角蛋白酶处理工艺主要为高温加热酸碱水解法，这不仅会对环境造成污染，而且还会破坏部分氨基酸，从而影响角蛋白的利用率。采用生物转化法如利用角蛋白酶降解羽毛、毛发、羊毛，水解后的蛋白质和多肽物质可以作为饲料添加剂用于家禽饲料中，不仅可以达到资源回收利用和节约粮食的目的，而且也减少了环境污染。因此，发展生物转化法对角蛋白进行回收和处理是形势所需。角蛋白酶作为特异性降解角蛋白的酶类，在饲料、皮革、精化和医药等行业具有广泛的用途，其独有的性质使其拥有其他商品化酶没有的优势，因此角蛋白酶的应用和研究价值巨大。目前角蛋白酶的工业化生产以及应用存在的主要问题是角蛋白酶的胞外表达量较低，难以满足本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种优化角蛋白酶Ker高效分泌表达的信号肽，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

【技术特征摘要】
1.一种优化角蛋白酶Ker高效分泌表达的信号肽，其特征在于，其氨基酸序列如SEQIDNO：1所示。2.一种编码权利要求1所述的信号肽的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如SEQIDNO：2所示。3.应用权利要求2所述基因的核苷酸构建的分泌效率提高的基因工程菌。4.权利要求3所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌是分泌角蛋白酶...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾静，袁林，郭建军，郭浩，王林庚，
申请(专利权)人：江西省科学院微生物研究所，江西鑫维生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：江西,36