一种藻毒素降解菌的分子标记、藻毒素降解菌及藻毒素降解菌的制备方法技术

技术编号:16211859 阅读:67 留言:0更新日期:2017-09-15 17:44
本发明专利技术公开了一种藻毒素降解菌的分子标记、藻毒素降解菌及藻毒素降解菌的制备方法。所述分子标记的序列如序列表中SEQ ID NO:1所示。所述藻毒素降解菌包括上述分子标记。该藻毒素降解菌的分子标记能够作为特异性标识物能够用于筛选藻毒素降解菌,含有该分子标记的目的基因的感受态细胞能够有效降解藻毒素。本发明专利技术实施例提供的制备方法,将启动子构建到含有该分子标记的枯草芽孢杆菌RIK1285后能够得到藻毒素降解菌,且枯草芽孢杆菌RIK1285为分泌型的益生菌,这使得该藻毒素降解菌不仅能够有效分泌藻毒素降解酶,从而降解水体中的藻毒素解决藻毒素污染的问题,而且枯草芽孢杆菌RIK1285具有益生功能,这使得本发明专利技术实施例制备的藻毒素降解菌能够在实际中应用。

【技术实现步骤摘要】
一种藻毒素降解菌的分子标记、藻毒素降解菌及藻毒素降解菌的制备方法
本专利技术涉及生物
,特别涉及一种藻毒素降解菌的分子标记、藻毒素降解菌及藻毒素降解菌的制备方法。
技术介绍
蓝藻毒素(Cyanotoxin)中的微囊藻毒素(Microcystin,MC)常常简称为藻毒素。藻毒素是一种肝毒素,具有强烈的促癌效应,严重威胁人类的健康。在水中藻毒素自然降解过程是十分缓慢的,在水中只有少量的藻毒素能够被水体中微粒吸收。同时,藻毒素有很高的耐热性,加热煮沸都不能将毒素破坏,也不能将其去除。现有技术中去除藻毒素的方式为通过生物酶降解藻毒素,具体地,将目的基因MlrA构建到原核表达载体上得到重组载体,将该重组载体转化到大肠杆菌中,得到表达菌,将表达菌进行诱导表达,收集菌体,破碎后利用重组载体上的融合蛋白表达标签纯化后得到藻毒素降解酶。在实现本专利技术的过程中,专利技术人发现现有技术至少存在以下问题:现有的藻毒素降解酶在制备过程中,需要将重组载体转化到大肠杆菌中,由于大肠杆菌是致病菌,这使得制备出的藻毒素降解酶并不能在实际中应用。
技术实现思路
为了解决现有技术中降解藻毒素的生物酶并不能在实际中应用本文档来自技高网...
一种藻毒素降解菌的分子标记、藻毒素降解菌及藻毒素降解菌的制备方法

【技术保护点】
一种藻毒素降解菌的分子标记,其特征在于,所述分子标记的序列如序列表中SEQ ID NO:1所示。

【技术特征摘要】
1.一种藻毒素降解菌的分子标记,其特征在于,所述分子标记的序列如序列表中SEQIDNO:1所示。2.一种藻毒素降解菌,其特征在于,所述藻毒素降解菌包括如权利要求1所述的分子标记。3.一种制备如权利要求2所述的藻毒素降解菌的方法,其特征在于,所述方法包括:将如序列表中SEQIDNO:1所示的分子标记构建到表达载体上,得到重组表达载体;将所述重组表达载体转入到受体菌的感受态细胞中,培养后得到藻毒素降解菌,所述受体菌为枯草芽孢杆菌RIK1285。4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述将如序列表中SEQIDNO:1所示的分子标记构建到表达载体上,包括:将含有如序列表中SEQIDNO:1所示的分子标记的目的基因MIrA、启动子Pglv和枯草源信号肽SacB分别克隆至质粒PrepU-cmr上,得到重组质粒PMIrA-CmR,所述目的基因MIrA的序列如序列表中SEQIDNO:2所示;提取所述枯草芽孢杆菌RIK1285的基因组,并将所述基因组作为模版,利用如序列表中SEQIDNO:3所示的上游引物和如序列表中SEQIDNO:4所示的下游引物进行PCR扩增,得到扩增产物;将所述扩增产物与所述重组质粒PMIrA-CmR分别进行双酶切,纯化后于16℃过夜连接,得到重组表达载体PMIrA-repU。5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述质粒PrepU-cmr的选择标记为氯霉素抗性,所述质粒PrepU-cmr的启动子为启动子repU。6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述...

【专利技术属性】
技术研发人员:李筱雯毕丁仁况世昌韩继宏刘锡玲欧阳潮龙兴权
申请(专利权)人:湖北华大瑞尔科技有限公司
类型:发明
国别省市:湖北,42

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