一种同时检测多杀性巴氏杆菌及其荚膜A型双重实时荧光定量PCR方法的引物及应用技术
Primer for simultaneous detection of Pasteurella multocida and its capsule type A double real-time fluorescent quantitative PCR method and application thereof
The invention relates to a primer for simultaneously detecting Pasteurella multocida and its capsule type A double real time fluorescent quantitative PCR method, and relates to the field of biotechnology. A primer: Kmt F:5'GCTYGTTGTGAGTGGGCTTGT 3'; Kmt R:5'GCCGTTGTCAAGGAAGCAGAT 3'; Kmt P:5'FAM TTTGTTGGGCRGAGTTTGGTG BHQ13'; CapA F:5' GGGCTGGCTATGTTGGTTTAT 3'; CapA R:5' CTTTATCTGTGATGGGCGATT 3'; CapA P: 5'HEX TAGCTCAACACCACAATGTGATCT3'. Simultaneous detection of kmt1 and hyaD hyaC gene.
【技术实现步骤摘要】
一种同时检测多杀性巴氏杆菌及其荚膜A型双重实时荧光定量PCR方法的引物及应用
本专利技术属于生物
，特别涉及一种同时检测多杀性巴氏杆菌及其荚膜A型的双重Real-timePCR方法的引物及应用。
技术介绍
多杀性巴氏杆菌(Pasteurellamultocida，Pm)可引起人和动物的多种疾病，包括禽霍乱、牛出血性败血症、猪萎缩性鼻炎、兔出血性败血症和人的皮下感染等，对动物造成较高的致病率和死亡率。多杀性巴氏杆菌根据荚膜型的不同分为：A、B、D、E和F型。常规检测多杀性巴氏杆菌抗原的方法是采用细菌分离鉴定，或者增菌后通过普通PCR检测。其中，细菌分离鉴定法在实际操作中非常繁复，且易受杂菌干扰影响，这种方法耗时费力；而普通PCR方法相较于传统的分离鉴定检测法，虽然较为灵敏快捷，但是对目标菌在菌液中的含量以及杂菌数量等方面要求较为严格，且有可能出现假阴性与假阳性等结果。细菌荚膜的分型主要采用血清学方法和荚膜PCR分型：血清学方法需要荚膜型标准血清，很难购买到，费时费力。
技术实现思路
本专利技术的目的在于：过设计两对高特异性引物，采用Taqman实时荧光定量PCR方...
【技术保护点】
一种同时检测多杀性巴氏杆菌及其荚膜A型双重实时荧光定量PCR方法的引物及应用，其特征在于，所述的引物包括上、下游引物和Taqman探针引物，具体如下：针对多杀性巴氏杆菌的引物及探针序列如下：上游引物Kmt‑F：5'‑GCTYGTTGTGAGTGGGCTTGT‑3'；下游引物Kmt‑R：5'‑GCCGTTGTCAAGGAAGCAGAT‑3'；探针引物Kmt‑P：5'FAM‑TTTGTTGGGCRGAGTTTGGTG‑BHQ1 3'；针对荚膜A型的引物及探针序列如下：上游引物CapA‑F：5'‑GGGCTGGCTATGTTGGTTTAT‑3'；下游引物CapA‑R：5'‑CTT...
【技术特征摘要】
1.一种同时检测多杀性巴氏杆菌及其荚膜A型双重实时荧光定量PCR方法的引物及应用，其特征在于，所述的引物包括上、下游引物和Taqman探针引物，具体如下：针对多杀性巴氏杆菌的引物及探针序列如下：上游引物Kmt-F：5'-GCTYGTTGTGAGTGGGCTTGT-3'；下游引物Kmt-R：5'-GCCGTTGTCAAGGAAGCAGAT-3'；探针引物Kmt-P：5'FAM-TTTGTTGGGCRGAGTTTGGTG-BHQ13'；针对荚膜A型的引物及探针序列如下：上游引物CapA-F：5'-GGGCTGGCTATGTTGGTTTAT-3'；下游引物CapA-...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭东春，曲连东，刘家森，刘大飞，姜骞，
申请(专利权)人：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23
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